白鲫×红鲫杂交后代的遗传变异

以雌性日本白鲫和雄性红鲫为亲本进行杂交,获得了杂交子代合方鲫.对该杂交子代及其亲本的形态特征、繁殖特性和遗传特性进行了较系统的研究.合方鲫的体色为青灰色,外形特征介于父母本之间,表现出杂交特征.合方鲫性腺发育正常,雌雄两性可育,并且具有较高的受精率(90.2%)和孵化率(80.5%),为新品系的繁衍和群体扩大奠定了基础.合方鲫的染色体数为2n=100,DNA含量与亲本一致,是一种二倍体鱼.合方鲫的45S r DNA的ITS区包括ITS-1,5.8S和ITS-2三部分,总长度为884 bp,与亲本序列相似度较高并表现出偏向于父本遗传的特征.同时,杂交子代序列兼有双亲特异碱基位点,表现出重组现象.合方鲫5S r DNA的NTS区具有3种长度类型,序列全长为654 bp,与母本相似度为94.2%,与父本似度为95.1%,杂交子代序列具有明显的重组和突变特征,这些基因重组和突变是品种改良和新品系形成的遗传基础.本研究证明了合方鲫在遗传组成和外形方面都与其亲本有本质区别,是一种有杂种特性的后代,该杂交品种的形成在鱼类遗传育种方面具有重要意义.     

衰老细胞中热休克转录因子1的异常调节和定位

为评估人热休克转录因子1（HSF1）在衰老细胞中呈现年龄依赖功能失调机制, 通过凝胶电泳迁移率改变实验(EMSA)和RNA酶保护实验等了解低总体倍增水平（PDLs）的年轻和高PDLs的衰老IMR90双倍体人肺纤维母细胞的HSF1 DNA 结合活性、HSF1蛋白质及其编码转录子mRNA水平和亚细胞分布.使用H2O2诱导年轻IMR90细胞成为“应激诱导早熟性老化(SIPS)” 细胞,并与复制性衰老细胞比较HSF1 DNA 结合活性、HSF1亚细胞分布和细胞内过氧化物含量.在不同年龄的IMR90细胞中,无论体内或体外,HSF1激活能力与细胞年龄呈反相关,但细胞内HSF1蛋白质与其mRNA水平并无改变.HSF1的亚细胞定位分析显示,HSF1主要存在于年轻细胞胞质中,热刺激促使三体形成和核转移;而在衰老细胞中,37℃时HSF1大部分存在于细胞核内,热刺激后形成三体,与DNA结合能力明显比年轻细胞弱;用H2O2诱导的应激成熟前老化细胞内,HSF1功能和亚细胞分布都与复制性衰老细胞相似.结果显示,细胞年龄与HSF1的激活和定位相关,而与HSF1含量无关,这些变化可能是通过氧化修饰所致.     

腹腔镜下根治性膀胱切除术治疗膀胱癌的疗效及对患者血清IL-6及IFN-γ水平的影响

目的:分析腹腔镜下根治性膀胱切除术治疗膀胱癌的疗效及对血清白细胞介素-6(IL-6)、干扰素-γ(IFN-γ)的影响。方法:将106例膀胱癌患者参照随机数表法分作对照组与实验组,对照组予以开放根治性膀胱切除术,实验组予以腹腔镜下根治性膀胱切除术。观察并比较两组患者术中出血量、肛门排气时间、住院时间、手术时间、淋巴结清扫阳性率,血清IL-6,IFN-γ,P物质,前列腺素E2(PGE2),CD3~+,CD4~+,CD8~+,纤维蛋白原(Fg),活化部分凝血活酶时间(APTT),凝血酶原时间(PT)及并发症的发生率。结果:实验组出血量、肛门排气时间、住院时间少于对照组,但手术时间多于对照组,差异具有统计学意义(P0.05);两组淋巴结清扫阳性率、Fg、APTT、PT比较无差异(P0.05)。实验组IL-6,P物质,PGE2,CD8~+均低于对照组,但IFN-γ,CD3~+,CD4~+及CD4~+/CD8~+均高于对照组(P0.05)。实验组并发症率低于对照组(P0.05)。结论:腹腔镜下根治术膀胱癌切除术治疗膀胱癌的疗效肯定,对血清IL-6及IFN-γ的影响较小,并可抑制疼痛应激指标的分泌,保护机体免疫功能。     

膨大弯颈霉中与Bmt生物合成相关的PKS基因功能研究

环孢霉素A是一种主要由膨大弯颈霉Tolypocladium inflatum产生的环肽类次级代谢产物,临床上被广泛用作免疫抑制剂,其合成需要特殊底物(4R)-4-[(E)-2-butenyl]-4-methyl-L-threonine (Bmt),但目前相关Bmt的研究很少。基因敲除实验证实Bmt的生物合成需要一个聚酮合酶(polyketosynthase,PKS)基因(simG)参与,并推测其功能为合成Bmt的前体化合物羧酸分子3(R)-hydroxyl-4(R)-methyl-6(E)-octenoicacid(B1)。本研究通过在同为虫生真菌的球孢白僵菌Beauveriabassiana中异源表达simG,以证明该基因的功能。通过克隆获得了较大基因simG,利用根癌农杆菌Agrobacterium tumefaciens介导方法将该基因转化到球孢白僵菌中,通过基因检测和半定量RT-PCR筛选出目标基因表达量高的菌株,获得4株simG高表达菌株。将其发酵培养后,利用LC-MS检测发酵产物,发现在simG高表达菌株中存在与B1分子量相同的产物峰。本研究进一步证明了simG负责化合物B...     

