利用米曲霉自身溶壁酶制备原生质体的研究

真菌原生质体融合作为生物工程的一种新技术,日益受到了人们广泛的重视,而制备原生质体则是原生质体融合的前提。各种真菌细胞壁的结构与化学组成不尽相同,因此制备不同种真菌的原生质体所要求的溶壁酶也有差异。曲霉制备原生质体一般可采用蜗牛酶,但米曲霉     

链球菌属的一个新种

自君子兰(Clivia miniata)软腐病病株的叶片病灶中分离到两株致病菌。经鉴定其中一株(85—2)多为双球状,也有呈单个存在,极少为四个细胞相连的短链。无芽孢,无鞭毛,不运动,革兰氏染色阳性,抗酸染色阴性,兼性厌氧生长;可从多种糖类产酸,但不产气;接触酶和苯丙氨酸脱氨酶均为阴性;不液化明胶,还原石蕊牛奶并凝固、胨化;生长温度范围为15—53℃,DNA中G+C含量为41．7mol％。由于其性状与链球菌属的各已知种均不相同,故定为一个新种,命名为君子兰链球菌(Streptococcus miniatus Zhou,Ping et Shao sp. Nov.)。     

原生质体融合选育赖氨酸高产菌种的研究

北京棒杆菌1134衍生株与枯草芽孢杆菌151衍生株的原生质体融合得到了一株可以甜菜糖蜜为原料,在摇床与小罐发酵均能稳定产赖氨酸6 50％以上的高产菌株——Q4413。Q441 3菌落形态类似于11 34株,而菌体形态区别于双亲,呈较短的杆状,无鞭毛,但有较稀疏的纤毛。生理生化研究表明：Q4413耐盐性、蔗糖发酵,石蕊牛奶试验产碱状况酷似于151株,而与1134株略有差异;运动性、糊精、柠檬酸盐利用,MR试验、酪素水解、明胶水解、石蕊牛奶还原,又酷似于1134株而区别于151株;04413的最适生长温度、pH值居双亲之间;Qq4413为原养型加三重抗性[Rifr,AECr Nalr];其细胞DNA含量与GC比测定结果均居双亲之中,而且生物量测定结果也均与双亲有一定的差异。     

棒杆菌(Corynebacterium pekinense)1134菌株原生质体化及其再生条件的研究

Corynebacterium属中的某些菌种是生产氨基酸的重要菌株。但它对蛋清溶菌酶很不敏感,较难制备其原生质体和再生。本文对供试菌株在培养时,加入氨基苄青霉素(ampicillin)、丝氨酸(serine)或甘氨酸(glycine);在酶解前采用不同的预处理,探讨了棒杆菌1134株原生质体化及其再生的条件。经过多次试验,最后选用补加适量的氨基苄青霉素和丝氨酸的培养液培养菌体,用果胶酶(Pectinase)和巯基乙醇(mercaptoethanol)进行酶解前的予处理,使其原生质化的培养液时缩间短至2.5小时,再生率提高至21.1％。为实现该菌株的原生质体融合及工业微生物育种奠定了基础。