大肠杆菌突变株高密度生长的多因素分析

【背景】pBHR68是表达聚-3-羟基丁酸酯(Poly-3-Hydroxybutyrate,PHB)合成基因簇的高拷贝质粒,大肠杆菌K-12突变菌株S17-3在携带该质粒时生长密度高,耐低p H且在低pH条件下生长时高产可拉酸(Colanic Acid,CA)。【目的】系统探究与菌种(大肠杆菌S17-3)及质粒(pBHR68)相关的高密度生长现象的分子机理,提示PHB和CA合成代谢与高密度生长的偶联机制。【方法】解析质粒的构成、CA合成途径基因组成对高密度生长现象的影响;利用全基因组同比分析寻找可能的关键突变基因;开展转录组学分析,筛查大肠杆菌S17-3及其转化子在不同培养方式中的转录组数据,通过基因敲除实现基因功能及细胞生长状态的验证。【结果】大肠杆菌S17-3的高密度生长菌与PHB合成的操纵子的过表达以及rhsA的多位点突变相关,RcsA是CA合成与高密度生长中碳代谢流调控的关键调控蛋白。在低pH培养时,敲除可拉酸合成的关键糖基转移酶导致生物量提升;此外,大肠杆菌S17-3/pBHR68的高密度生长还可能与乳糖操纵子异常的转录调控相关,lacZ突变株高密度生长特性消失,而且无法合成可拉酸。【结论】研究分析了引起大肠杆菌S17-3高密度生长的多种因素,为大肠杆菌提高生长密度现象的进一步分析提供了重要线索,也为利用大肠杆菌S17-3的优异生理特性将其改造为寡糖合成的底盘细胞奠定了研究基础。     

胎儿体重相关因素分析以及多元回归方程的建立

目的:寻找更为准确的预测胎儿体重的方法,并探讨腹围增加值在预测胎儿体重中的价值。方法:回顾性分析山东省烟台市芝罘区妇幼保健院2010年3月至12月期间出生的280例新生儿的临床资料,将孕妇身高、体重、孕期增重、宫高、足月腹围、孕期腹围增加值及胎儿的双顶径、股骨长等,与新生儿出生体重进行相关及回归分析,得出回归方程并检验其显著性和与实际出生体重的符合率,并与以往临床常用方法比较。结果:宫高、腹围增加值、双顶径和股骨长与胎儿体重显著相关,建立的多元回归方程计算胎儿体重预测值与实际胎儿体重符合率达70.71%,远高于其它方法。结论:采用宫高、腹围增加值、双顶径、股骨长建立的多元回归方程对胎儿体重预测符合率高,有较好的临床应用价值。     

可可对血压影响的Meta分析

目的：评估巧克力或可可产品对有或无高血压成人血压的影响。方法：检索PubMed、The Cochrane Library、EMbase、中国知网（CNKI）和万方数据库,检索时限从建库至2018年11月,由2名研究者分别对纳入文献进行数据提取与风险偏倚评价后,采用RevMan5.3和Stata12.0软件进行Meta分析。结果：纳入34篇文献（38项符合标准的随机对照试验）,共1 897名参与者。Meta分析结果显示,与对照组相比,服用巧克力或可可产品组能更显著地降低参与者的收缩压（systolic blood pressure,SBP）［（WMD=-1.87,95%CI（-3.04,-0.70）,P=0.002］和舒张压（diastolic blood pressure,DBP）［（WMD=-1.60,95%CI（-2.11,-1.08）,P＜0.001］,差异均具有统计学意义。结论：巧克力或可可产品在一定程度上可降低有或无高血压成人的血压,但长期摄入对血压的影响还有待研究。     

巴西人参皂苷的纯化富集及其体外促雄激素活性研究

目的：探讨巴西人参提取物中齐墩果酸型皂苷类化合物对小鼠睾丸间质细胞（TM3细胞）雄激素合成与分泌的促进作用,并根据细胞试验筛选出活性较强的组分。方法：以AB-8与XAD1600两种大孔吸附树脂分离富集得到的不同组分为试材,分别采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法、酶联免疫吸附法、硝酸还原法、羟胺法、硫代巴比妥酸法检测不同组分在不同浓度下对TM3细胞增殖活率、睾酮（T）含量、二氢睾酮（DHT）含量、环磷酸鸟苷（cGMP）含量、一氧化氮（NO）含量、超氧化物歧化酶（SOD）活性及丙二醛（MDA）含量的影响。结果：经AB-8大孔吸附树脂分离得到的70%乙醇组分较其他组分具有更强的促进TM3细胞雄激素分泌的活性,再以XAD1600大孔吸附树脂对70%乙醇组分进一步纯化富集,获得的GP-1与GP-2组分均可显著促进TM3细胞T、DHT、cGMP的分泌量（P <0.05,P <0.01）,并提高SOD酶活性（P <0.01）,降低MDA含量（P <0.05,P <0.01）,且GP-2组分效果优于GP-1组分。结论：巴西人参各分离纯化组分可以显著促进TM3细胞雄激素的合成与...     