非洲猪瘟病毒内囊膜蛋白p17与宿主互作蛋白的初步鉴定

非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)的感染导致猪的死亡率高达100%,给养猪业造成毁灭性灾难。因此,开展针对ASFV感染复制的研究有着重大的意义。目前发现ASFV有超过150个开放阅读框,其中D117L基因编码的内囊膜蛋白p17参与病毒二十面体结构的形成,但是对p17调控宿主细胞功能的机制知之甚少。研究通过免疫沉淀技术联合蛋白质谱分析,初步筛选出与ASFV p17潜在的宿主互作蛋白。通过进一步免疫共沉淀技术和激光共聚焦实验确认了p17与线粒体外膜蛋白TOMM70(translocase of outer mitochondrial membrane 70)、热休克蛋白HSPA8(heat shock 70 kDa protein 8)的互作。该研究为进一步探索p17在ASFV感染过程中的功能提供了重要信息。     

洋桔梗的组织培养及快速繁殖

1植物名称洋桔梗（Eustomagrandiflorum）2材料类别顶芽、侧芽、带腋芽茎段、茎段、种子。3培养条件起始培养基：（1）MS＋6－BA1．0mg·L－1（单位下同）＋NAA0．02。种子前发培养基：（2）MS＋6－BA0．5＋NAA0·05＋GA0．5。继代培养基：（3）MS＋6－BA0．5＋NAA0．02。生根培养基：（4）1／2MS＋NAA0．08;（5）1／2MS＋NAA0．8。以上培养基中均加入琼脂0．6％,PH为5．8,（1）、（2）、（3）号培养基中附加蔗糖3％,（4）、（5）中附加蔗糖2％。光照度2500～3000IX,每天光照12h,培养温度26±2℃。4生长与分化情况4．…     

速生湿地松良种胚性愈伤组织诱导与增殖

为使速生湿地松良种快速大规模繁殖,对其胚性愈伤组织进行诱导和增殖优化研究。该文以1代湿地松种子园中10个速生湿地松优良无性系(基因型)的未成熟合子胚为外植体,系统研究基因型、合子胚发育阶段、基本培养基、植物生长调节剂种类和浓度等不同因子对胚性愈伤组织诱导效率的影响,探讨胚性愈伤组织的增殖条件。结果表明:基因型、合子胚发育阶段、基本培养基及植物生长调节剂种类和浓度等均对胚性愈伤组织诱导有不同程度的影响。10个基因型均诱导出了胚性愈伤组织,其中以2号基因型诱导率最高,达到25.37%;合子胚发育阶段中,以处于多胚阶段的球果诱导率最高;四种基本培养基中,以在DCR基本培养基上诱导效果最佳;植物生长调节剂浓度及组合中以2,4-D 2.0 mg·L^-1+KT 2.5 mg·L^-1诱导率最高,达到27.78%。湿地松胚性愈伤组织增殖的最佳培养基为在DCR基本培养基上添加0.5 mg·L^-12,4-D、1.0 mg·L^-1KT、500 mg·L^-1CH和300 mg·L^-1L-谷氨酰胺。综上研究结果,为湿地松良种进一步开展成熟胚诱导及植株再生奠定了基础。     

云眼斑螳的人工饲养和繁殖

介绍了观赏昆虫云眼斑螳的形态、习性以及在北方人工饲养、繁殖的方法和饲养过程中应注意的问题等.     

细胞可透过性Cre重组酶表达、纯化及生物活性检测(英)

Cre/lox P系统由Cre位点特异重组酶和可被Cre特异性识别的lox P位点构成,该系统广泛用于条件性基因敲除和表达,以研究基因功能.为了表达和纯化一种细胞可透过性Cre重组酶(即His6-NLS-Cre-MTS);经IPTG诱导,在BL21(DE3)宿主菌成功表达His6-NLS-Cre-MTS融合蛋白,通过His-Bond Ni-NTA树脂分离并纯化了该蛋白质,随后借助细胞和非细胞的重组系统成功检测了His6-NLS-Cre-MTS的生物活性.细胞可透过性Cre重组酶提供了一种快捷而高效的在细胞和在体水平进行遗传操作的新工具.