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脑型一氧化氮合成酶的钙调蛋白结合区的表达及活性鉴定 总被引:1,自引:0,他引:1
用PCR法克隆出nNOS的CaM结合区基因(nNOS 2455~2988bp),并在大肠杆菌中进行了高效表达。经金属离子螯合亲和层析得到纯度为90%以上的重组蛋白.分子量为22kDa,CaM Oveday assay证实该蛋白具有CaM的结合活性。由于所表达的重组蛋白既具有序列特异性又具有CaM的结合活性.因此。可将它作为筛选nNOS特异性抑制肽的靶蛋白,亦可用于特异性抗体的制备。 相似文献
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杆状病毒的分子生物学研究进展 总被引:1,自引:0,他引:1
杆状病毒科(Baculoviridae)是昆虫病毒中最大的一科,数百种病毒多为鳞翅目、双翅目及膜翅目昆虫的致病原。这一科病毒共分三个亚组:A亚组,具有巨大包含体的核多角体病毒(Nuclear Polyhedrosis Virus,NPV);B亚组,颗粒体病毒(Gtallulin Virus,GV);C亚组,无包含体的独角仙杆状病毒(Oryctes)。昆虫病毒中,杆状病毒是发现最 相似文献
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选择肿瘤坏死因子分子中间部分保守区第56位酪氨酸,用寡核苷酸诱导的体外基因定点突变法,将其改变为谷氨酰胺。将突变的肿瘤坏死因子基因插入表达载体pBV220,所得表达产物的分子大小及表达量均无明显变化,但其细胞毒活性及比活性均下降数百倍,表弱该区是肿瘤坏死因子细胞因子细胞毒活性的必需区。 相似文献
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本文对两个重组人γ干扰素高效表达株pIFN-γ及PBVIFN-γ的表达产物进行了纯化并对纯化的γ干扰素进行了活性鉴定及N端氨基酸序列分析。采用连续沉淀的方法对高表达菌株pBVIFN-γ及低表达菌株pIFN-γ,裂解液进行初步纯化,然后应用单克隆抗体亲和层析方法进行纯化,分别可纯化14倍与933倍,均达电泳纯,回收率分别为25%和30%,比活性达7.56×10~7U/mg蛋白。SDS-PAGE电泳上γ干扰素分子量约17.5kD。测定了纯化的γ干扰素N末端19个氨基酸序列,与由其DNA序列推导的氨基酸序列完全一致,确认了本研究所表达、纯化的γ干扰素达到了较高纯度。本方法为γ干扰素的批量生产奠定了基础。 相似文献
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