过表达调控基因rapG提高雷帕霉素的产量

雷帕霉素是具有很好的抗真菌、免疫抑制、抗肿瘤等活性的微生物次级代谢产物,可由吸水链霉菌(Streptomyces hygroscopicus)发酵产生。由于传统诱变育种的菌株产量较低,不能满足工业生产的需求。为了找到突破传统育种瓶颈的技术方法。本研究通过建立该菌株的遗传操作体系、构建表达载体、建立发酵、提取和检测等的研究方法,对传统诱变菌株(S.hygroscopicus17-1)进行遗传改造。首先,以整合型载体pSET152为出发载体,构建了含有自身启动子的rapG调控基因表达载体,建立并优化了该菌株的遗传操作系统,通过大肠杆菌与链霉菌属间接合转移的方法成功将rapG整合至原菌株基因组上,获得了该基因的多拷贝菌株S.hygroscopicus17-Gp。采用高压液相色谱和质谱等方法,检测分析了S.hygroscopicus17-1与S.hygroscopicus17-Gp发酵液中雷帕霉素的产量。结果表明S.hygroscopicus17-Gp发酵液中雷帕霉素的产量比原菌株提高了约40%,这为后期进行相关机制和产量提高的理论与实践研究奠定了基础。     

基于老年综合评估结果指导治疗对老年冠心病患者心功能、脂代谢和生活质量的影响

摘要 目的：探讨基于老年综合评估结果指导（CGA）治疗对老年冠心病患者心功能、脂代谢和生活质量的影响。方法：本次研究将2020年6月-2022年1月在江苏省人民医院心血管内科接受治疗的106例老年冠心病患者,采用随机数字法将其随机分为对照组（常规药物治疗,53例）与研究组（对照组的基础上结合CGA治疗,53例）。对比两组疗效、心功能、脂代谢和生活质量相关情况。结果：研究组的临床总有效率为94.34%,明显高于对照组的79.25%（P<0.05）。研究组治疗3个月后左心室舒张期末内径（LVEDD）、左心室收缩期末内径（LVESD）低于对照组,左心室射血分数（LVEF）高于对照组（P<0.05）。研究组治疗3个月后高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）高于对照组,甘油三酯（TG）、总胆固醇（TC）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）低于对照组（P<0.05）。研究组治疗3个月后病情、体力、医疗状况、一般生活、社会心理状况、工作状况各维度评分高于对照组（P<0.05）。研究组的住院期间心脏不良事件总发生率低于对照组（P<0.05）。结论：基于CGA治疗老年冠心病,可有效改善心功能、脂代谢,降低住院期间不良事件发生率,提高患者的生活质量。     

钙与心肌缺血再灌注诱发的心肌细胞凋亡

细胞凋亡 ( Apoptosis)是最基本的细胞死亡过程 ,是一种普遍存在的生命现象。细胞凋亡与细胞增殖的动态平衡是多细胞生物维持其结构稳定及内环境动态平衡和生长发育所必有的最基本的生物学现象。不适当的细胞凋亡所致的凋亡失调性疾病( Disease of Disregulated Apoptosis,DDA)正受到人们的关注 [1]。这些疾病包括细胞凋亡减弱性疾病和细胞凋亡增强性疾病 ,前者如肿瘤、自身免疫性疾病、病毒感染及慢性炎症性疾病。后者包括神经元退行性疾病、造血衰竭性疾病、缺血性损伤等。在心血管系统疾病中 ,心肌梗塞、心肌缺血再灌注损伤、心肌炎、…     

重组野猪α-干扰素基因的高效表达和下游工艺的研发

利用PCR方法,从东北野猪和长白猪的肌肉基因组DNA中分别扩增出一条501bp的基因片断 ,与GenBank上登载的猪α-干扰素基因序列相比,核苷酸同源性达到98.4%以上。以其中野猪α-干扰素基因片断为参考模板,经过密码子优化、5?和3?区域的mRNA二级结构优化,全基因合成得到编码野猪α-干扰素基因成熟肽的基因。克隆该基因到原核表达载体pWL之中.随后转化至宿主菌DH-5α。经过SDS-PAGE电泳检测,发酵后的重组野猪IFN-α-干扰素基因的蛋白表达量大于25%。复性纯化后的重组蛋白,经过VSV-WISH系统检测,其生物活性为4.45×106IU/mg。     

异丙甲草胺对芹菜根际与非根际生物活性的影响

通过根际袋法土培试验,研究了异丙甲草胺对芹菜根际与非根际土壤酶活性、土壤微生物数量的影响以及异丙甲草胺在根际与非根际土壤中的降解特性.结果表明,异丙甲草胺对土壤过氧化氢酶活性有一定的抑制作用,对土壤脱氢酶活性有激活作用.一般情况下根际土壤酶活性均要大于非根际土壤.异丙甲草胺作用45 d后,芹菜根际土壤细菌、真菌数量大于非根际土壤,根际效应R/S在1.76～2.51之间;异丙甲草胺对土壤放线菌数量影响不大,根际效应不明显.异丙甲草胺在根际土壤与非根际土壤中的降解速率分别为0.0217和0.0176,相应的半衰期分别为31.9和39.4 d.在根际土壤中异丙甲草胺更易降解.     