淹水胁迫对虉草幼苗生长和生理的影响

水深梯度是影响河湖水陆交错带植物生长发育和分布的关键生态因子。该研究以虉草幼苗为材料,利用双套盆法,设淹水梯度0、10、20、30、40、50 cm和全淹水以及对照(常规浇水)8个处理组,通过测定虉草的株高、叶片数、SPAD值、MDA含量、SOD、POD及CAT活性、可溶性蛋白含量指标,研究不同淹水深度下虉草的形态与生理特征变化。结果表明:经过36 d淹水胁迫后,(1)随淹水深度增加,虉草的生长速度变慢,叶片数减少,叶绿素相对含量降低。(2)随淹水时间的延长,各淹水组MDA含量不断上升;淹水0~30 cm深度,虉草SOD、POD不断上升,但CAT先升后降;淹水40~60 cm深度,虉草SOD、CAT不断上升,但POD先降后升。(3)可溶性蛋白含量虽随试验时间的延长不断上升,但淹水逆境不是控制虉草可溶性蛋白含量的关键因素。淹水胁迫会对虉草生长造成伤害,主要表现为生长速度减缓、膜脂过氧化程度加剧、抗氧化酶保护系统受到破坏、植株逐渐死亡。该研究结果为虉草资源的合理利用与开发提供了科学参考。     

黄顶菊AM真菌多样性及其优势种对植株生长的影响

自河北衡水市选择6个黄顶菊Flaveria bidentis入侵样地,采集根区土壤和根系样品,分离丛枝菌根(AM)真菌,测定其物种多样性状况;于盆栽条件下评估上述试验确定的优势AM真菌对黄顶菊生长发育的影响;采用隔网分室培养系统测定促生效应最大的AM真菌优势种组合对黄顶菊与伴生植物三叶草Trifolium repens间碳氮运转分配的影响。从根区土壤和根内分别鉴定到AM真菌8属26种和5属7种,其中光壁无梗囊霉Acaulospora laevis、根内根孢囊霉Rhizophagus intraradices、摩西斗管囊霉Funneliformis mosseae和变形球囊霉Glomus versiforme为根区土壤的优势种;接种F. mosseae+R. intraradices+A. laevis处理对黄顶菊的促生效应最大。分室培养系统中分别对黄顶菊和三叶草接种AM真菌和施加¹⁵N或¹³C处理后,黄顶菊茎叶和根系¹⁵N和¹³C丰度均明显高于三叶草的。结论认为,入侵样地黄顶菊根区有丰富的AM真菌物...     

根茎萌发与幼苗期的虉草水分生态幅

为揭示虉草根茎萌发和幼苗期的水分生态幅,该研究通过盆栽控制试验,设置8个水分梯度：(2±0.5)％、(10±0.5)％、(15±0.5)％、(20±0.5)％、(25±0.5)％、(30±0.5)％、(40±0.5)％(水分饱和)和淹水(2 cm),通过萌发率、各形态指标和生理指标对虉草水分生态幅进行了探讨。结果表明：(1)土壤水分含量过低和过高都会降低虉草根茎萌发率。(2)随土壤水分含量的增加,虉草幼苗株高和地上生物量都呈现先上升后下降的趋势,两者并呈指数函数关系y ＝0.2038e0.0486x(R2＝0.803)。(3)虉草通过调整自身结构特点,降低个体大小、减少叶片数量和叶面积来适应胁迫环境,土壤水分含量为10％~30％时虉草含水率能保持相对稳定的水平。虉草的光和色素( Chl a、Chl b、Car)和相对叶绿素( SPAD)含量均随土壤水分含量的增加呈现出先上升后下降的趋势,Chl a/b则相反,呈先下降后上升趋势。(4) Chl/Car各组之间差异不显著。综合上述研究,利用高斯模型分析得出虉草的水分生态幅为7.48％~52.20％,最适水分生态幅为18.99％~40.60％。     

黄顶菊AM真菌多样性及其优势种对植株生长的影响

自河北衡水市选择6个黄顶菊Flaveria bidentis入侵样地,采集根区土壤和根系样品,分离丛枝菌根(AM)真菌,测定其物种多样性状况;于盆栽条件下评估上述试验确定的优势AM真菌对黄顶菊生长发育的影响;采用隔网分室培养系统测定促生效应最大的AM真菌优势种组合对黄顶菊与伴生植物三叶草Trifolium repens间碳氮运转分配的影响。从根区土壤和根内分别鉴定到AM真菌8属26种和5属7种,其中光壁无梗囊霉Acaulospora laevis、根内根孢囊霉Rhizophagus intraradices、摩西斗管囊霉Funneliformis mosseae和变形球囊霉Glomus versiforme为根区土壤的优势种;接种F. mosseae+R. intraradices+A. laevis处理对黄顶菊的促生效应最大。分室培养系统中分别对黄顶菊和三叶草接种AM真菌和施加¹⁵N或¹³C处理后,黄顶菊茎叶和根系¹⁵N和¹³C丰度均明显高于三叶草的。结论认为,入侵样地黄顶菊根区有丰富的AM真菌物...     

氢化酶重组表达研究进展

氢化酶催化最简单的氧化还原反应,但蛋白结构却非常复杂,对其蛋白结构和催化功能的研究牵动着生物制氢、光电产氢催化剂及氢能源电池等相关绿色能源产业的发展。氢化酶通常可逆地催化质子还原产氢的反应,对氧化还原电位非常敏感,催化活性中心易于被氧化失活,活性蛋白的分离提纯十分不易,使得对其催化机制的认识推进缓慢。为了获取更多的氢化酶活性蛋白,许多研究团队先后对氢化酶开展了大量的同源或异源重组表达研究,就这类研究工作进行了扼要的总结和分析。