人热休克蛋白90AB1基因克隆、原核表达、中试发酵及纯化

通过克隆人热休克蛋白90AB1基因(Hsp90AB1),构建其原核表达载体pET28a(+ )-hHsp90AB1,表达纯化获得目的蛋白,为hHsp90靶向药物筛选奠定基础.提取宫颈癌HeLa细胞总RNA,并经RT-PCR获得hHsp90AB1-cDNA.以hH-sp90AB1-cDNA为模板进行PCR体外扩增,胶回收纯化hHsp90ABl.将hHsp90AB1及pET-28a(+)质粒经Nde I和Sal I双酶切、胶回收纯化酶切片段后,体外连接酶切片段,使其定向重组,再将重组DNA转化DH5α,经复苏后,在含卡那霉素的LB固体养基上筛选出阳性克隆.挑取LB固体培养基上的单菌落经酶切及测序鉴定,证实为阳性克隆,即pET28a-hHsp90AB1体外重组成功,命名为pET28a(+ )-hHsp90AB1.重组质粒转化Rosetta( DE3)菌株,IPTG诱导表达,并对表达条件优化,以及通过SDSA-PAGE和Western blotting分析均表明Hsp90AB1蛋白得到了正确的表达,且表达产物以可溶性形式存在,优化条件下蛋白表达量约占菌体总蛋白13％.接种到18 L发酵罐中试发酵,表达产物经Ni-NTA凝胶素和层析,蛋白纯度达到98％.     

我们是怎样结合生物学教学开展科学研究小组活动的

毛主席指出:学生們的書本知識……也是他們前人总结生产斗争和阶级斗争的经验写成的理論,不是他自己亲身得来的知識。他們接受这种知識是完全必要的,但是必須知道,就一定的情况來說,这种知識对于他們还是片面的,这种知識是人家証明了,而在他则还沒有証明的。最重要的,是善于將这些知識应用到生活和实际中去。我組在學校党政的领导教育和鼓励与支持下,在     

课堂教学生动有趣试探

怎样使课堂教学生动有趣,是一个值得研究的重要教学课题,本文就这个问题作一探索.一、正确使用成语、口诀、谚语、俗语在课堂教学过程中,适当地使用一些成语、口诀、顺口溜等,对活跃课堂气氛是很必要的.例如在讲述遗传和变异时,可用"种瓜得瓜,种豆得豆"的俗语.在讲述生态系统食物链这个概念时,可用"螳螂捕蝉,黄雀在后"、"大鱼吃小鱼,小鱼吃虾米,虾米吃淤泥     

埃及血吸虫毛蚴表皮板的观察

埃及血吸虫毛蚴表皮板共有4排,各排数目为6:9:4:3。除第1排之外,其他各排的表皮板均由无纤毛的嵴所分隔,在第1与第2排之间的环嵴中,除第1排各板底边中央小凹处各有1感受器外,尚可见4对感受器。第2与第3排的环嵴内可见16—20个感受器。此外,于体之两侧第3排表皮板间各见1个排泄孔。顶突似六边形,于其两侧各有1个侧腺开口,其内侧可见14个感受器。本文在讨论中与前人对本虫毛蚴表皮板的描述做了简单比较。     

假单胞菌L-半胱氨酸合成酶的纯化和性质研究

假单胞菌TS-1138的细胞浆液通过硫铵沉淀、SephadexG-75凝胶过滤、DEAE-Cellulose52离子交换、SephadexG 100凝胶过滤等分离纯化手段分别将从L-ATC合成L 半胱氨酸的两个酶——L-ATC水解酶和L-SCC水解酶纯化了 83.9和 90.3倍。SDS-PAGE鉴定均为单一条带 ,两种酶的相对分子质量分别为 37.5和 42.8kD ;酶反应的最适温度均为 35℃ ,最适pH分别为 7.0和 8.0 ;酶的米氏常数分别为 0.67mmol L和 0.15mmol L ,     

