人组织激肽释放酶成熟蛋白在大肠杆菌中的高效表达

将编码人组织激肽释放酶成熟蛋白的基因片段扩增并分别克隆到原核表达载体pET2 8(b)及分泌型表达载体pET2 0 (b)中 ,使其C端融合 6×HisTag序列 .转化不同受体菌 ,IPTG诱导表达后利用SDS PAGE、免疫印记等方法对重组蛋白进行分析 .在 6株基因工程菌株中 ,均表达出分子量约30kD的激肽释放酶融合蛋白 ,其中激肽释放酶在pET2 8载体中的表达水平高于pET2 0载体 .pET2 8和pET2 0载体表达的重组激肽释放酶蛋白分别占菌体总蛋白约 2 6 %和 10 % .Western印迹分析表明 ,目的蛋白可与抗人血清KK单克隆抗体发生特异性反应 .未经纯化的激肽释放酶融合蛋白具有一定的水解苯甲酰精胺酸乙酯 (BAEE)的能力 .在大肠杆菌中获得了人组织激肽释放酶的高效表达 ,表达产物具有免疫原性和生物活力 ,这为研究其生物功能和开发基因工程药物奠定基础     

镍胁迫下产铁载体细菌对花生的促生性

【目的】挖掘镍耐受性强、产铁载体活性高的植物根际促生细菌,研究镍胁迫下产铁载体细菌对花生的促生作用及其对花生吸收镍的影响。【方法】利用CAS(Chrome azurol S)培养基对花生根际产铁载体细菌定性筛选及定量测试获得产铁载体能力强的菌株,16S r RNA基因相似性及系统进化分析鉴定产铁载体细菌,并用含Ni~(2+)牛肉膏蛋白胨培养基测试细菌对Ni的耐受性;通过花生盆栽实验,测试花生的株高、根长、生物量、氮磷钾含量及镍含量来分析镍胁迫下产铁载体细菌对花生的影响。【结果】从花生根际分离筛选产铁载体芽孢杆菌5株,其中HSGJ1产铁载体能力最强,培养2 d后产156.56 mg/L的铁载体。HSGJ1对Ni~(2+)具有较强的耐受性,最小致死浓度为150 mg/L。在50、100 mg/kg的Ni~(2+)盆栽基质中,HSGJ1能够有效地促进花生的生长、增加花生的生物量及氮磷钾含量,并使花生根部和地上部分的镍含量降低。【结论】产铁载体芽孢杆菌HSGJ1是一株优良的植物根际促生细菌,可应用于镍污染农耕土壤的作物种植中,以提高作物在镍胁迫下的抗逆性,降低作物对镍的富集量,具有较好的应用价值。     

基于电子捕获裂解/电子转运裂解串联质谱技术的蛋白质组学研究

蛋白质组学的兴起带动了质谱技术的快速发展,而质谱技术的进步则拓宽了蛋白质组学研究问题的广度.最近10年内,肽段或完整蛋白质在质谱仪中的裂解技术——电子捕获裂解(electron capture dissociation,ECD)与电子转运裂解(electron transfer dissociation,ETD)逐渐发展起来.ECD和ETD在蛋白质组学中的应用,特别是在蛋白质的翻译后修饰鉴定和自顶而下(Top-down)的完整蛋白质裂解研究中已经展示出了诱人的前景.对ECD和ETD的基本原理、质谱特点、仪器实现、数据解析算法与软件开发,以及在蛋白质组学中的应用进展等方面进行了比较系统全面的阐述,并对当前的研究问题、面临的技术挑战与未来的发展趋势等方面作了深入剖析.     

微生物肥料在盐碱土壤中的应用展望

随着土地资源日益短缺及人们对生态环境的关注,以天然土壤微生物为主要成分的微生物肥料应用在盐碱农业中越来越受到重视。本文综述了国内外微生物肥料的发展历史和现状,微生物肥料对盐碱土壤产生的影响,帮助植物抵抗盐胁迫的机制,以及对盐碱土壤中微生物群落产生的影响;本文也提出了两种能够有效保藏菌种的固定化方法,这两类方法能有效地解决菌种易失活问题且延长其在土壤中的作用时间;最后提出了目前微生物肥料作用于盐碱地存在的问题与展望,旨在为缓解土地资源、提高农业安全生产做出贡献。     

新疆赛里木湖国家湿地公园生态旅游资源综合评价

湿地生态旅游是要在保护的前提下对湿地进行合理利用, 因此开发湿地生态旅游对湿地保护具有重要的现实意义。通过对新疆赛里木湖的实地考察与资料收集, 确定湖泊湿地生态旅游资源评价指标, 采用层次分析法(AHP)对赛里木湖国家湿地公园生态旅游资源进行综合评价, 得分66.88 分。结果表明: 赛里木湖湿地生态旅游资源属三级旅游资源, 适宜加大旅游开发投入, 且生态环境与旅游资源价值是赛里木湖生态旅游发展的关键点。     

