香烟烟雾提取物抑制肺泡上皮细胞的增殖并诱导其凋亡

香烟烟雾提取物（cigarette smoke extract,CSE）中含有丰富的氧化剂和自由基,由它所引起的氧化应激可导致肺泡壁的损伤进而发展为肺气肿.近年来,围绕CSE损伤肺泡壁作用机制的研究较为活跃,但其结果却一直存在着分歧.本实验的目的是观察CSE对肺泡Ⅱ型上皮细胞的损伤作用并探讨与其相关的分子机制.MTT比色法的结果显示,CSE以时间和剂量依赖性的方式降低细胞的增殖活力,流式细胞术的分析结果表明细胞增殖周期被阻滞在G1/S期.Hoechst 33258染色以及透射电镜观察从形态上确认CSE诱导细胞凋亡的发生,DNA梯的出现和Annexin V-FITC/碘化丙啶双染色的结果从分子水平得到进一步的证实.同时,运用流式细胞术检测到CSE诱导的凋亡伴随着Fas受体的高表达和caspase-3的显著活化.另外,使用H2DCFDA染色,经激光共聚焦显微镜术测得细胞内氧自由基在细胞受到CSE刺激以后大量快速积累.结果表明CSE能够抑制肺泡Ⅱ型上皮细胞来源的A549细胞的生长和增殖,并诱导细胞凋亡,由Fas受体所介导的死亡受体途径参与此凋亡过程,而CSE所引起的氧化应激则可能是阻止肺泡上皮细胞生长增殖并诱导其凋亡的始动因素.     

香烟白酒浸出液对Wistar大鼠身体健康影响的探究

通过学生自己设计实验探讨香烟的白酒浸出液对Wistar大鼠体重变化、毛色、肝指数（肝重占体重的百分数）、肝脏病变、对外界刺激的反应、嗜睡情况、死亡情况、血清总胆固醇（TC）、血清总甘油三酯（TG）、天门冬氨酸氨基转氨酶（AST）、丙氨酸氨基转氨酶（ALT）等方面的影响,激发学生创新意识,培养学生创新能力,帮助他们寻求科学的探究方法。并对全校学生进行戒烟戒酒的宣传教育。     

高温与香烟联合对大鼠早期胚胎致畸作用的研究

为了探讨高温与香烟联合对胚胎的毒性和致畸作用,用高温（４０、４１、４２、４３℃）及香烟烟不溶４物联合处理怀孕的大鼠。结果表明,高温与香烟联合可加强胚胎的致畸作用,并与温度、香烟浓度和高温持续时间明显相关,当持续３分钟的高温与香烟联合,胚胎致畸率达７０％以上,与单独高温组、单独给烟组有明显差异（Ｐ〉０．０１）,并具有协同效应。结果提示,持续高温与香烟联合有明显的胚胎毒性和致畸作用。     

香烟烟雾水溶物诱发蚕豆根尖细胞微核的研究

本文研究了不同浓度的香烟烟雾水溶物对蚕豆根尖细胞微核的诱变作用,结果表明, 上述水溶物能够引起蚕豆根尖细胞微核率发生敏感性变化,提示蚕豆根尖细胞微核技术可作为一种香烟遗传毒理学检垛方法使用。此外,还对使用该方法的意义以及添加VE对香烟烟雾水溶物微核率的影响进行了讨论。     

不同添加物质对香烟烟雾水溶物引起的蚕豆根尖细胞微核率的影响

本课题研究了不同添加物质对香烟烟雾水溶物引起的蚕豆根尖细胞微核率的影响。结果表明亚硒酸钠、烟酰胺、绿茶浸出物和维生素C均能显著降低由香烟烟雾水溶物引起的微核率,上述物质可能具有减轻吸烟引起的遗传毒性损伤的作用。此外,本文还对上述结果的意义进行了讨论。     

Oltipraz对细胞恶性转化抑制作用的研究

选用人胚肺为实验材料,研究了十字花科蔬菜提取物ｏｌｔｉｐｒａｚ对人肺癌病变早期细胞恶性转化的阻断作用。将阻断按时间分为ｏｌｔｉｐｒａｚ在ＣＳＣ作用前、后和同时三组,并设ＣＳＣ、ｏｌｔｉｐｒａｚ、ＤＭＳＯ三组对照,将上述６组体外培养处理的人胚肺组织,提取ＤＮＡ转染Ｒａｔ－１细胞,用低血清筛选、作软琼脂培养、裸鼠接种鉴定,结果在ＣＳＣ、ＣＳＣ→ｏｌｔｉｐｒａｚ两组获得恶性转化细胞,ＣＳＣ组恶性度更大。提示ｏｌｔｉｐｒａｚ对ＣＳＣ所致的细胞恶性转化具有一定阻断作用,ｏｌｔｉｐｒａｚ在ＣＳＣ运用前或同时运用效果较好;进一步推断ｏｌｔｉｐｒａｚ对人肺癌变早期具有一定防治作用。     

