无融合生殖甜菜M14的GISH和BAC-FISH研究

无融合生殖是指不经减数分裂和受精作用而产生胚的一种无性繁殖, 因此是胚的克隆, 母系繁殖. 甜菜单体附加系M14是通过二倍体栽培甜菜(Beta vulgaris)和四倍体白花甜菜(B. corolliflora)种间杂交、进而回交, 选育出的具有无融合生殖特性的甜菜品系. 我们利用GISH技术进一步分析了无融合生殖甜菜M14中的染色体情况, 在不封阻的情况下, 附加的外源染色体清晰可见, 这说明栽培甜菜与白花甜菜基因组间种属特异序列的差异明显. 利用无融合生殖甜菜M14和有性生殖栽培甜菜的花期mRNA对白花甜菜第9号染色体的BAC芯片进行了差异杂交分析, 发现2个BAC克隆16-M11, 26-L15含有M14花期特异表达的基因. 选用这2个BAC克隆作为探针, 对具有无融合生殖甜菜M14进行荧光原位杂交, 供试探针均被定位于附加的白花甜菜第9号染色体长臂末端, 呈半合子状态. 本研究BAC芯片的杂交结果结合两种生殖途径中胚和胚乳发育表达方式的保守性可推断, 甜菜中有性生殖和无融合生殖可能共享某些调节因子的相关路径, 正是白花甜菜第9号染色体上的特异基因才使甜菜M14中无融合生殖特性得以表达.     

利用RAPD标记鉴定甜菜无融合生殖的同一性

目的：对具有无融合生殖特性的带有白花甜菜染色体的栽培甜菜单体附加系M14三代材料进行同一性鉴定。方法：通过RAPD随机扩增技术对M14三代材料的基因组DNA的扩增多态性进行分析。结果表明,M141998年、1999年、2000年三代材料的RAPD位点高度一致,遗传相似度S＝1,遗传距离D＝0,从而表明M14三代个体完全一样。结论：初步确定M14材料无融合生殖基因在其后代中是稳定传递的。     

利用mRNA差异显示技术分离甜菜M14品系特异表达基因的cDNA片段

二倍体栽培甜菜与白花甜菜杂交、进一步回交而获得的单体附加系M₁₄,其染色体组成中除了含有18条栽培甜菜染色体外,还附加有一条野生白花甜菜第9号染色体,该附加染色体通过母本的传递率为96.5%;单体附加系传递率如此高的原因是因为M₁₄中有无融合生殖基因的存在。本实验采用mRNA差异展示技术对甜菜无融合生殖品系M₁₄和正常有性生殖的二倍体栽培甜菜A_2Y花蕾减数分裂时期的基因表达进行了差异分析。采用GT₁₅A,GT₁₅G,GT₁₅C 3种锚定引物,共筛选了20个随机引物,通过RT-PCR检测,获得了6个阳性差异表达的cDNA片段,应用NCBI的BLASTx软件对测序结果进行同源序列、相似序列检索,为进一步克隆无融合生殖基因提供侯选cDNA片段。     

黑龙江满族、蒙古族的苯硫脲味盲频率

我国已对25个民族进行了PTC尝味能力的调查。1984年7月我们对尚未进行PTG尝味能力调查的黑龙江满族进行了苯硫脲味盲频率的调查,同时也对黑龙江蒙古族进行了调查。满族的调查群体是齐齐哈尔市昂昂溪区小阿拉街小学、富裕县塔哈乡大高粱小学、富裕县     

AFLP指纹图谱试验体系在甜菜无融合生殖系中的应用

目的：比较甜菜无融合生殖品系M14子代之间的同一性及亲缘关系,从而验证AFLP试验体系在甜菜无融合生殖系中的适用性。方法：利用已建立的AFLP试验体系,通过琼脂糖凝胶电泳和聚丙烯酰胺凝胶电泳检测以及遗传距离的比较来验证这一试验体系。结果：M14子代之间及二倍体甜菜之间的同一性较好,其亲缘关系也较近。结论：验证了所建立的AFLP试验体系的适用性,同时也确证了AFLP技术在构建DNA指纹图谱中的优越性,为无融合生殖的进一步研究奠定了基础。     

