RAPD标记在韦塔桉种源遗传结构上的应用

采用适合韦塔桉RAPD分析的PCR扩增体系,对13个不同种源的韦塔桉运用20个不同随机引物进行了DNA序列多态性分析。实验结果表明韦塔桉不同种源间遗传多态性水平较高,共扩增出165个位点,其中多态位点占77.0%;13个种源间遗传分化指数值为0.5717-0.6670,遗传分化百分比值为0.090%-5.989%。根据遗传分化百分比值构建了13个种源之间的聚类图,聚类图显示了韦塔桉种源间的亲缘关系,17830、17831、17832、17833、17834、17835、17836、17837这7个种源相对聚在一起,17838种源与其它种源的相似性水平最低。对韦塔桉不同种源的RAPD研究为其种源的早期选择了科学依据。     

微波诱变结合底物类似物选育恶臭假单胞杆菌

利用微波辐照恶臭假单胞菌进行诱变处理,结合底物类似物的筛选方法,结果选育到一株产海因酶和N-甲酰基水解酶的高酶活菌株MW303;高效液相色谱(HPLC)分析结果显示:该菌的总酶活由0.218升高至0.612,提高了280.73%。     

不同种源韦塔桉RAPD反应条件优化研究

对13个韦塔桉种源的RAPD反应条件,即PCR反应体系、PCR扩增条件等因素进行了研究。结果表明,最佳PCR体系为:DNA模板为10.0μL、双蒸水4.0μL、10×缓冲液2.0μL、25mMMgCl21.5μL、10mMdNTPs0.35μL、0.1μM引物2.0μ1、5UTaqDNA聚合酶0.15μL。最佳PCR扩增条件为:92℃预变性2min,1个循环;92℃变性1min,36℃退火1min,72℃延伸2min,共35个循环;72℃延伸5min,1个循环。