烟雾暴露调节miRNAs参与慢性阻塞性肺疾病的研究进展

慢性阻塞性肺疾病(COPD)是全球高发病率和死亡率的主要原因。研究发现,在涉及COPD发病机制的许多分子和途径中,miRNAs已成为重要的参与者。miRNAs是一类长度为18～24 nt的非编码小分子RNA,作为基因表达转录后调控因子涉及多种生理、病理过程,包括COPD的发生、发展。此外,吸烟被认为是诱导COPD的关键因素。故本综述总结了COPD的发病机制,围绕烟雾暴露来描述miR-146a的低剂量表达致肺成纤维细胞的修复功能,miR-135b可试图阻止炎症反应,以及miR-15b、miR-101和miR-144参与炎症反应的异常表达。结果为烟雾暴露中miRNAs作为COPD潜在生物标志物的临床应用价值指明方向,也为该疾病的预防、诊断和治疗提供依据。     

香烟提取物活化大鼠支气管平滑肌细胞蛋白激酶C亚型及下调钾通道BK_(Ca)、Kv1.5表达(英文)

大电导的钙活化钾通道（large—conductance calcium—activated potassium channel,BKCa）和电压依赖性钾通道Kv1．5在气道高反应性的发生机制中具有重要作用。已知吸烟可致气道高反应,但钾通道的变化在其发病中的作用尚需进一步阐明。本文旨在研究香烟提取物（cigarette smoke extract,CSE）对培养的大鼠支气管平滑肌细胞（bronchial smooth muscle cells,BSMCs）钾通道BKCa和Kv1．5表达的直接作用,以及蛋白激酶C（protein kinaseC,PKC）在其中的作用。实验采用原代培养大鼠BSMCs,用5％CSE刺激,免疫印迹检测PKC亚型的表达和转位,半定量RT—PCR、免疫印迹实验检测BKCa和Kv1．5的mRNA和蛋白表达,然后用PKC抑制剂BIM和G6e6983与CSE共作用,检测其对BKCa和Kv1．5的mRNA和蛋白表达的影响。结果显示,5％CSE使PKCε、η、θ发生明显的膜转位,并使BKCa。和Kv1．5的蛋白和mRNA表达明显降低;选择性PKC抑制剂BIM或G6e6983与CSE共同作用,均可使BKCa和Kv1．5的蛋白和mRNA表达部分恢复。上述结果提示,CSE可引起BSMCs的BKCa和Kv1．5表达下调,PKCε、η、θ参与其信号转导。     

探究吸烟的危害

有调查显示,我国中小学生吸烟的问题是相当严重的,吸烟已成为直接危害学生健康的校园杀手。要使我国人群的吸烟率逐年降低,最终建设成一个没有烟害的国家,使每个人都拥有一个清新的生活、学习和工作环境,必须提高人们对烟害的认识,特别要提高青少年的认识,让吸烟的危害深入人心．让每个人自觉拒绝吸烟。     

周期蛋白D1参与香烟烟雾提取物促进人肺动脉平滑肌细胞增殖和迁移

本文旨在探讨周期蛋白D1(cyclin D1)在香烟烟雾提取物(cigarette smoke extract,CSE)所致人肺动脉平滑肌细胞(human pulmonary artery smooth muscle cells,HPASMCs)增殖和迁移中的作用。构建反义cyclin D1基因真核表达载体(pIRES2-EGFP-ascyclin D1),采用脂质体介导基因转染法将空载体(pIRES2-EGFP)和pIRES2-EGFP-ascyclin D1导入正常HPASMCs后,分别进行CSE干预。细胞随机分为6组:对照组、空载体组、反义cyclin D1组、5%CSE组、空载体+5%CSE组、反义cyclin D1+5%CSE组。用实时荧光RT-PCR和Western blot法分别检测cyclin D1mRNA和蛋白的表达,采用流式细胞术、四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)、增殖细胞核抗原(PCNA)染色法测定细胞增殖能力,Transwell小室法检测细胞迁移能力。结果显示,反义cyclin D1基因真核表达载体pIRES2-EGFP-ascyclin D1成功构建,并成功转染入HPASMCs,转染后HPASMCs中cyclin D1的mRNA和蛋白表达水平较对照组均显著下降(P0.05)。与对照组比较,5%CSE组cyclinD1的mRNA和蛋白表达水平均明显升高(P0.05),细胞增殖和迁移能力显著增强(P0.05)。与5%CSE组比较,反义cyclinD1+5%CSE组cyclin D1mRNA和蛋白表达水平均明显下降(P0.05),细胞增殖和迁移能力显著降低(P0.05)。上述结果提示,CSE可通过上调cyclin D1表达促进HPASMCs增殖和迁移,反义cyclin D1基因真核表达载体可抑制CSE介导的HPASMCs增殖和迁移,提示cyclin D1在CSE所致HPASMCs增殖和迁移中发挥重要调控作用。