原生质体融合选育赖氨酸高产菌种的研究

北京棒杆菌1134衍生株与枯草芽孢杆菌151衍生株的原生质体融合得到了一株可以甜菜糖蜜为原料,在摇床与小罐发酵均能稳定产赖氨酸6 50％以上的高产菌株——Q4413。Q441 3菌落形态类似于11 34株,而菌体形态区别于双亲,呈较短的杆状,无鞭毛,但有较稀疏的纤毛。生理生化研究表明：Q4413耐盐性、蔗糖发酵,石蕊牛奶试验产碱状况酷似于151株,而与1134株略有差异;运动性、糊精、柠檬酸盐利用,MR试验、酪素水解、明胶水解、石蕊牛奶还原,又酷似于1134株而区别于151株;04413的最适生长温度、pH值居双亲之间;Qq4413为原养型加三重抗性[Rifr,AECr Nalr];其细胞DNA含量与GC比测定结果均居双亲之中,而且生物量测定结果也均与双亲有一定的差异。     

植物无融合生殖研究进展

植物无融合生殖是一种特殊的无性生殖方式 ,它不经过精卵融合即可繁殖后代 ,其二倍体子代基因型与母本精确相同 ,可以固定杂种优势 ,对于作物育种等工作具有巨大的经济意义。对无融合生殖的分类、遗传进化、发生机制、分子机理等方面进行了介绍。并对无融合生殖的一些最新的研究进展 :无孢子生殖专化基因组区、脱调节理论、基因组冲撞观点、表观遗传基因调节理论等进行了简要的评述。并简单介绍了无融合生殖甜菜单体附加系目前的研究进展 。     

栽培甜菜大孢子发生的超微结构

栽培甜菜(Beta vulgaris)的大孢子发生为蓼型。减数分裂时, 大孢子母细胞核中出现核液泡, 形成联会复合体, 细胞壁上有胼胝质加厚, 并存在细胞质改组现象。大孢子母细胞减数第1次分裂形成二分体, 2个细胞均被较厚的胼胝质壁包裹。合点端的二分体细胞中细胞器丰富, 线粒体和质体的形态正常, 表明完成了再分化。在大多数情况下, 珠孔端的二分体细胞在减数第2次分裂前(或分裂的过程中)退化, 合点端的细胞分裂产生大小不等的2个细胞, 形成三分体。三分体合点端的大孢子体积较大, 发育成单倍体的功能大孢子。     

棒杆菌(Corynebacterium pekinense)1134菌株原生质体化及其再生条件的研究

Corynebacterium属中的某些菌种是生产氨基酸的重要菌株。但它对蛋清溶菌酶很不敏感,较难制备其原生质体和再生。本文对供试菌株在培养时,加入氨基苄青霉素(ampicillin)、丝氨酸(serine)或甘氨酸(glycine);在酶解前采用不同的预处理,探讨了棒杆菌1134株原生质体化及其再生的条件。经过多次试验,最后选用补加适量的氨基苄青霉素和丝氨酸的培养液培养菌体,用果胶酶(Pectinase)和巯基乙醇(mercaptoethanol)进行酶解前的予处理,使其原生质化的培养液时缩间短至2.5小时,再生率提高至21.1％。为实现该菌株的原生质体融合及工业微生物育种奠定了基础。     

Hg~( )溶液培养水稻根尖核仁分裂的初步观察

本实验用不同浓度的 HgCl_2溶液培养水稻种子,发现从 0.1—30ppm 9个不同处理,在根端分生组织中见到核仁分裂现象,其中以2.5ppm 出现的频率最高。材料和方法水稻品种为合江11号,将冲洗干净的种子,按每平皿100粒均匀摆放在垫滤纸的培养皿内,