一种优化的测定过氧化氢酶活性的方法

建立了一种优化的化学发光技术测定过氧化氢酶(CAT)活性的方法,并用此法检测40只正常家兔红细胞中过氧化氢酶活性为6.421±1.43K/gHb.采用H\-2O\-2-鲁米诺发光体系,探讨了反应时间、底物浓度、样品浓度、样品保存等因素对测定的影响,得到较好的线性和重复性.     

拉曼被孢霉F5发酵生产γ—亚麻酸的实验研究

对拉曼被孢霉突变株F5发酵生产γ-亚麻酸的最适碳源,氮源,发酵时间及湿度,无机盐离子的添加,最适碳源浓度及补加碳源时间等发酵条件进行了研究探讨,最适发酵培养基组成为（g/L)：葡萄糖100,酵母浸出粉4,蛋白胨1,K2HPO41,CaCl2 1*10^-2,MgSO4 5*10^-2,FeSO4 1*10^-2,ZnSO4 7.5*10^-3,CuSO40.5*10^-3,MnSO4 2*10^-3,pH6.0,培养湿度为25度,140rpm 振荡培养10天,培养8天后（即收获前2天）补加5％葡萄糖,发酵结果为：DC24．59 g/L,TL10.84g/L,TL/DC 44.09%,GLA/TL10.67%,GLA产量为1156．63mg/L,GLA产量较初始结果提高156．15％,该菌株已达到工业化生产菌株要求。     

超临界CO2技术萃取蛋黄磷脂

采用新型物理分离技术──超临界CO₂萃取法,提取天然蛋黄粉中的磷脂.在40MPa,先去除蛋黄粉中甘油三酯和胆固醇,再萃取磷脂.结果显示,磷脂纯度为95%,N/P比值为1.003,λ_max=214nm,薄层层析显示磷脂着色点清晰,并去除了绝大部分甘油三酯和胆固醇.此法操作简单、产品质量高、安全和不污染环境,还可得到天然纯蛋黄油和蛋白.     

萤火虫荧光素酶基因cDNA真核表达载体在细菌中的高效表达

将荧火虫荧光素酶基因cDNA真核表达载体pGL2导入大肠杆菌HB101、鼠伤寒杆菌LB5000和X4064中,它在这些原核细胞中均有较好的表达效果。它在大肠杆菌HB101的表达量是该基因cDNA原核表达载体pUHF12-1的表达量的30倍。采用计算机PC／GENE程序包分析,pGL2的SV40早期启动子序列中含有SV40基因组HindⅢB片断中一段长为49bp的DNA序列,这一序列可能就是SV40基因组HindⅢB片断的原核增强子功能的决定序列,正是该序列使pGL2在细菌中获得了高效表达。     

超临界CO2萃取真菌油脂及其脂肪酸组成分析

采用超临界CO2 萃取雅致枝霉的油脂 ,从最小样品需要量、处理样品能力及油脂得率等方面将其与索氏提取法进行综合对比评价 ,并对两种方法提取的雅致枝霉油脂的脂肪酸组成进行气相色谱分析。索氏法的油脂得率最高 ,但耗时较长 (>6h) ,样品需要量大 (>2 0 0 0mg) ,且提取的油脂中杂质较多 ;超临界CO2 萃取法油脂得率较索氏法低 ,但提取的油脂中杂质较少 ,单位时间内样品处理能力强 ,是索氏法的 6倍 ,且可处理微量样品 (5 0mg)。气相色谱分析结果表明两种方法提取的油脂 ,均含 12种已知脂肪酸 ,且每种脂肪酸的含量相近。综合各项指标考虑 ,超临界CO2 萃取法优于索氏法 ,是一种简便、有效的真菌油脂提取方法 ,适合油脂及多不饱和脂肪酸高产株菌筛选的实际应用需要     

天然配比油对家兔肝组织中脂肪酸的影响

目的　研究天然配比油对家兔肝组织中脂肪酸的影响。方法　用GC法测定 5 0只家兔喂天然配比油 90d肝组织脂肪酸组分和含量的变化。结果　猪油对照组中 14∶0、18∶1和MUFA明显增高 ;三个配比油组α18∶3水平明显增高 ,14∶0明显降低 ,配 1组的α18∶3含量最高 ,配 2和配 3组的γ18∶3和 18∶2含量明显增高、18∶1和MU FA无明显变化。结论　补充三种配比油均可提高体内n3系多烯脂酸水平 ;配比 2和配比 3油还可提高n6 系多烯脂酸质量、抑制 18∶1升高 ,治疗高脂血症效果较好     

四种真菌油脂提取方法的比较研究

采用索氏法、超临界CO2萃取法、酸热法和有机溶剂法分别提取雅致枝霉、拉曼被孢霉、少根根霉、畸雌腐霉和橙黄红酵母的油脂,从样品要求、最小样品量、仪器要求、处理样品能力及油脂得率等方面对4种提取方法进行综合评价,并对索氏法、超临界CO2萃取法和酸热法提取的雅致枝霉油脂的脂肪酸组成进行气相色谱分析。索氏法的油脂得率最高,但耗时较长;超临界CO2萃取法和酸热法的油脂得率相近,较索氏法略低,但酸热法更为简便,单位时间内样品处理能力强;有机溶剂法提取效果最差。我们建立的酸热法是一种适合油脂及多水饱和脂肪酸高产菌株筛选的简便、有效的真菌油脂提取方法。     

雅致枝霉TE7-15发酵生产γ-亚麻酸的实验研究

研究了温度、时间、碳源和氮源对雅致枝霉诱变株TE7-15的菌体生长、油脂积累及GLA合成的影响,确定了TE7-15菌株适宜的摇瓶发酵培养条件,使其菌体生物量达到19.04g/L,GLA产量达到1079.95 mg/L,可以满足工业化生产的要求.     

雅致枝霉高产γ-亚麻酸突变株的选育

以雅致枝霉ＡＳ３．３４５６为出发菌株发酵生产γ－亚麻酸,经过２次５－氟尿嘧啶、紫外线、氯化锂复合诱变处理,得到变异株ＴＥ７－１５,其菌体生物量提高了１０．１２％,产脂率提高了５８．８８％,γ－亚麻酸产量提高了１１７．２８％,达到１０７９．９５ｍｇ／Ｌ,已满足工业化生产的要求。     

拉曼被孢霉F5发酵生产γ-亚麻酸的研究

对拉曼被孢霉突变株F5发酵生产γ-亚麻酸的最适碳源、氮源、发酵时间及温度、无机盐离子添加、最适碳源浓度及补加碳源时间等发酵条件进行了研究探讨.最适发酵培养基组成为(g/L):葡萄糖100,酵母浸出粉4,蛋白胨1,K2HPO4 1,CaCl2 1×10-2,MgSO45×10-2,FeSO4 1×10-2,ZnSO4 7.5×10-3,CuSO4 0.5 × 10-5,MnSO4 2×10-3,pH 6.0.培养温度为25℃,140r/min振荡培养10天,培养8天后(即收获前2天)补加5%葡萄糖.发酵结果为:DC24.59g/L,TL 10.84g/L,TL/DC44.09%,GLA/TL10.67%,GLA产量为1156.63 mg/L. GLA产量较初始结果提高156.15%.该菌株已达到工业化生产菌株要求.