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在粉纹夜蛾(Trichoplusia ni)细胞Tn-5B1-4中,高效表达了来自粉纹夜蛾细胞Tn-5B1-4能够抑制细胞凋亡的TnIAP蛋白.聚丙烯酰胺凝胶电泳和免疫印迹分析表明,表达的重组TnIAP只有少部分是可溶性蛋白,大部分以不溶的形式存在.这一结果与以往在昆虫细胞中往往表达出可溶性蛋白不同.活性实验表明,可溶的重组TnIAP能够直接抑制caspase-9酶解Ac-LEHD-AFC的活性,也能抑制caspase-9激活HEK293细胞抽提物酶解Ac-DEVD-AFC的活性.结果进一步证明,昆虫和哺乳动物的细胞凋亡分子机制在进化上是极为保守的. 相似文献
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将抗癌胚抗原（ＣＥＡ）单克隆抗体的重链可变区与人的恒定区（Ｃγ３）连接,制备抗癌胚抗原嵌合重链用于放免治疗及其他导向治疗,可减少人抗鼠抗体反应（ＨＡＭＡ）。为纯化及核素标记抗体,将嵌合重链基因与核心链霉亲和素基因融合。融合基因在大肠杆菌得到高效表达,表达量占菌体总蛋白的２４％。ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和蛋白质印迹图谱显示表达产物分子量为７０ｋＤ,与其基因编码蛋白质的理论推算值相符。以ＨＲＰ标记的生物素作为 相似文献
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将抗癌胚抗原（ＣＥＡ）单克隆抗体的重链可变区与人的恒定区（Ｃγ３） 连接, 制备抗癌胚抗原嵌合重链用于放免治疗及其他导向治疗, 可减少人抗鼠抗体反应（ＨＡＭＡ） 。为纯化及核素标记抗体, 将嵌合重链基因与核心链霉亲和素基因融合。融合基因在大肠杆菌得到高效表达, 表达量占菌体总蛋白的２４ ％ 。ＳＤＳＰＡＧＥ 和蛋白质印迹图谱显示表达产物分子量为７０ ｋＤ, 与其基因编码蛋白质的理论推算值相符。以ＨＲＰ标记的生物素作为抗体进行蛋白质印迹, 在７０ ｋＤ 处可见表达条带, 表明融合蛋白能特异性地与生物素结合, 使嵌合重链经生物素柱进行廉价纯化成为可能。表达产物在胞内主要以不溶性的包含体存在, 经变性和复性处理后, ＲＩＡ 表明表达产物具有结合其特异性抗原ＣＥＡ的能力。 相似文献
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