吸烟对大鼠肺循环血流动力学及肺血管反应性的影响

本实验用大鼠29只,进行人工通气吸入烟气,初步探讨了吸烟对肺循环的影响。其中7只观察了吸烟对肺循环血流动力学的直接影响,结果表明,吸烟可致右心室收缩压、心输出量下降及心率减慢,肺循环阻力无明显改变。观察22只大鼠吸烟后缺氧所致肺循环血流动力学变化,结果表明,吸烟可使缺氧性肺血管反应降低,而且发生在肺循环血流动力学变化之前。     

香烟提取物活化大鼠支气管平滑肌细胞蛋白激酶C亚型及下调钾通道BK_(Ca)、Kv1.5表达(英文)

大电导的钙活化钾通道（large—conductance calcium—activated potassium channel,BKCa）和电压依赖性钾通道Kv1．5在气道高反应性的发生机制中具有重要作用。已知吸烟可致气道高反应,但钾通道的变化在其发病中的作用尚需进一步阐明。本文旨在研究香烟提取物（cigarette smoke extract,CSE）对培养的大鼠支气管平滑肌细胞（bronchial smooth muscle cells,BSMCs）钾通道BKCa和Kv1．5表达的直接作用,以及蛋白激酶C（protein kinaseC,PKC）在其中的作用。实验采用原代培养大鼠BSMCs,用5％CSE刺激,免疫印迹检测PKC亚型的表达和转位,半定量RT—PCR、免疫印迹实验检测BKCa和Kv1．5的mRNA和蛋白表达,然后用PKC抑制剂BIM和G6e6983与CSE共作用,检测其对BKCa和Kv1．5的mRNA和蛋白表达的影响。结果显示,5％CSE使PKCε、η、θ发生明显的膜转位,并使BKCa。和Kv1．5的蛋白和mRNA表达明显降低;选择性PKC抑制剂BIM或G6e6983与CSE共同作用,均可使BKCa和Kv1．5的蛋白和mRNA表达部分恢复。上述结果提示,CSE可引起BSMCs的BKCa和Kv1．5表达下调,PKCε、η、θ参与其信号转导。     

IGF-I和GH在缺氧缺血性脑病新生儿血清中的表达及其临床意义

目的：探究新生儿缺氧缺血性脑病（HIE）血清胰岛素生长因子1（IGF-I）和生长激素（GH）水平与患儿病情程度之间的关系。 方法：选取2005 年6 月~2014 年10 月期间我院产科出生的HIE 患儿49 例为研究对象（研究组）,选取同期健康新生儿50 例作 为对照组,分别于出生后72 小时内和26~28 天测量IGF-I和GH水平,HIE 组患儿在急性期和恢复期做神经行为测定(NBNA), 分析各个指标之间的关系。结果：新生儿血清IGF-I水平在72 h内和26-28 d四组间比较,其中重度组低于其他三组,中度组低于 轻度和对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);新生儿血清GH 水平在72 h内和26~28 d四组间比较,差异无统计学意义（P>0.5）; 新生儿血清IGF-I与GH不存在显著相关性（r=0.193,P>0.05）;HIE 组患儿IGF-I 水平与NBNA分值在急性期和恢复期均存在显 著正相关(r=0.315,P<0.05;r=0.249,P<0.05),而GH 与NBNA 分值在急性期和恢复期均不存在显著的相关性（r=0.210,P>0.05）。 结论：新生儿IGF-I水平不仅可以预测HIE 患儿的病情,且可以影响新生儿HIE的预后情况。     

亚急性轻度缺氧增加组胺刺激的肺动脉内皮细胞钙振荡频率

钙振荡 (calcium oscillation) 能以频率解码的形式调节基因转录,钙振荡的频率可反应基因转录的水平 . 为探索持续缺氧是强化还是钝化肺动脉内皮细胞对组胺的反应,研究了 24 h 亚急性轻度缺氧对组胺刺激的肺动脉内皮细胞钙振荡频率的影响,并探索了其机制 . 结果是： a. 24 h 亚急性轻度缺氧可显著增加组胺刺激的肺动脉内皮细胞钙振荡频率; b.NADPH 氧化酶抑制剂, diphenylene iodonium chloride (DPI , 10 μmol/L) 消除了组胺刺激的常氧和缺氧后肺动脉内皮细胞钙振荡; c. 黄嘌呤氧化酶抑制剂,别嘌呤醇 (oxypurinol , 100 μmol/L) 能显著降低组胺刺激的缺氧后肺动脉内皮细胞升高的钙振荡频率,但降低后的钙振荡频率仍高于常氧组,别嘌呤醇对组胺刺激的常氧组肺动脉内皮细胞钙振荡频率无显著影响 . 以上结果表明,在持续缺氧相关的肺疾患中,肺动脉内皮细胞对组胺反应的敏感性增加 . NADPH 氧化酶在组胺刺激的钙振荡的发生中发挥重要作用;黄嘌呤氧化酶的激活是缺氧引起组胺刺激的钙振荡频率增加的重要原因 .     

