抗乙型肝炎病毒药物评价用实验动物模型现状

乙型肝炎病毒(HBV)感染严重影响人类的健康,感染HBV的慢性患者可引起肝硬化、肝细胞癌及肝功丧失等病症.开发有效的抗HBV药物,对于其感染的治疗非常关健.HBV具有非常窄的宿主范围,因此选择合适的药物评价用动物模型至关重要,常用的模型动物有鸭、土拔鼠、黑猩猩及近年研究的转基因小鼠等.     

雉隐天冬龙须菜

在我国东北和华北等地山区，生长着一种名叫雉隐天冬的山野菜，当地老百姓俗称它为龙须菜、山苞米。由于它资源丰富，美味可食，又可观赏，越来越受到人们的青睐。 　　雉隐天冬 (Asparagus schoberioides)为百合科多年生草本植物，多生长在海拔 400— 600m的林缘、灌丛、林下及山坡草地。株高 50— 100cm，有细长稍肉质的根，茎多分枝，叶状枝扁三棱状线形，弧形弯曲呈镰刀状，常 3— 7枚成簇而生，呈“龙须状” (图 1)，所以，人们叫它龙须菜。叶互生，鳞片状，但基部无刺。由于它枝叶生长茂密，形似天门冬，雉鸡类可藏匿其下，故称之为…     

野大麦幼穗原生质体的分离和培养

以野大麦（Ｈｏｒｄｅｕｍｂｒｅｖｉｓｕｂｕｌａｔｕｍ）的幼穗诱导愈伤组织,建立悬浮细胞系,利用胚性悬浮细胞系在不同的酶解条件和不同的酶解液中分离原生质体并进行培养,获得了细胞分裂,形成细胞团。     

蓝萼香茶菜的组培快繁

蓝萼香茶菜 (Plectranthus glaucocalyx)又名侧根野苏,为唇形科多年生草本植物。全草入药,具有清热解毒,健脾,活血等功效。利用组培技术对蓝萼香茶菜的叶片、叶柄进行试管快繁,可提高其繁殖速度。具体操作如下： 　　取香茶菜的叶片、叶柄,自来水冲洗干净,于 70％的酒精中浸泡 30秒,无菌水冲洗 1次,再放入 0. 1％的升汞 (HgCl2)溶液中浸泡 6分钟,无菌水冲洗 4次,无菌滤纸吸干表面水分后,在超净工作台上将叶片切成 0. 5cm见方的小片,将叶柄切成 0. 5cm长的小块,接种于 MS＋ 2,4－ D 2mg/L＋ 6－ BA 0.5mg/L＋ NAA 0.2m…     

天然营养保健果品——刺梨

刺梨(Rosa roxburghii)又名缫丝花,木梨子,为蔷薇科多年生落叶灌木。果实扁球形,直径3—4厘米,熟时呈金黄色,常带绿点,外密生软毛刺。刺梨主要分布在四川、贵州、云南、江苏、湖北、广东等地,常生于海拔500—1000米的溪沟、路旁及山林间。我国南方早有栽培。     

基于环介导等温扩增技术对人乳头瘤病毒的分型检测

目的:利用环介导等温扩增技术(LAMP)对人乳头瘤病毒(HPV)进行快速分型检测。方法:以HPV59、HPV66和HPV68等3种病毒亚型为实验对象,选择合适的特异性核酸序列作为检测的靶序列并构建质粒,针对每个待检靶序列设计若干组扩增引物,并利用构建的质粒筛选出特异性强、灵敏度高的引物组合;将筛选成功的引物加至微流控芯片上,实现人宫颈脱落上皮细胞样本内HPV的快速核酸分型检测。结果:针对HPV59、HPV66和HPV68这3种病毒亚型,设计筛选出具有一定灵敏度的特异性引物,结合微流控芯片,无需对样本进行复杂的核酸提取纯化操作,实现了对临床样本的直接快速检测,整个检测过程在1.5 h内即可完成。结论:LAMP技术可用于临床样本中HPV的分型检测,与微流控芯片结合后操作简单、检测时间短,在临床上有较好的应用前景。     

