大肠杆菌的一株抗苯乙醇的dnaB突变型

通过硫酸二乙酯诱变,选得一株抗苯乙醇的DNA复制突变型FD105。从温度和氨基酸饥饿对DNA残余合成的影响,以及在限制温度中噬菌体增殖情况可以看到,FD105是DNA复制链延长突变型。我们证实了温度敏感和苯乙醇抗性是同一基因突变的结果。这一基因被定位在dnaB座位。已有的研究表明苯乙醇的作用部位是细胞膜,链延长dnaB突变型同时抗苯乙醇,这是链延长与膜有关的一个旁证。     

recA基因通过同源重组途径参与由整合质粒发动的大肠杆菌染色体复制

我们在前文中报道由整合的F'质粒所发动的大肠杆菌染色体的复制依赖于recA基因。本文报道有关recA、recB、recC以及lexA等在染色体复制中的作用,实验结果说明,recA基因通过同源重组途径而不是通过SOS途径参与复制,而且recA基因和Chi热点无关。实验结果还说明,RecBC酶的依赖于ATP的双链DNA外切核酸酶活性和recA基因的作用无关。     

嗜热脂肪芽孢杆菌中转座因子IS5376的转座行为研究

ＩＳ５３７６和ＩＳ５３７７是在嗜热脂肪芽孢杆菌（Ｂａｃｉｌｕｓｓｔｅａｒｏｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌｕｓ）中发现的两个转座因子。随机取样分析的结果说明,ＩＳ５３７６由ＣＵ２１染色体向质粒ｐＦＤＣ５和ｐＦＤＣ１２的转座受温度的影响,而ＩＳ５３７７则不。温度影响的原因还不清楚,从现有证据看来,这由ＩＳ５３７６本身的性质所决定。另外,测得ＩＳ５３７６的转座作用有一定程度的专一性,还测得转座后所造成的目标序列的顺向重复为４或５ｂｐ。     

耐热性碱性磷酸酯酶作为非放射性标记物的研究

通过生物素与亲和素－酶复合物系统或地高辛与抗地高辛－酶复合物系统可把酶间接标记到探针上．Ｒｅｎｚ等通过不同的化学方法直接把酶标记到探针上［１～３］．耐热性碱性磷酸酯酶ＦＤ－ＴＡＰ（ｔｈｅｒｍｏｓｔａｂｌｅａｌｋａｌｉｎｅｐｈｏｓｐｈａｔａｓｅ）具有耐...     

大肠杆菌K-12dnaA突变型的R6K整合抑制菌株的多起点染色体复制

大肠杆菌K-12的温度敏感复制发动缺陷突变(dnaA46)菌株LC381不能在42℃中进行染色体复制。在42℃中选取R6K质粒整合抑制菌株,用标记频率测定法测得这一菌株在30℃中染色体复制从正常的复制起点起始,在42℃中则从另外三个起点起始,其中两个曾见报道,把重组突变recA56引入这一菌株,发现由接近正常复制起点起始的染色体复制不受recA突变的影响,由接近正常复制终点起始的染色体复制则受到阻碍,说明由这一位置起始的染色体复制依赖于recA基因。这一实验结果和我们的其他报道相符。     

奶牛ZFX+ZFY基因片段的克隆、测序及PCR对奶牛性别鉴定灵敏度研究

奶牛胚胎的性别鉴定是多年来奶牛业研究和探素的问题,尤其在体外授精。胚胎分割冷冻,保存及胚胎移植一系列生物科学高技术发展和应用的今天,这一问题的解决显得更加重要和迫切。用分子杂交的方法也可对胚胎进行早期性别鉴定,但这一方法必须要有大量的样品DNA,而且所需时间长,并受到实验条件的限制,很难在基层和生产中推广应用。 pCR方法除了有前述特点外,还同时具有所需设备简单,操作方便,易于在生产中推广应用。为此．我们对奶牛的ZFX及ZFY基因片段进行克隆、测序。并以此设计出分别对ZFX及ZFY具特异的引物,以奶牛血液DNA为模板进行PCR护增对奶牛性别鉴定灵敏度试验。     

嗜热细菌的碱性磷酸酯酶的研究

从５８株来自国内温泉的嗜热细菌中分离到一株菌,它所产生的耐热碱性磷酸酯酶在９５℃中保温６０ｍｉｎ后仍保留原来活力的７５％．测定了酶的一系列性质,包括酶作用的最适ｐＨ、最适离子强度、最适温度,以及酶的热稳定性、米氏常数、活化能等等,还研究了一些无机离子、氨基酸以及表面活性剂对酶活的影响．ＤＮＡ杂交方面的初步实验结果表明用该酶标记的核酸作为非放射性探针可用于在高温下进行的杂交反应．