康莱特联合阿霉素诱导骨肉瘤细胞凋亡的实验研究

目的研究康莱特对骨肉瘤细胞的诱导凋亡作用及其相关机制,探寻骨肉瘤的中西医结合化疗方案.方法免疫组化及RT-PCR方法检测不同浓度康莱特作用下骨肉瘤细胞的Fas表达,并将康莱特与阿霉素单独及联合应用于骨肉瘤细胞,采用MTT法检测细胞毒性作用,流式细胞仪定量分析凋亡细胞所占比例,倒置相差显微镜、荧光显微镜下观察凋亡细胞形态改变.结果康莱特可上调骨肉瘤细胞的Fas表达并诱导凋亡,康莱特浓度达到10μl/ml时,细胞抑制率不再明显改变,但如与1μlg/ml阿霉素合用将使细胞抑制率进一步提升(P<0.01).细胞形态观察及凋亡率测定也显示,康莱特与阿霉素联用可诱导更多骨肉瘤细胞凋亡.结论康莱特可通过上调Fas表达诱导骨肉瘤细胞凋亡,康莱特与阿霉素合用可提高杀伤骨肉瘤细胞.     

辽西半干旱区典型城市土壤质量评价

为了探究城市不同土壤分类对城市土壤质量的影响,选取辽宁省阜新市8种不同类别的土壤,分别为公园绿地重塑土(Ⅰ)、校园林下重塑土(Ⅱ)、居住区绿地重塑土(Ⅲ)、河道水域冲刷土(Ⅳ)、近郊农地重塑土(Ⅴ)、工业用地重塑土(Ⅵ)、郊区林下原生土(Ⅶ)、交通绿化带重塑土(Ⅷ)为研究对象,对其0-30 cm土层进行土壤质量综合评价。结果表明:(1)阜新市土壤容重在1.23-1.44g·cm–3之间,公园绿地重塑土的土壤容重最小;土壤毛管孔隙度表现为Ⅰ(42.39%)>Ⅷ(42.05%)>Ⅲ(41.32%)>Ⅱ(39.04%)>Ⅵ(37.93%)>Ⅴ(37.15%)>Ⅳ(37.05%)>Ⅶ(33.77%);土壤含水率在9.20%-17.28%之间。(2)不同类型城市土壤有机质含量为:Ⅰ>Ⅱ>Ⅲ>Ⅳ>Ⅷ>Ⅶ>Ⅴ>Ⅵ。全氮含量在3.73-11.23 g·kg–1之间;有效磷含量在0.29-2.24 mg·kg–1之间;速效钾含量在2.41-15.88mg·kg–1之间。(3)筛选10个指标评价辽西半干旱区典型城市土壤质量...     

骨肉瘤中抗骨桥蛋白抗体与化疗药物联合应用的实验研究

目的:探讨抗骨桥蛋白(OPN)抗体治疗骨肉瘤的有效性及协同化疗药作用的可能性.方法:选用MTX、ADM、DDP、IFO4种药物,应用抗OPN特异性抗体与化疗药物联合作用于骨肉瘤MG-63细胞株,加入不同浓度梯度化疗药物,分别在加药后0、24、48、72小时用MTT方法测定吸光值.结果:MTT实验结果显示,在抗OPN特异性抗体作用于MG-63细胞后,化疗药物对MG-63细胞增殖抑制作用增强,具有明显的荆量依赖性和时间依赖性.并且在化疗药物一定的浓度及时间点下所检测的吸光值显示,抗OFN特异性抗体干扰与否,化疗药物的增殖抑制作用具有显著性差异,说明抗OPN特异性抗体作用下化疗药物对MG-63细胞的敏感性提高.提示抗OPN特异性抗体与化疗药物联合治疗骨肉瘤具有有效性及协同作用.结论:抗OPN特异性抗体对MG-63细胞系提高对化疗药物的敏感性有协同作用,具有广泛的潜在的临床应用价值.OPN可能成为骨肉瘤药物治疗中的一个靶点.     

骨肉瘤中survivin基因与核因子-κB的表达

目的探讨survivin基因和核因子-κB(nuclear factor-κappa B, NF-κB)对骨肉瘤发生发展的影响.方法采用原位杂交、免疫组织化学技术检测38例骨肉瘤、15例骨软骨瘤、5例正常骨组织survivin mRNA及NF-κB p65蛋白表达,并与骨肉瘤主要临床病理学参数进行比较.结果正常骨和骨软骨瘤组织survivin mRNA及NF-κB p65表达不明显,骨肉瘤组织中其表达率分别为65.8%、60.5%,survivin mRNA表达与骨肉瘤分型和转移有关,NF-κB p65表达与骨肉瘤转移有关,骨肉瘤中survivin与NF-κB表达正相关.结论凋亡抑制基因survivin与核因子-κB在骨肉瘤细胞中均异常活化,进而参与了骨肉瘤的发生和发展,二者对骨肉瘤的作用可能存在密切的关联.     

