基于质谱的BLAST方法在金鱼胚胎蛋白质鉴定中的应用

未知基因组及蛋白质序列数据库有限的物种的蛋白质组学分析是当前一些非模式生物物种蛋白质组学研究领域的瓶颈之一.基于同源性搜索的BLAST方法（MS BLAST）,是近年新发展起来的一种用于未知基因组的蛋白质鉴定的搜索工具,已成功应用于许多未知基因组物种的蛋白质鉴定.SPITC化学辅助方法是本实验室建立的一种改进的de novo质谱测序方法.采用MS BLAST方法对经Mascot软件数据库搜索未能鉴定到的19个金鱼胚胎蛋白质进行鉴定,其中12个蛋白质是直接测序后进行MS BLAST搜索得到的结果,另外7个蛋白质是联合MS BLAST和SPITC衍生方法得到的鉴定结果.实验结果证明,采用MS BLAST方法进行蛋白质的跨物种鉴定具有可行性和可靠性,给蛋白质的跨物种鉴定提供了一条新的途径.     

化学合成的α—降钙素基因相关基因在大肠杆菌和哺乳…

通过化学法合成α－降钙素基因相关肽的基因,该基因５＇端有ＢａｍＨ Ｉ切点和启始密码,３＇端有ＤａｌＩ切点和终止密码。为了表达这一基因,组建表达载体ｐＸＺ６２．这一表达载体具有Ｔｒｅ启动子,含有Ａｐ＾ｒ和ＸｙＬＥ基因。α－降钙素基因相关肽基因与ｐＸＺ６２边接,构建重组质粒ｐＸＺ１０１;并将该基因与质粒ｐＨβＡＰｒ－３Ｐ－ｎｅｏ连接,构建重组质粒ｐＸＺ２０１．将重组质粒分别转化到大肠矸菌和ＨｅＬａ细胞     

对PCR扩增片段克隆操作的几点体会

PCR,技术的应用，极大方便了对已知序列基因某一片段的克隆，但在实际操作中某些容易忽视的因素有可能导致实验失败，以下将我们在这方面工作中的几点体会总结如下以供借鉴。1．引物设计。在引物5＇端设计酶切位点序列时一般要加保护碱基，如BamHI识别序列为5＇-GGATCC，应设计成5＇－CGGGATCC，这样才能保证下一步酶切反应的正常进行，因为5＇端裸露的位点往往不能为限制酶识别，具体何种位点加什么保护碱基可参阅NewEnglandBiolabs96／97Catalog或其它有关材料。2．片段处理。PCR扩增片段最好用酚：氯仿抽提以除尽Taq酶，单纯…     

细胞培养基底单轴拉伸装置的研制

为了解决现有加载装置存在因基底膜面积太小而不能实现对大量细胞内蛋白一次,l生取样进行研究的问题,研制了一种适于大面积细胞培养拉伸装置,该装置还具有具有对应变的大小、方向、频率和时间可控的优点,可广泛地运用于细胞力学加载的相关领域的研究工作.     

提高规范化培训住院医师在CCU沟通能力的探讨

摘要：随着生物医学模式向生物．心理．社会医学模式的转变,构建和谐的医患关系成为当今医学发展和进步的时代新要求,构建和谐的医患关系,有效的医患沟通是获得良好医疗效果的基本保证,本文总结了目前参加规范化培训的住院医师在心脏科重症监护室培训轮转期间医患沟通中存在的问题,分析了沟通障碍的主要影响因素,包括住院医师对医患关系的沟通认识不够充分,沟通技巧不够,工作负担增加,患方经济负担增加,治疗效果心理预期增加,医患双方认知差异增加,失信增加,健康和维权意识增加等都影响了医患关系的和谐构建;心脏重症监护室是心血管系统中常见病,多发病发展到终末期或急重期间的治疗场所,特点是病情急,危,重,死亡率高,结合其医患关系的实际特点,提出了提高住院医师沟通能力的可行性措施,主要包括：沟通的内容务必真实可信,形式力求形象,换位思考,注重诚信待人,加强非语言沟通,注重沟通分寸,尊重患者或家属的知情同意权,加强心脏监护室的细节规范化管理等。     

