急性大肠杆菌性腹膜炎时肺的变化及腑安冲剂的影响

用Ｏ（１１１）Ｂ４大肠杆菌（９×１０８个／ｍｌ）与１０％硫酸钡佐剂给ＳＤ大鼠腹腔注射诱发急性腹膜炎为模型。随机分为三组：（１）模型组（２）正常对照组（３）模型＋中药治疗组,观察急性实验性腹膜炎时的肺损伤及腑安冲剂的保护作用。结果显示：（１）中药组内毒素、肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）、肺匀浆的脂质过氧化产物均明显低于模型组,接近正常组;（２）中药组的还原型谷胱甘肽（ＧＳＨ）明显高于模型组（Ｐ＜０．０１）。（３）中药组肺系数,肺灌洗液蛋白及白细胞计数与模型组比均有显著差异（Ｐ＜０．０１）。提示腑安冲剂可能通过降低外周血内毒素、ＴＮＦ,抑制脂质过氧化物的产生与加强自由基的清除,从而显著减轻急性腹膜炎引起的肺水肿,保护肺功能。     

艾叶多糖提取率影响因素分析及提取条件优化

艾叶是菊科(Compositae)植物艾(Artemisia argyi Lévl.et Vant.)的干燥叶,为常用中药材之一,药用历史悠久,具有苦燥辛散、理气血、温经脉、逐寒湿、止冷痛等功效,为重要的妇科用药,可用于治疗脘腹冷痛、经寒不调、宫冷不孕等证.此外,利用艾叶预防瘟疫已有悠久的历史.现代药理研究表明:艾叶是一种广谱抗菌抗病毒中药,对多种病毒和细菌有抑制和杀伤作用,对呼吸系统疾病以及心血管等慢性疾病有一定的防治作用[1-3].因此,将艾叶中的有效成分分别提取和纯化并加以分析以及功能检测,具有深远意义.     

家蚕核型多角体病毒遍在蛋白及结合肽的研究

从家蚕核型多角体病毒镇江株(Bombyx mori nuclear polyhedrosis virus Zhenjiang strain, BmNPV-ZJ)基因组DNA中克隆遍在蛋白（BmVUB）基因.序列分析结果显示,BmVUB基因长234 bp,编码77个氨基酸.BmVUB氨基酸序列内有一致HTH序列,遍在蛋白保守序列LRLRGG,参与遍在蛋白-蛋白酶复合体形成的4个保守性功能位点(Lys-29、Cys-48、Cys-63、Gly-76)及保守的Gly-Gly-X（X是疏水氨基酸残基）蛋白酶切信号序列,在遍在蛋白保守的Gly-Gly后多出由一个氨基酸组成的延伸肽.原核诱导表达表明BmVUB主要以可溶性形式存在,表达量占总菌蛋白的50%以上.纯化的遍在蛋白浓度为1.03～2.46 g/L,制备抗体,效价在3.2×10^-5以上.用噬菌体表面展示技术筛选遍在蛋白结合肽,所筛选的结合肽可与遍在蛋白特异性结合,其中结合肽VAPHHAYAPMRT对细胞增殖有明显的浓度调控作用,即低浓度促进细胞生长,高浓度强烈抑制细胞的生长.     

大孔吸附树脂结合硅胶柱层析纯化环孢菌素A

采用大孔吸附树脂层析结合硅胶柱层析,对环孢菌素A的分离纯化进行研究,确定了最佳层析条件,建立了工业化制备环孢菌素A的工艺。大孔吸附树脂层析选用D101树脂作为吸附介质,提取液丙酮含量控制在50%,最大吸附量为35 mg/g湿树脂,洗脱剂选用丙酮;硅胶柱层析选用42~64μm硅胶作为层析介质,最优层析条件为柱床高径比10∶1,流动相配比V(石油醚)∶V(丙酮)=70∶30,流速80 mL/m in,环孢菌素A上样质量浓度100 g/L,硅胶层析平均收率为84.2%,环孢菌素A纯度可达到97%以上,整个工艺总收率为65%~70%。     

兴安落叶松肌动蛋白基因的分离与序列分析

以兴安落叶松(Larix gmelinii)实生苗为材料,提取总RNA和基因组DNA;利用兼并PCR及RACE技术克隆肌动蛋白基因(Lg-act).序列分析的结果显示,该基因cDNA全长1662 bp,编码377个氨基酸;基因组DNA长度约为2564bp,包含4个内含子,5个外显子.所克隆的Lg-act cDNA序列与GenBank中注册的其它植物肌动蛋白核苷酸序列的相似性均在77％以上,氨基酸序列的相似性高达93％以上.根据高等植物肌动蛋白相似性构建的系统树显示,兴安落叶松肌动蛋白与挪威云杉肌动蛋白之间的亲缘关系较为密切,在进化中分化时间最为接近.     