五味子科的系统发育:核糖体DNA ITS区序列证据

The Schisandraceae is one of the most important taxa for understanding the origin and evolution of primitive angiosperms due to its basal position in the recent cladograms of the angiosperm based both on several gene sequences and on morphological characters, but phylogenetic relationships within the family are still unresolved. The sequences of nrDNA ITS region of 15 species representing four sections of Schisandra Michx., two sections of Kadsura Kaempf. ex Juss. and one outgroup, Illicium fargesii Finet et Gagnep., were used to reconstruct the phylogeny of Schisandraceae. Fourteen most parsimonious trees (Length=259, CI=0.934 and RI=0.889) were obtained from the analysis with I．fargesii as the outgroup. In the consensus tree, the genus Schisandra was found to be divided into three clades. Sect. Pleiostema formed a clade together with sect. Maximowiczia, sect. Sphaerostema was weakly supported to be the sister group of a clade comprising S. bicolor var. tuberculata and Kadsura species. In particular, S. bicolor var. tuberculata, a species of sect. Schisandra, was nested within Kadsura. It seems from this result and the morphological characters that Schisandra might not be a monophyletic group. According to the present molecular phylogeny, both elongated hypocarpium and deciduous habit originated independently at least twice in the Schisandraceae, and therefore, the value of the present morphological characters used in the classification of the family Schisandraceae should be reevaluated.     

类茎属一新种及其囊蚴在体外的培养：吸虫纲：微茎科

作者于1986年5——6月间,检查辽宁省营口二道沟天津厚蟹 Helice tridens tientsinensis Rathbun,发现类茎属 Microphalloides Yoshida,1938的囊蚴,经感染家鸭、大白鼠、小白鼠、犬、猫及体外培养,结果于家猫及IMDM培养液中获得成虫。经鉴定为一新种,订名为辽宁类茎吸虫Microphalloidesliaoningensis,其与日本类茎吸虫相似,但不相同。木新种阴茎囊的肌纤维束有4束,阴茎囊基丁质突起的前端块末端非鱼尾鳍状,分二圆叶,前叶小于后叶,后端块远端钧状,向前弯曲。卵黄腺滤泡16—23个。虫卵较小而囊蚴较大。后尾蚴经体外培养99小时,虫体发育良好,子宫内可见大量虫卵,这对该虫形态、生理等方面的研究提供了一种良好方法。     

吉林省稻田皮炎病因的调查及土耳其斯坦东毕吸虫结节变种生活史的观察

稻田皮炎是吉林省水田社队的一种常见病,多发病,也是水田社队的一种职业病。在6—7月拔草季节,发病于上、下肢(图版Ⅰ,图1)奇痒难忍,有的并发感染或形成溃烂。严重地危害着广大劳动人民的身体健康。我们遵照毛主席关于“把医疗卫生工作的重点放到农村去”的教导,从1972年至1975年深入农村调查研究,证实吉林省集安、延吉二县两个公社稻田皮炎病因主要是家鸭毛毕吸虫(Trichobilharzia)的尾蚴(刘忠,1975),其他一市六县八个公社病因主要是耕牛东毕吸虫(Orientobilharzia)的尾蚴,其中四个公     

吉林省海龙县城南公社稻田皮炎病原学调查和土耳其斯坦东毕吸虫结节变种生活史的初步观察

海龙县是吉林省水稻种植重点地区之一,稻田皮炎流行比较严重,历年稻田皮炎发病率很高,有的生产队竟达100％,对水稻生产和农民健康有一定程度的影响。我们在以往工作(吉林医科大学稻田皮炎研究组,1963;白功懋等,1963;刘兆铭等,1963;孙瑞宗等,1964)的基础上,于1965年4—9月在该县城南公社新胜大队第一小队蹲点,以如何大面积防治稻田皮炎作为研究重点,同时进行了病原学调查。经过几个月的现场工作,在大面积防治上取得一些经验,并发现该处稻田皮炎主要病原为土耳其斯坦东毕吸虫结节变种的尾蚴。现将病原学研究方面的初步结果报道如下。     

吉林省鸟类两种吸虫

1978年6月间,在吉林省长春郊区猎得2只黑水鸡Gallinula chloropus(Linnacus),从其中1只的胆囊内查得48个吸虫标本,经鉴定确认其为后睾科Opisthorchiidae Braun,1901后睾属Opisthorchis Blankard,1895的种类,其特征表明系前人未记载的新种。此外,