噬菌体抗体库技术筛选抗VEGF165单克隆抗体

目的:获得抗血管内皮生长因子165(VEGF165)单克隆抗体,并对其功能进行初步验证。方法:利用噬菌体抗体库展示技术筛选与VEGF165结合的噬菌体克隆并测序,以测序正确的阳性克隆质粒为模板,PCR扩增抗体的轻重链可变区基因,并克隆至哺乳动物细胞表达载体中,构建全抗体表达载体;将全抗体表达载体转染293E细胞,收取培养细胞上清,利用ProteinA亲和纯化抗体;通过结合ELISA、表面等离子共振检测抗体的亲和力,以人脐静脉内皮细胞(HUVEC)为模型验证抗体功能。结果:经过噬菌体抗体库展示技术筛出1个与VEGF165特异性结合的抗体序列VG2;293E细胞表达了VG2全抗体蛋白,SDS-PAGE显示VG2抗体纯度较高;BIAcore检测结果表明该抗体具有较高亲和力(KD=0.56nmol/L),竞争抑制ELISA结果表明VG2抗体能抑制VEGF与VEGF受体(VEGFR)的结合(IC50为1.470μg/mL),进一步实验结果表明VG2能够抑制VEGF引起的HUVEC增殖。结论:制备了靶向VEGF165的全人源单克隆抗体VG2,该抗体具有较高的亲和力,能阻断VEGF165/VEGFR2的结合,并抑制HUVEC的增殖,可以作为潜在药物应用于肿瘤治疗。     

音乐在黑猩猩采血训练中的应用初探

为探究外源促性腺激素对伊拉兔(Oryctolagus cuniculu)生殖器官中表皮生长因子(EGF)表达水平及其作用特点的影响,本实验以伊拉兔为研究对象,随机选取30只(雄兔6只,雌兔24只),将雌兔随机分为超排处理组(n = 12),即肌肉注射70 U 孕马血清促性腺激素(PMSG)和100 U人绒毛膜促性腺激素(hCG)和对照组(不注射任何激素,n = 12)。并运用实时定量PCR(qRT-PCR)、蛋白免疫印迹(Western-blot)及免疫组化方法,研究经超排处理的伊拉兔卵巢、输卵管和子宫中表皮生长因子的表达与定位情况。结果显示,在超排处理后的伊拉兔卵巢、输卵管和子宫中,表皮生长因子mRNA与蛋白的表达量极显著高于对照组的卵巢、输卵管和子宫(P < 0.01),其阳性信号分别定位于卵巢的初级卵母细胞、颗粒细胞、内膜细胞、间质细胞和血管内皮细胞,输卵管的纤毛细胞、基细胞、黏膜上皮和肌层中,以及子宫的上皮细胞和内膜细胞中。研究表明,超排使用的外源促性腺激素可促进卵巢、输卵管和子宫中表皮生长因子表达量升高,提示其可能参与伊拉兔的生殖过程并调节卵巢、输卵管和子宫的功能。     

野大麦幼叶组织培养

IeafTissueCultureofHordeumbrevisubulatumZHANGYa－Lan,CHENGXiao－Rui,LIYan－Fang（ChagchunUniversityofAgriculturalandAnimalSciences,Changchun130062）1植物名称野大麦（Hordeumbrvisubula-tum）。2材料类别无菌苗幼叶切段。3培养条件（1）无菌苗培养基：0．7％琼脂粉;（2）诱导愈伤组织基本培养基：MS＋CH300mg·L-1（单位下同）,附加2,4-D0.5、1．0、1．5、2．0、4．0、60、8.0;（3）愈伤组织继代培养基：MS＋2,4-D1．0＋CH300;（4）分化培养基：MS＋CH300＋2,4-D1.0＋6－BA0.1＋生物素0．2;（5）…     

健身野果──酸枣

在中国北方山区,农历八、九月份,正是酸枣成熟的季节,一丛丛、一片片的酸枣棵子上,缀满了颗颗似珍珠、粒粒如玛瑙的酸枣,红绿相间,明丽悦目。摘上几颗红彤彤、熟透了的酸枣,吃到嘴里,又酸又甜,津液顿生。特别是孩子们,兜里总是装得满满的,边吃边玩,别有一番乐趣。酸枣又名山枣、野枣,系鼠李科落叶灌木。野生于内蒙古、辽宁、河北、山西、河南、山东、陕西、甘肃、宁夏、新疆及江苏、安徽、湖北、四川等省区,性耐干旱,生命力强,资源丰富,如山东省沂蒙山区每年可收摘酸枣约500万公斤。酸枣虽小营养高酸枣属核果,近球形,圆…