CTSB 对人脐静脉血管内皮细胞系增殖及凋亡的影响

目的:探索组织蛋白酶B(CTSB)对人脐静脉血管内皮细胞系(HUVEC)增殖及凋亡的影响。方法:采用细胞转染法得到慢病毒空载体转染HU-MOCK细胞及CTSB过表达的HU-CTSB细胞,与正常的HUVEC细胞进行比较。采用MTT法检测HUVEC增殖情况;流式细胞仪检测各组细胞凋亡情况;采用蛋白免疫印迹法检测Bal-2/Bax及Caspase家族(Caspase-3/9)的表达情况。结果:HU-CTSB组各时间点HUVEC的增殖率明显低于其他两组,且差异具有统计学意义(P0.05);HU-CTSB组的HUVEC早期凋亡率(右下象限)和晚期凋亡率(右上象限)显著高于HUVEC组和HU-MOCK组,且组间差异具有统计学意义(P0.05);HU-CTSB组的抑制凋亡蛋白Bcl-2表达量明显低于其他两组,且促凋亡蛋白Bax表达量显著高于其他两组,差异均具有统计学意义(P0.05);HU-CTSB组caspases-3和caspases-9的活化片段显著高于其他两组,差异均具有统计学意义(P0.05)。结论:CSTB通过激活Caspase-3/9信号通路来上调Bax,并下调Bal-2,显著抑制HUVEC的增殖,并促进其凋亡,进而影响心血管疾病的发展。。     

内外联合固定术治疗骨盆骨折的临床疗效及对血清ALP, TNF-α,TGF-β水平的影响

目的:研究内外联合固定术治疗骨盆骨折的临床观疗效及对血清碱性磷酸酶(ALP)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、转化生长因子-β(TGF-β)水平的影响。方法:选取2014年8月至2015年7月本院收治的86例骨盆骨折患者,根据入院顺序分为观察组和对照组,43例每组。对照组使用常规内固定术,观察为内外联合固定术。分析两组患者临床疗效、手术情况、并发症的发生情况,比较两组患者治疗前后血清ALP、TNF-α、TGF-β水平的变化。结果:治疗后,观察组的优良率显著高于对照组[81.40%(35/43)比41.86%(18/43)](P0.05),手术时间、术中出血量、骨折愈合时间显著短于或少于对照组(P0.05)。治疗前,两组患者血清ALP、TNF-α、TGF-β水平比较无显著性差异(P0.05);治疗后,两组患者血清ALP水平显著高于治疗前(P0.05),TNF-α、TGF-β水平较治疗前显著降低(P0.05),其中观察组的ALP水平明显比对照组高(P0.05),TNF-α、TGF-β水平明显比对照组低(P0.05)。观察组的并发症发生率明显低于对照组[0.00%(0/43)比11.63%(5/43)](P0.05)。结论:内外联合固定术治疗骨盆骨折患者的临床疗效和安全性均较高,可有效升高患者血清ALP水平,降低TNF-α、TGF-β水平。     

3种锦鸡儿属植物过氧化物酶基因的克隆及表达分析

采用同源克隆技术分离了3种锦鸡儿属植物柠条锦鸡儿(Caragana korshinskii)、小叶锦鸡儿(C.microphylla)和中间锦鸡儿(C.intermedia)的过氧化物酶(POD)基因(分别命名为CkPOD、CmPOD和CiPOD),并对它们在干旱胁迫条件下的表达特征进行了分析。CkPOD、CiPOD、CmPOD基因的cDNA序列均包含有1 074bp的开放阅读框(ORF),编码的蛋白质由357个氨基酸构成,分子量为38.7kD。系统进化分析结果显示:3种锦鸡儿属植物的POD可以和鹰嘴豆等豆科植物的POD聚为一类,且CkPOD和CmPOD具有较近的亲缘关系,CiPOD与CkPOD和CmPOD的亲缘关系相对较远,这一结果与3种锦鸡儿属植物的进化地位一致,显示POD基因较为保守,可以为锦鸡儿属植物的系统分类提供参考。PEG模拟干旱胁迫能够强烈诱导CkPOD、CiPOD和CmPOD基因的表达,显示POD基因在锦鸡儿属植物抵御干旱胁迫过程中发挥着重要作用。研究结果可为解析锦鸡儿属植物的耐旱机理以及利用锦鸡儿属植物进行荒漠改良和生态修复提供理论和实验依据。     

植物激素对几种核果类种子休眠破除和幼苗生长的效应研究

以山桃、甘肃桃、毛桃、杏、马哈利樱桃为材料 ,分别用普洛马林、GA3 、BA为处理激素 ,研究不同浓度激素对破除核果类种子休眠的效果。结果表明 GA3 0 .5μg· g-1、普洛马林3.0μg· g-1能有效破除桃、杏种子休眠 ,幼苗生长基本良好 ,激素浓度过低 ,破除休眠效果不佳 ,浓度过高虽然能提高种子发芽率 ,但幼苗生长不良。 BA无论对破除种子休眠 ,还是幼苗生长均达不到生产要求。普洛马林 1 .0～ 5.0 μg· g-1均能有效提高层积马哈利樱桃出苗率 ,3.0μg· g-1 对破除马哈利樱桃的休眠效果最好 ;GA3 、BA对破除马哈利樱桃休眠效果不明显。