染色体乘客复合体对细胞有丝分裂的调控作用

染色体乘客复合体(CPC)是近年来处于细胞有丝分裂调控研究热点的一组蛋白分子,主要由Aurora B激酶、着丝粒中心蛋白(INCENP)、Survivin及Borealin/DasarB等蛋白分子组成。研究证实CPC在有丝分裂过程中扮演了重要的角色,涉及纺锤体形成、染色体排列、姊妹染色单体分离、纺锤体检查点信号及胞质分裂等多种重要功能的调节。本文重点阐述了CPC各组成蛋白功能特点、相互作用及对纺锤体检查点蛋白和微管蛋白的调节等方面的最新研究进展,同时阐明CPC组成蛋白作为抗癌药物研制靶标的潜在应用价值。     

活性氧在组蛋白去乙酰化酶抑制剂杀伤肿瘤细胞过程中的作用

组蛋白去乙酰化酶抑制剂(histone deacetylase inhibitor, HDACi)是一类新的化疗药物,在体内外的实验中表现出显著的抗癌活性. HDACi选择性抑制肿瘤细胞内抗氧化蛋白的表达,提高细胞内的活性氧水平,引起线粒体和DNA的氧化损伤,从而活化凋亡信号通路,诱导肿瘤细胞凋亡.     

盐生草(Halogeton glomeratus)二型种子的休眠与萌发

盐生草的果实和种子存在二型性,这两种类型的种子在形状、大小、颜色及包被其花被片背部是否具翅上均有显著差异.绿色种子,圆形,直径为(1.552±0.116) mm,宿存花被革质,背部有紫红色翅状附属物,单粒重为(0.808±0.033)mg;黄色种子,椭圆形,长为(1.752±0.155) mm,宽为(1.146±0.088) mm,宿存花被革质,背部无翅状附属物,单粒重为(0.568±0.011) mg.两种种子在3个变温条件(5/25℃、5/25℃、15/25℃,暗12 h /光12 h)下的萌发率均较低,绿色种子为36%,而黄色种子为17%(15℃/25℃).延长储藏时间和划破种皮均能显著提高绿色种子的萌发率,表明绿色种子属于非深度生理休眠.随着储藏时间的延长,黄色种子的萌发率也能缓慢提高,但不显著,而划破种皮能够显著促进其萌发,表明黄色种子属于深度生理休眠.     

组蛋白去乙酰化酶抑制剂－FK228对人非小细胞肺癌A549细胞纺锤体检查点的影响

HDACi—FK228是一种新型抗肿瘤药物,但其作用机制研究的尚未十分明确,为进一步阐明FK228杀伤肿瘤细胞的机制,该文应用流式细胞术检测FK228对非小细胞肺癌A549细胞周期的影响：应用免疫荧光染色和免疫印迹检测FK228对检查点蛋白Bub1及BubR1定位和表达的影响;采用纺锤体检查点功能实验检测FK228对细胞检查点功能的影响。结果提示,FK228处理24h后,G2／M期细胞比例由6．35％增至19．91％;FK228能够抑制检查点蛋白Bub1及BubR1着丝粒定位并上调两种蛋白表达：纺锤体检查点功能实验提示对照组经Nocodazole或Taxol处理后G2／M期细胞比例最高分别达35．74％及29．24％,而FK228处理组经上述两种药物处理后各时间点G2／M期细胞所占比例皆明显减少（最高所占比例分别仅为7．13％及6．03％）,失去了随时相点的动态变化,提示FK228抑制了A549细胞纺锤体检查点在监测张力和黏附上的功能。该研究证实FK228能够通过影响纺锤体检查点蛋白着丝粒定位以及抑制纺锤体检查点的功能,进而干涉肿瘤细胞有丝分裂过程,有助于阐明HDACi杀伤肿瘤细胞的新机制。     

热休克蛋白对细胞凋亡的调控作用

热休克蛋白属于细胞内分子伴侣蛋白,除涉及细胞内一些蛋白质分子构象和稳定性的调节之外,热休克蛋白对细胞应激、代谢、增殖以及凋亡等生理过程均具有重要的调控作用。研究表明热休克蛋白对细胞凋亡的调控机制是复杂的,可直接作用于与凋亡相关的蛋白质,也可以通过影响细胞信号传递而间接影响凋亡的发生。由于热休克蛋白对细胞凋亡的调控机制大多依赖于其分子伴侣功能,阻断热休克蛋白的伴侣功能已经成为研究药物诱导肿瘤细胞凋亡的重要靶点。     