射血分数保留的老年心力衰竭患者的临床特征

目的:分析和比较射血分数保留的心力衰竭(HFp EF)、射血分数中间值(HFmr EF)及射血分数降低的老年心力衰竭(HFr EF)患者临床特征的差异。方法:选取2017年9月至2018年8月哈尔滨市第一医院收治的老年慢性心力衰竭患者共287例,根据心动超声所测左室舒张末期内径(LVEF)值将其分为3组:HFpEF组175例、HFmr EF组50例和HFr EF组62例。比较各组患者一般情况、心动超声检查结果、血清学指标的差异。结果:(1)与HFr EF组患者比较,HFpEF组患者年龄、性别、吸烟史、体重指数(BMI)、原发冠心病、高血压、2型糖尿病患者比例、房颤发生率及心功能分级构成比均具有统计学差异(P0.05);(2)与HFr EF组相比较,HFpEF组患者的E/A比值,左房内径、肺动脉内径、LVEDD较小,而室间隔厚度较厚(P0.05);(3)与HFr EF组患者相比,HFpEF组血清总胆固醇、甘油三酯较高;血肌酐、血尿素氮、血尿酸、超敏C反应蛋白、N-末端脑钠肽前体水平较低,具有统计学差异(P0.05)。结论:老年HFpEF心力衰竭患者以女性居多,体重指数较大,以向心性肥胖为主,血压水平较高,心功能II级者比例高,有明显的舒张功能不全,易发生房性心律失常,房颤发生率高,主要病因为高血压。     

血清γ-谷氨酰转肽酶水平与老年2型糖尿病患者并发急性冠脉综合征的相关性分析

目的:探讨血清γ-谷氨酰转肽酶(GGT)水平与老年2型糖尿病患者并发急性冠脉综合征的相关性。方法:选取2015年10月至2016年10月哈尔滨市第一医院收治的老年患者238例,根据病情分为单纯2型糖尿病组81例(DM组),单纯急性冠脉综合征组78例(ACS组),2型糖尿病患者合并急性冠脉综合征79例(DA组);选取同期来我院体检健康者83例作为对照组(NC组)。比较各组一般情况和血清学指标。结果:(1)DA组BMI大于NC组、DM组和ACS组,血清GGT、糖化血红蛋白(HbA1C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平显著高于NC组、DM组和ACS组,血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)水平均高于NC组,高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平低于NC组(P0.05)。(2)血清GGT水平与TG、LDC-C水平呈正相关(p0.05)。结论:血清GGT水平升高是老年2型糖尿病患者并发急性冠脉综合征的独立危险因素,及时监测老年2型糖尿病患者GGT水平对预测急性冠脉综合征的发生具有重要意义。     

3例腔镜下经口入路行甲状腺切除术的临床观察

目的:探讨腔镜下经口入路行甲状腺切除术治疗甲状腺疾病的可行性以及临床应用价值。方法:选择2012年4月~2013年6月就诊于淮安市淮阴医院普外一科的3例良性甲状腺病变患者,行腔镜下经口入路甲状腺切除术,观察并总结患者的手术情况和术后恢复情况。结果:3例患者手术均成功,手术时间为100~240 min,平均170 min。术中无中转,出血量10-40 ml,切口未放引流,术后恢复良好,无并发症发生。结论:腔镜下经口入路行甲状腺切除术安全有效,可作为治疗甲状腺疾病的另一种微创手术方式进行深入探讨。     

BAFF-R 胞内区与TRAF3 相结合关键分子结合域的确定

目的：研究BAFF-R 胞内区与TRAF3 相互作用的关键结合域。方法：分别钓取BAFF-R 胞内区和TRAF3 的cDNA 片段,克 隆到酵母双杂交系统中,验证两者之间的相互作用。利用缺失PCR和重叠PCR 的方法获取11 个TRAF3 的突变体,验证TRAF3 的11 个突变体和BAFF-R 胞内区的相互作用。结果：TRAF3 与BAFF-R胞内区发生相互作用时,有三个关键的分子结合域,分别 是N 端的螺旋结构382- 400 位氨基酸、中间的428－463 位氨基酸以及TRAF3 C端的543－560 位氨基酸。结论：在体内得到了 BAFF-R胞内区与TRAF3 相互作用的三个关键分子结合域,有助于展开对BAFF-R 胞内区与TRAF3 相互作用的进一步研究。