新疆甘家湖梭梭林自然保护区植物组成及地理成分分析

根据野外调查、标本鉴定及查阅文献,对新疆甘家湖梭梭林自然保护区植物组成、地理成分进行了研究。结果显示:保护区共有维管植物62科236属448种,其中蕨类植物2科2属3种,裸子植物1科1属4种,被子植物59科233属441种。藜科、菊科、禾本科、十字花科、豆科为优势科,所含属、种数占该保护区总数的49.15%和51.12%;属内种数的变化范围为1~13种,仅含1种的属最多,有144个,占总属数的61.02%。植物生活型组成多样,草本375种、灌木65种、乔木5种、藤本3种,分别占保护区总种数的83.71%、14.51%、1.12%和0.67%。植物群落组成简单,以梭梭群落(Form.Haloxylon ammodendron)、白梭梭群落(Form.Haloxylon persicum)为主,它们与超旱生、旱生灌木、小灌木、草本等组成荒漠植被。保护区种子植物60科可划分为4个分布区类型和7个变型,以温带地理成分为主(14科),占保护区非世界分布的56.00%;234个属可划分为12个分布区类型和12个变型,其中北温带分布及其变型73属,占保护区非世界分布的37.44%,地中海、中亚、东亚分布在此地交流融合,缺乏热带成分,具强烈的温带荒漠性质。     

铜绿微囊藻光合活性对LED光短期暴露的响应

为探究LED光对蓝藻光合活性的影响,以铜绿微囊藻Microcystis aeruginosa PCC 7806为对象, 25μmol photons/(m²·s)白色荧光灯为对照,检测了不同光质光强LED处理2h的光合活性。结果表明,与对照相比,25—50μmol photons/(m²·s) LED红光和蓝光、25—100μmol photons/(m²·s) LED白光和绿光处理下,细胞光合活性(F_v/F_m)显著提高。大于100μmol photons/(m²·s)的LED红光和蓝光、大于200μmol photons/(m²·s)的LED白光及大于500μmol photons/(m²·s)的LED绿光处理对光合活性有显著抑制作用,光系统Ⅱ(PSⅡ)最大光化学效率F_v/F_m、电子传递速率ETR(Ⅱ)、光量子产量Y(Ⅱ)、光系统Ⅰ(PSⅠ)电子传递速率ETR(Ⅰ)、...     

植物病原真菌产生ABA的初步研究

根据植物病理学和微生物生态学原理,建立了脱落酸（ＡＢＡ）产生菌的筛选模型。从不同的植物寄主上分离到３６株真菌,其中有十余株菌株能产生天然的脱落酸,这些真菌分别属于葡萄孢属（Ｂｏｔｒｙｔｉｓ）、青霉属（Ｐｅｎｉｃｉｌｉｕｍ）、根霉属（Ｒｈｉｚｏｐｕｓ）和镰孢属（Ｆｕｓａｒｉｕｍ）。其中一株ＡＢＡ的产量达到４６ｇ／ｇ培养基,经鉴定为灰葡萄孢（Ｂ．ｃｉｎｅｒｅａ）。在此基础上,对该菌株的培养条件进行了优化。     

表皮生长因子受体信号通路在维吾尔族妇女宫颈癌中的表达研究

目的:随着表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)靶点治疗药物在其它肿瘤治疗中的应用,能否在妇科肿瘤中应用并取得疗效,已经得到学者们的重视。但在临床应用之前,必须明确EGFR与妇科肿瘤发生发展的关系及其机制。因此,我们来探讨表皮生长因子受体EGFR信号通路在维吾尔族不同级别宫颈病变组织中的差异表达及其临床意义。方法:应用免疫组织化学方法检测EGFR、P-EGFR、ERK 1/2、P-ERK1/2在108例子宫颈癌,47例CIN,79例正常宫颈组织中的表达,并分析其与临床病理参数的关系。结果:EGFR在子宫颈癌、CIN及正常宫颈组织中的阳性表达率分别是74.10%、66%、27.80%(P0.01);P-EGFR在三组间的阳性表达率分别是55.60%、74.50%、20.30%(P0.01);ERK1/2在三组间的阳性表达率分别是60.10%、76.60%、25.30%(P0.01);P-ERK1/2在三组间的阳性表达率分别是44.40%、66%、24.10%(P0.01),其在宫颈癌中EGFR与与浸润深度、淋巴结转移有关;ERK与肿瘤的临床分期、远处转移有关,而且在宫颈癌中EGFR与P-EGFR、ERK 1/2、P-ERK1/2的表达成正相关(P0.05)。结论:EGFR、P-EGFR、ERK1/2、P-ERK1/2的表达与宫颈癌的发生、发展相关,促进宫颈癌的浸润和转移,抑制EGFR信号通路可能为多靶点联合治疗宫颈癌提供新的方向。     

新疆野苹果种群年龄结构特征与动态分析

对新疆塔城地区托里县、额敏县新疆野苹果(Malus sieversii)种群采用典型抽样法中的样方法进行了群落物种分布与结构调查,并以空间(胸径,DBH)代替时间(树龄),利用生存分析理论分析了新疆野苹果种群年龄结构和静态生命表,绘制了存活曲线;并应用时间序列模型,预测了种群的发展趋势。结果表明:(1)塔城地区新疆野苹果种群的中树(20DBH≤30cm)个体数较稳定,幼树(DBH≤15cm)个体数较多但不稳定,大树(30DBH≤40cm)及老树(DBH40cm)由于生理衰老、环境因素及种间竞争的影响,个体数明显下降。(2)新疆野苹果种群存活曲线呈现Deevey-Ⅰ型。动态表现为前、中期缓慢增长而且较稳定,后期衰退。(3)在未来10年、20年和30年中,2个种群均呈现幼龄个体减少而老龄个体增加的态势,老化趋势较为明显。