应用绿色荧光蛋白研究外源基因在造血细胞的表达调控

以增强型绿色荧光蛋白为报道分子,研究双基因逆转录病毒载体介导小鼠骨髓细胞的基因转移中,SV(simianvirus)40启动子和内部核糖体进入位点(internalribosomeentrysite,IRES)对双基因共表达的影响。构建双基因中间序列分别为SV40启动子和IRES的载体pLESN和pLEIN。经包装获得较高滴度的病毒上清,以共培养的方式感染5-氟尿嘧啶预刺激的小鼠骨髓细胞。流式细胞仪检测表明转染效率约25%,PCR证明EGFP基因整合至骨髓细胞基因组。半固体培养转基因细胞7d,LEIN组获得具有G418抗性的集落中98%表达绿色荧光,而LESN组54%。结果表明:在双基因逆转录病毒载体介导的小鼠骨髓细胞的基因转导中,IRES与内部SV40启动子相比,更能保证双基因的共同表达。     

腐食酪螨有效积温的研究

腐食酪螨 Tyrophagus putrescentiae(Schrank) ,是世界性仓储物品和食用菌重要害螨 ,也是人体皮炎、体内螨病及螨性过敏的主要病原。本文研究了该螨的有效积温。经测定 ,腐食酪螨全世代的发育始点为 8.38± 1.5 1℃ ,有效积温为 2 2 1.72日度 ;卵、幼螨、第一若螨和第二若螨的发育始点分别为 10 .4 7± 2 .31℃、8.0 9± 2 .36℃、9.0 9± 1.16℃和 10 .5 9± 1.73℃ ,有效积温分别为 4 1.79日度、5 8.0 6日度、36 .2 7日度和 39.5 3日度。     

采用活体成像技术监测肿瘤生长及转移模型的建立

目的采用活体成像技术监测稳定高表达荧光素酶报告基因的肿瘤细胞在小鼠体内生长及转移情况,为肿瘤治疗的药物研发提供新的有用工具。方法采用lipofectamine2000介导的基因转染方法,将pcDNA3．1 7Luc载体转染小鼠高转移乳腺癌细胞株4T1、EMT-6及结肠癌细胞株CT26,经G418抗性筛选及有限稀释法获得可稳定高表达荧光素酶的单克隆细胞;MTT法测定各转染细胞对不同化疗药物的抗性,并采用活体成像的方法检测各转染细胞在小鼠体内的成瘤和转移。结果获得了可稳定高表达荧光素酶基因的单克隆细胞株,该单克隆细胞株具有与亲本细胞系相同的对化疗药物的敏感性;将单克隆细胞株植入小鼠皮下,可采用活体成像技术准确监测肿瘤细胞体内生长及转移。结论采用活体成像技术构建的肿瘤动物模型是拓展肿瘤体内生长、转移及治疗相关研究的理想模型。     

组蛋白去乙酰化酶抑制剂诱导肿瘤细胞凋亡的机制

组蛋白去乙酰化酶抑制剂（HDACi）是一类新的化疗药物,能够有效抑制组蛋白去乙酰化酶的活性,促进组蛋白及非组蛋白的乙酰化修饰,在转录和翻译后修饰水平调控肿瘤靶蛋白及凋亡相关蛋白的表达和降解,活化凋亡信号通路,诱导肿瘤细胞凋亡。HDACi抑制抗氧化蛋白的表达,提高细胞内活性氧的水平,引起细胞的氧化损伤。因此,氧化损伤诱导的细胞凋亡也是HDACi杀伤肿瘤细胞的重要机制。HDACi诱导细胞凋亡机制的发现将进一步促进HDACi在临床治疗中的应用。     

泛素-蛋白酶体途径对雌激素受体α降解的调控

泛素-蛋白酶体途径是真核细胞内降解蛋白质的重要途径,对于维持细胞的正常功能起着重要作用。雌激素受体α(ERα)作为转录因子,与乳腺癌的发生及进展关系密切,抑制ERα的功能已经成为治疗乳腺癌的主要策略之一。目前发现泛素-蛋白酶体途径能够促进ERα降解,影响其转录。简要综述了泛素-蛋白酶体途径对雌激素受体α的转录及降解调控的研究进展。