一例乙型肝炎患者体内不同HBV克隆的序列差异

采用ＰＣＲ扩增、噬菌体克隆和核苷酸序列分析的方法对一例乙型肝炎患者体内ＨＢＶ的ＨＢｓＡｇ编码区和部分前Ｓ２区进行序列分析。结果发现同一患者体内获得的不同ＨＢＶＤＮＡ克隆间存在个别碱基的差异,而这种差异并非方法学本身产生的。由此得出的结论是,这种碱基“突变”反映了乙型肝炎患者体内ＨＢＶ基因组实际存在的多态性。     

金属硫蛋白对缺氧／复氧心肌细胞的保护作用

金属硫蛋白 (ＭＴ)是普遍存在各种生物体内、富含硫基的小分子蛋白 ,在缺血 /再灌注 (Ｉ/Ｒ)损伤中通过清除自由基减轻心肌细胞损伤 ,同时ＭＴ参与预缺血保护 (ＩＰＣ)。目前对ＭＴ在ＩＰＣ中的保护作用机制及功效仍无明确研究 ,本实验以培养的乳鼠心肌细胞缺氧 /复氧模拟缺血 /再灌注损伤 ,检测心肌细胞在ＩＰＣ处理后 2 4ｈＭＴ的含量、脂质过氧化程度及Ｎａ Ｋ ＡＴＰ酶、Ｃａ2 Ｍｇ2 ＡＴＰ酶的活力变化 ,锌诱导产生的ＭＴ作用 ,并比较ＭＴ与抗氧化剂谷胱甘肽 (ＧＳＨ)的保护作用 ,初步探讨ＭＴ的心肌保护作用机制及应用价值。1　…     

乙型肝炎病毒的表面抗原126位Ilie→Ser变异株

乙型肝炎病毒的表面抗原１２６位Ｉｌｉｅ→Ｓｅｒ变异株房德兴,甘人宝,李载平（中国科学院上海生物化学研究所,２０００３１）段恕诚（上海医科大学附属儿科医院,２０００３２）关键词乙型肝炎病毒,Ｓ基因,表面抗原,变异株乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）为嗜肝ＤＮＡ病毒...     

组织型纤溶酶原激活因子的分子生物学研究进展

血栓性疾病,尤其是急性心肌梗塞严重威胁着人类的生命与健康,目前国内外临床应用的溶血栓药物主要有:链激酶(streptokinase,SK)、尿激酶(urokinase,UK)以及近年来开始广泛研究和初步应用的纤溶酶原激活因子(PA)。     

乙型肝炎病毒S基因变异研究的新进展

目前,对乙型肝炎病毒（HBV）的S基因变异的研究,仍然是国内外关注的热点。S基因变异是导致HBV基因序列多样性的重要原因,它与乙型肝炎的各种临床表现有密切的关系。本文就S基因变异的形成机制及其医学意义做一简要综述。     

一例乙型肝炎患者体内不同HBV克隆的序列差异

采用PCR扩增、噬菌体克隆和核苷酸序列分析的方法对一例乙型肝炎患者体内HBV的HBsAg编码区和部分前S2区进行序列分析.结果发现同一患者体内获得的不同HBV DNA克隆间存在个别碱基的差异,而这种差异并非方法学本身产生的.由此得出的结论是,这种碱基"突变"反映了乙型肝炎患者体内HBV基因组实际存在的多态性.     

乙型肝炎病毒adr亚型X蛋白在大肠杆菌中的高效表达

将ａｄｒ亚型ＨＢＶ的完整Ｘ基因克隆到表达质粒ｐＰｒｏＥＸＨＴｂ中,实现了Ｘ蛋白在大肠杆菌中的高效融合表达。表达产物全长１７９个氨基酸残基（其中Ｘ蛋白部分１５４个氨基酸残基）,分子量约１９．７ｋＤ,约占细菌总蛋白的３４％。其氨基端融合部分含有６组氨酸肽段,经ＨｉｓＴｒａｐＴＭ亲和层析纯化,一步可达纯度９３％。Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹分析表明,该表达产物可与ＨＢＶ感染患者体内的抗Ｘ抗体特异性结合。     

人胰岛素原类似物(BKRA)基因的合成与表达

为了利用基因工程生产胰岛素,按照已知的人胰岛素Ａ、Ｂ链氨基酸序列和大肠杆菌偏爱的氨基酸密码子设计并合成了人胰岛素原类似物（ＢＫＲＡ）基因,其中以赖（Ｋ）－精（Ｒ）二肽编码区取代人胰岛素原Ｃ肽编码区．为了避免其编码蛋白在大肠杆菌中表达时被降解,通过人工接头将２个ＢＫＲＡ基因串联起来,接头部分氨基酸序列为Ａｒｇ－Ａｒｇ－Ａｓｎ－Ｓｅｒ．将串联的ＢＫＲＡ基因克隆到表达载体ｐＥＴ－２８ａ（＋）,实现了在大肠杆菌中的融合表达,表达产物以包含体形式存在,约占细菌总蛋白２４％．表达产物氨基末端具有六组氨酸肽段,以ＨｉＴｒａｐ凝胶进行亲和层析,一步纯化可达纯度９５％以上．放射免疫测定表明,纯化的融合蛋白具有胰岛素抗原活性．表明已构建成人胰岛素原类似物的高效表达菌株