产壳聚糖酶菌株的生物学特性及抑菌性能研究

采用透明圈法,通过大量筛选得到8株产壳聚糖酶的野生菌株,对产壳聚糖酶最高的菌株Y8的菌株形态特征和生理生化特征、生长曲线、培养时间、培养起始pH等生物学特性进行了试验并对该菌所产壳聚糖酶进行了抑菌实验比较,Y8菌株产壳聚糖酶酶活力达0.50U/mL,依据《伯杰细菌鉴定手册》(第九版),初步鉴定为似单胞菌(Pseudomonas)属的一个种。菌株Y8的适宜培养pH值为6.0～7.0,最适pH值6.5。适宜养温度为28～32℃,最适值32℃。Y8所产的壳聚糖酶对细菌和真菌都有一定的抑制作用,对细菌的抑制作用要优于真菌。浓度为0.1％的壳聚糖酶抑菌能力高于1％壳聚糖,比0.1％壳低聚糖的抑菌效果略高。     

产壳聚糖酶菌株的初步筛选

通过大量的筛选,获得了产壳聚糖酶较好的菌株Y2、Y4、Y8。其发酵液所产壳聚糖酶的酶活力分别为2．0U／ml,2．1U／ml,2．2U／ml。     

多棘海盘车皂甙抗菌活性研究

采用有机溶剂法从多棘海盘车中提取皂甙化合物,通过中性氧化铝柱的色素吸附以及AmberLite XAD-2树脂柱的富集,得到海星皂甙。采用“管碟法”分别研究了海星皂甙对4种细菌和4种真菌的体外抑菌作用。对细菌的抗菌效果表明：海星皂甙对金黄色葡萄球菌、腊样芽孢杆菌的生长有较好的抑制作用,最低抑菌浓度分别是10、12．5mg／mL,而对大肠杆菌则无抑菌作用;对真菌的抗菌效果表明：海星皂甙对黑曲霉的生长有显著的抑制作用,而对啤酒酵母、青霉、根霉则无抑菌作用。从而说明海星皂甙对细菌和真菌的抑制作用均有一定的选择性。     

海藻中两种纤溶活性化合物的分离与结构鉴定

采用氯仿-甲醇有机溶剂提取、常压硅胶柱层析等方法进行分离纯化,从微劳马尾藻的提取物中分离纯化了6个化合物;根据核磁共振谱分析及文献解析化合物B、D分别确定为棕榈酰基．油酰基-3-O-α-D-吡喃葡萄糖基甘油和肉豆蔻酰基-油酰基-3-O-α-D-吡喃葡萄糖基甘油;使用酶标仪体外测定化合物的纤溶活性,发现化合物B使纤溶作用提高了10％～30％,化合物D的纤溶促进作用弱于化合物B;分离纯化的纤溶促进化合物B和D属于甘油糖脂类化合物。本文首次从微劳马尾藻分离得到了肉豆蔻酰基．油酰基-3-O-α-D-吡喃葡萄糖基甘油。     

猪皮胶原蛋白水解产物中的抗氧化活性肽的分离及其氨基酸组分

利用不同蛋白酶水解猪皮胶原蛋白,根据水解产物对自由基的清除率,筛选最适蛋白酶的组合,筛选抗氧化活性较高的肽类,并进行氨基酸分析.结果表明:胃蛋白酶→木瓜蛋白酶→菠萝蛋白酶为酶解胶原蛋白的最佳组合;分离纯化得到了三种具有较高抗氧化活性的肽;氨基酸组分分析显示:P1′、P2′和P3′组分具有自由基清除作用的关键氨基酸甲硫氨酸、酪氨酸和组氨酸等.