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1.
利用COS7细胞暂时表达系统,研究转译起始序列对EPO-cDNA表达的影响。通过DNA重组技术,构建了原EP0-cDNA表达载体pCSV-EP0(1).其转译起始序列为5’AATTCATGG3’.同时通过定点突变技术,将起始序列改变成5’CCACCATGG3’,而构建了另一表达载体pCSv—EPO(2)。后者经序列分析证明无误后和前者均通过DEAE-dextran法转染COS7细胞,用ELlSA法定量洲量EP0表达水平.转染后48小时及72小时收集含pCSV—EP0(1)的COS7细胞上清.测定结果为1580pg/mI及954pg/mI,而含pCSV—EPO(2)的上清则为25 300pg/m1和17 450pg/ml。这表明经优化起始序列的基因表达远高于未经优化的。 相似文献
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将编码Vi抗原的基因克隆到减毒的鼠伤寒沙门氏菌中组建的基因重组株Vi4072,以3×10~8CFU一次口服感染Balb/C小鼠,4天后按7,14,21,28,35,42,49,56,63,70天的间隔收集分离小鼠的集合淋巴结,肝,脾.鉴别是否有本菌出现,并检测血清和小肠匀浆液中的vi抗体.结果表明,感染后49天仍可从脾中分离到该菌;70天仍可从血清和小肠匀浆液中测出vi抗体。 相似文献
3.
丁酸钠对CHO-EPO工程细胞株rhEPO表达量的影响 总被引:1,自引:0,他引:1
以稳定整合有pEDEPO的CHOEPO工程细胞株为研究对象,在无血清条件下,系统观察了05、10、25和50mmol/L4个浓度的丁酸钠作用于该细胞株的情况,结果表明:丁酸钠对CHOEPO工程细胞的生长有明显的抑制作用;影响CHOEPO工程细胞EPO表达,浓度10mmol/L可提高EPO表达量25倍左右,并可持续较长的一段时间;延缓CHOEPO工程细胞在无血清培养时的细胞脱落;提高CHOEPO工程细胞EPOmRNA水平 相似文献
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将荧火虫荧光素酶基因cDNA真核表达载体pGL2导入大肠杆菌HB101、鼠伤寒杆菌LB5000和X4064中,它在这些原核细胞中均有较好的表达效果。它在大肠杆菌HB101的表达量是该基因cDNA原核表达载体pUHF12-1的表达量的30倍。采用计算机PC/GENE程序包分析,pGL2的SV40早期启动子序列中含有SV40基因组HindⅢB片断中一段长为49bp的DNA序列,这一序列可能就是SV40基因组HindⅢB片断的原核增强子功能的决定序列,正是该序列使pGL2在细菌中获得了高效表达。 相似文献
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以伤寒─鼠伤寒双价重组株Vi4072的3×108CFU一次口服感染BALB/C小鼠,4天后即可从小鼠的集合淋巴结、肝、脾中分离到该菌,49天后该菌始被小鼠机体彻底清除。血清和小肠匀浆液中Vi抗体检测结果证明Vi4072菌株有刺激特异性免疫应答的功能。血清、小肠匀浆液中Vi抗体明显升高。 相似文献
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8.
两个不同启动子在COS7细胞中转录效率的比较 总被引:2,自引:0,他引:2
两个不同启动子在COS7细胞中转录效率的比较陈坚刘小萍曹韫旭陆德如(第二军医大学医学生物技术和分子遗传研究所,上海200433)ComparisonoftheTranscriptionalEficiencyofTwoDifferentPromoter... 相似文献
9.
伤寒─鼠伤寒重组株Vi4072所产生Vi抗原以伤寒Ty2株所产Vi抗原作对照,通过ED50测定和小白鼠被动保护试验作了比较,结果表明Vi4072株Vi抗原的半数有效剂量为0.0136μg,Ty2株的半数有效剂量为0.0183μg,说明Vi4072─Vi对小白鼠的保护作用不低于Ty2─Vi。被动保护试验证明,在同等条件下,两种Vi抗原的免疫血清对小白鼠提供的保护作用相同。 相似文献
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伤寒─鼠伤寒重组株Vi4072所产生Vi抗原以伤寒Ty2株所产Vi抗原作对照,通过ED50测定和小白鼠被动保护试验作了比较,结果表明Vi4072株Vi抗原的半数有效剂量为0.0136μg,Ty2株的半数有效剂量为0.0183μg,说明Vi4072─Vi对小白鼠的保护作用不低于Ty2─Vi。被动保护试验证明,在同等条件下,两种Vi抗原的免疫血清对小白鼠提供的保护作用相同。 相似文献