球囊子宫支架预防宫腔粘连术后再粘连的疗效及对子宫出血的影响

目的:研究球囊子宫支架预防宫腔粘连术后再粘连的疗效及对子宫出血的影响。方法:选取2013年10月到2014年10月我院收治的宫腔粘连患者70例,按照随机数字表法将患者分为研究组和对照组,每组35例,对照组给予宫腔镜电切术、宫内节育器放置术以及人工周期治疗,研究组在对照组的基础上给予球囊子宫支架放置术,比较两组临床疗效、宫腔再粘连、术后出血量、月经恢复以及并发症。结果:研究组总有效率91.4%,显著高于对照组的77.1%(P0.05);术后1个月和2个月研究组总粘连率显著低于对照组(P0.05);研究组术后总出血量显著少于对照组(P0.05);研究组并发症总发生率显著低于对照组,月经恢复率显著高于对照组(P0.05)。结论:球囊子宫支架应用于宫腔粘连术具有较好的临床疗效,能显著降低宫腔再粘连,减少子宫出血量及并发症。     

基于CRISPR/Cas系统的天然产物生物合成基因簇克隆和编辑技术

合成生物学和基因组测序技术的快速发展使挖掘和高效合成天然产物进入了一个全新的时代。由于多数原始菌株生长缓慢、难以培养及遗传改造困难等问题,导致天然产物生物合成基因簇的激活和高效表达受到严重制约。基于此,将原始菌株来源的基因簇转移到操作简便、遗传背景清晰的模式宿主中进行异源表达成为天然产物发现和产量提高的一种有效手段。其中,基因簇的克隆与编辑是实现天然产物异源表达的一个主要限速步骤。CRISPR/Cas技术的应用极大地提高了大型基因簇克隆和编辑的效率,有效促进了微生物来源新药的发现。本文针对基于CRISPR/Cas开发的基因簇克隆和编辑技术进行了系统梳理和全面总结,探讨相关技术在天然产物挖掘和高效合成中的应用及其重要意义。     

冷冻球囊消融术与射频导管消融术治疗阵发性心房颤动的疗效比较及术后1年复发的危险因素探讨

摘要 目的：对比冷冻球囊消融术（CBA）与射频导管消融术（RFCA）治疗阵发性心房颤动（AF）的疗效,并探讨术后1年复发的危险因素。方法：选择2019年2月～2021年2月期间我院收治的阵发性AF患者100例,根据手术方案的不同将患者分为A组（n=48,RFCA）和B组（n=52,CBA）。对比两组手术相关指标、并发症发生率和术后1年复发率情况。根据是否复发将所有患者分为复发组和无复发组,多因素Logistic回归分析术后1年复发的危险因素。结果：B组的手术时间、消融时间、X线曝光时间短于A组（P<0.05）。B组的并发症总发生率低于对照组（P<0.05）。两组复发率组间对比差异无统计学意义（P>0.05）。单因素分析显示,阵发性AF患者术后1年复发与B型利钠肽（BNP）、年龄、白细胞计数（WBC）、体质量指数、肌酐（Cr）、合并高血压、超敏C反应蛋白（hs-CRP）、合并糖尿病、左心房内径（LAD）、合并冠心病、病程、尿酸、心电图f波类型有关（P<0.05）。多因素分析结果显示：病程偏长、尿酸偏高、LAD偏大、年龄偏大、hs-CRP偏高、心电图f波类型为细波、BNP偏高是阵发性AF患者术后1年复发的危险因素（P<0.05）。结论：CBA与RFCA治疗阵发性AF,均可获得较好的疗效,CBA在改善患者手术情况及安全性方面的效果较好。阵发性AF患者术后1年的复发率较高,病程、尿酸、LAD、年龄、hs-CRP、BNP、心电图f波类型均是其影响因素。     

我国目前妥善处理医疗纠纷面临的三个关键问题

通过分析我国目前医疗纠纷的实际状况,得出妥善处理医疗纠纷面临的3个关键问题：法律体系的科学统一;执法过程的公平公正;建立健全医疗损害责任保险制度并纳入法制管理轨道。