PTEN和Fas在骨肉瘤中的表达及其临床意义

目的探讨PTEN和Fas的表达在骨肉瘤发生中的可能作用及其临床意义.方法用SP免疫组化方法检测PTEN和Fas在38例骨肉瘤及20例骨软骨瘤中的表达.结果 PTEN在骨肉瘤中表达阳性率为55.3%,在骨软骨瘤中为90.0%,二者相比差异有非常显著意义(P<0.01).Fas在骨肉瘤中表达阳性率为73.7%,在骨软骨瘤中为95.0%,二者相比差异有显著意义(P<0.05).骨肉瘤中PTEN和Fas的表达呈显著正相关(r=0.39,P<0.01).PTEN的低表达与分化程度无关,与肺转移有关,Fas的低表达与分化程度及肺转移有关.结论 PTEN和Fas与骨肉瘤的发生有关,且呈正相关,联合检测PTEN和Fas的表达将对骨肉瘤的早期诊断,判定恶性程度及预后具有指导意义.     

辽西低山丘陵区不同年龄荆条冠层截留降雨模拟实验研究

为揭示辽西低山丘陵区不同年龄荆条冠层降雨截留的变化规律,采用人工模拟降雨动态监测荆条冠层降雨截留情况,并建立了经验模型。结果表明：荆条冠层未截留量与降雨量呈线性显著正相关,且随年龄增加,未截留量的增加速率减小;250 min时未截留率趋向稳定为1年生91.87% > 2年生89.75% > 3年生85.08% > 4年生79.00%,未截留率与降雨量显著正相关;荆条截留量随着降雨量的增加而增加,在250 min时4年生为（5.25±0.49）mm > 3年生（3.73±0.65）mm > 2年生（2.60±0.23）mm > 1年生（1.93±0.55）mm,且1、2年生荆条截留量趋向稳定;250 min后冠层截留率逐渐变小并趋向稳定值,4年生21.00% > 3年生14.92% > 2年生10.25% > 1年生8.13%;荆条附加截留量4年生为（0.27±0.03）mm > 3年生（0.17±0.04）mm > 2年生（0.14±0.01）mm > 1年生（0.09±0.02）mm。揭示了不同年龄荆条冠层截留降雨的基本规律,验证了附加截留量,为进一步研究荆条的生态水文效应提供了科学的理论依据,对水土保持树种优选和辽西地区水土流失治理具有一定的指导意义。     

樟子松固沙林更新迹地草本植物多样性及其对土壤理化性质的影响

以科尔沁沙地南缘的彰武县章古台万亩林为研究对象,野外取样调查和实验室检测分析相结合,以樟子松固沙林采伐迹地为对照,研究不同植被恢复类型下樟子松固沙林更新迹地生境的改良效果,探讨植被重建后植物多样性及土壤理化性质的响应。结果表明:1)樟子松(Pinus sylvestris)固沙林更新迹地植被重建后,草本植物物种多样性增加,林下植物偶见种数目增多,13种草本植物在8个样地中未重复出现;2)与采伐迹地相比,不同植被重建类型土壤理化性质均有所改善,土壤容重、田间持水量、有机质、全氮、碱解氮、速效钾在彰武小钻杨(Populus xiaozhuanica)、五角枫(Acer mono)林地改良效果较好,全钾在红刺榆林(Hemiptelea davidii)地含量明显提高、山杏(Armeniaca sibirica)林地的有效磷相比采伐迹地明显提高,且均表现为上层改良效果优于下层;3)不同植被恢复类型土壤理化性质间存在显著差异,随着物种多样性的增加,土壤理化性质逐渐改善,土壤容重、田间持水量、有机质、全磷与植物多样性具有显著的相关性,土壤理化性质的与植物多样性相互作用,共同促进生态系统正向演替。研究结果为控制科尔沁沙地土壤沙化,加速该区生态系统的恢复与重建提供理论依据。     

