石参总黄酮对一氧化氮致大鼠胰岛细胞损伤的保护作用

采用硝普钠为NO供体,造成大鼠胰岛β细胞RIN-m的损伤,通过检测细胞活力、细胞内丙二醛(MAD)含量、总谷胱甘肽(GSH)含量和总超氧化物歧化酶(SOD)活性,探讨石参总黄酮的保护作用和机制。结果显示,石参总黄酮能明显提高损伤细胞的活力,降低细胞内MDA的含量、提高总GSH含量和SOD活力,表明石参总黄酮对NO所致RIN-m细胞的损伤具有保护作用,其机制可能与提高细胞内GSH含量与SOD活力有关。     

壮阳药效动物实验评价方法的改进

目的对壮阳药效评价方法进行优化,以探求更为有效的候选药物筛选方法。方法模型组大鼠均灌胃给予西地那非10 mg/kg,对照组大鼠给予相同容量的生理盐水灌胃,每天1次,连续灌胃给药14 d。每次给药后连续记录2 h内大鼠阴茎勃起、阴部理毛、爬背次数和参与动物数,并计算PEI值。采用改良的壮阳药效评价方法,整个过程采用摄像头观察并在不同时间段给予雌鼠诱导。结果在雌鼠诱导组中,模型组大鼠给药后2 h PEI值较对照组明显升高（P〈0.05）。在模型组中,与人为观察组相比,摄像头观察组大鼠给药后2 h PEI值明显升高（P〈0.05）;与非雌鼠诱导组相比,雌鼠诱导组大鼠给药后2 h PEI值明显升高（P〈0.05）;与持续诱导组相比,间断诱导组2h PEI值无明显差异,但60～120 min时间段PEI值明显升高（P〈0.05）。结论优化后的壮阳药效评价方法能更为有效的评价候选药物的壮阳药效。     

重组人肝细胞生长因子真核表达的定性及定量检测

将人肝细胞生长因子（human hepatocyte growth factor hHGF)全长cDNA重组入pEE14真稳定表达质粒,用lipofectin脂质体将pEE14/rhHGF转染入CHO－K1细胞,蛋氨酸亚氨基代砜（methionine sulfoximine,MSX)筛选出阳性细胞克隆,利用RT－PCR检测rhHGF mRNA的表达通过ELISA法测定rhHGF的蛋白表达,3H掺入法检测培养上清液对大鼠原代培养肝细胞DNA合成的影响,结果表明转染pEE14/rhHGF的细胞可扩增出hHGF特异的396bp RT-PCR片段,培养上清液明显促进大鼠肝细胞DNA的合成,ELISA法测出上清液中,rhHGF的含量在8ug/L以上,显示rhHGF在CHO细胞中以活性形式得到表达。     

重组腺病毒Ad-GFP-C197的构建及其抗肿瘤活性研究

端粒酶是维持端粒长度的重要组成部分,是肿瘤发生的标志物之一。构建了能表达人端粒酶逆转录酶(h TERT)C端936-1132氨基酸片段(C197)的重组腺病毒Ad-GFP-C197,并观察其对Hela细胞增殖的影响。结果显示,Ad-GFP-C197感染Hela细胞后,采用免疫印迹法检测到C197在细胞内得到高效表达。此外,AdGFP-C197明显抑制Hela细胞的增殖,诱导细胞凋亡,并且降低Hela细胞中端粒酶活性。上述研究为进一步研究h TERT C末端功能打下基础,并为肿瘤的生物治疗提供新的思路。