露天煤矿排土场不同植被恢复模式土壤养分和酶活性的差异性

为明晰露天矿排土场不同植被恢复模式下土壤改良效果,以阜新海州露天矿排土场刺槐林、榆树林、混交林、灌木林、荒草地土壤为研究对象,分析不同植被恢复模式下土壤养分含量及酶活性特征。结果表明：不同植被恢复模式土壤养分含量随土层的加深整体呈下降趋势,均存在明显的表聚性;5种植被恢复模式土壤蔗糖酶、过氧化氢酶、脲酶活性峰值均出现在0～10 cm土层,与其他土层差异显著,土壤蛋白酶活性峰值分布在0～30 cm土层;土壤养分含量与土壤酶活性显著相关。主成分分析结果显示,刺槐林、榆树林、混交林、灌木林和荒草地的主成分综合得分依次为2.94、1.68、4.44、-2.66、-6.39,植被恢复效果表现为混交林>刺槐林>榆树林>灌木林>荒草地,表土层恢复效果最佳,随着土层加深效果逐渐下降。混交林地可作为该排土场的主要植被恢复模式。     

不同林龄樟子松人工林土壤-针叶-微生物生态化学计量及稳态性特征

为明确樟子松人工林生态系统的养分特征和稳定机制,在辽西北章古台地区选取幼龄林、中龄林、成熟林和过熟林阶段的樟子松人工林为研究对象,探讨其土壤-针叶-微生物C、N、P含量及生态化学计量比特征,分析各组分的耦合关系和内稳态特性。结果表明：辽西北樟子松人工林土壤C、N、P养分贫瘠;与全球尺度相比,针叶具有较高C、P和较低N的特征;不同林龄相比,土壤C含量峰值12.93 g·kg^-1出现在过熟林,土壤N、P含量峰值0.41、0.25 g·kg^-1,针叶C、N、P含量峰值641.38、10.18、1.81 g·kg^-1,微生物C含量峰值165.68 mg·kg^-1,均出现在成熟林,微生物N、P峰值9.29、2.92 mg·kg^-1出现在中龄林;各林龄樟子松人工林土壤C∶N均高于全国平均水平,表现为N限制;仅过熟林土壤C∶P高于全国平均水平,表现为P限制;樟子松土壤、针叶、微生物C∶N、C∶P均在过熟林达到峰值,此阶段N、P限制最为强烈。樟子松人工林土壤、植物、微生物3个组分间的生态化学计...     

基于肝癌细胞线粒体功能受损和caspase-3信号通路探讨罗哌卡因促进肝癌细胞凋亡的作用机制研究

摘要 目的：基于肝癌细胞线粒体功能受损和天冬氨酸蛋白水解酶3（caspase-3）信号通路探讨罗哌卡因促进肝癌细胞凋亡的作用机制。方法：选用细胞株人肝癌细胞BEL-7402进行实验研究。用不同浓度罗哌卡因处理BEL-7402细胞后,采用溴化噻唑蓝四氮唑（MTT）法检测肝癌细胞的增殖情况,光镜及4,6-二苯胺-2-苯吲哚二盐酸盐（DAPI）溶液染色观察细胞形态,台盼蓝染色法测定细胞活力,流式细胞术分析BEL-7402细胞的凋亡情况,电子显微镜下观察细胞线粒体,激光共聚焦显微镜观察caspase-3在BEL-7402细胞中的细胞核迁移情况,蛋白免疫印迹试验评价罗哌卡因对细胞质凋亡相关蛋白、线粒体凋亡相关蛋白、BEL-7402细胞和线粒体凋亡相关蛋白表达的影响。结果：罗哌卡因能够抑制肝癌细胞的生长,并呈剂量依赖性和时间依赖性。罗哌卡因可诱导BEL-7402细胞发生凋亡,显著增加BEL-7402细胞的凋亡率。罗哌卡因能够损伤肝癌细胞线粒体功能。激光共聚焦显微镜观察显示caspase-3分子迁移到细胞核。罗哌卡因与caspase-3相互作用,促进caspase-3向细胞核内迁移,刺激caspase-3和聚腺苷二磷酸核糖聚合酶（PARP-1）、天冬氨酸蛋白水解酶9（caspase-9）蛋白的表达,抑制B细胞淋巴瘤-2基因（Bcl-2）的表达,促进凋亡酶激活因子（Apaf-1）的表达,促进线粒体释放细胞色素C（Cytochrome C）,激活caspase-3活性。结论：罗哌卡因具有促进肝癌细胞凋亡的作用,其作用机制可能与破坏肝癌细胞线粒体功能和激活caspase-3信号通路有关。