缝隙连接在同型半胱氨酸介导的自发性高血压大鼠血管平滑肌细胞增殖中的作用

目的:探讨缝隙连接(GJ)是否参与同型半胱氨酸(Hcy)介导的自发性高血压(SHR)大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)增殖及可能的分子机制。方法:原代培养SHR VSMCs,细胞分四组:①对照组,②Hcy组,③缝隙连接阻断剂(18α-GA)组和④Hcy+18α-GA组。MTT法及流式细胞仪检测细胞的增殖活性,免疫荧光技术观察细胞中Cx43、Cx40蛋白表达及定位,Western blot法检测细胞中Cx43、Cx40蛋白表达,染料示踪分子传递法(划痕标记染料传输法)检测细胞的缝隙连接功能。结果:①与对照组相比,Hcy组MTT法测得A值及细胞周期测得S值增高(P0.05),18α-GA组降低(P0.05);与Hcy组比,TGFβ-1+18α-GA组A值及S值均降低(P0.05)。②免疫荧光技术检测细胞中Cx43、Cx40蛋白表达呈阳性,两者共定位于胞浆。③与对照组相比,Hcy组Cx43、Cx40蛋白表达增强(P0.05),18α-GA组Cx43、Cx40表达均减弱(P0.05);与Hcy组比,Hcy+18α-GA组Cx43、Cx40表达均减弱(P0.05)。④与对照组相比,Hcy组缝隙连接功能明显增强(P0.05),18α-GA组缝隙连接功能明显减弱(P0.05),与Hcy组比,Hcy+18α-GA组缝隙连接功能显著降低(P0.05)。结论:Hcy通过上调SHR VSMCs Cx43和Cx40的蛋白表达,引起缝隙连接通讯功能的增强,促进了SHR VSMCs增殖。     

钙振荡

钙振荡是胞浆游离钙的一种较为普遍的运动形式，本文简述非电兴奋细胞钙振的基本特征、产生机制及功能意义三方面的研究进展。     

血管平滑肌细胞中ERK通路与TGF-β_1/Smad通路的相互作用

目的:探讨血管平滑肌细胞(VSMC)中TGF-β/Smad与ERK信号转导通路是否存在相互调节关系。方法:原代培养的大鼠胸主动脉平滑肌细胞,分四组:①对照组,②TGF-β1组,③ERK阻断剂(PD98059)组和④TGF-β1+ERK阻断剂(PD98059)组。分别用Western blot法检测VSMC内Smad2/3、ERK1/2蛋白表达及磷酸化Smad2/3、磷酸化ERK1/2蛋白含量,RT-PCR方法测VSMC中Smad2、Smad3mRNA的表达。结果:①与对照组相比,TGF-β1组P-Smad2/3、P-ERK1/2蛋白含量增多(P0.05),ERK阻断剂组P-Smad2/3、P-ERK1/2蛋白含量减少(P0.05),TGF-β1+ERK阻断剂组P-Smad2/3、P-ERK1/2蛋白含量无差异;与TGF-β1组相比,TGF-β1+ERK阻断剂组P-Smad2/3、P-ERK1/2蛋白含量减少(P0.05)。各组间Smad2/3、ERK1/2蛋白表达无差异。②各组的Smad2、Smad3mRNA表达无差异。结论:TGF-β1诱导的Smad2/3蛋白磷酸化依赖ERK通路激活,但ERK通路对Smad2/3蛋白和mRNA表达水平无影响。     

ATP对单个肺动脉内皮细胞胞浆游离钙浓度的影响

应用Ｆｕｒａ－２／ＡＭ和双波长显微荧光分光光度计测定原代培养的单个猪肺动脉内皮细胞胞浆游离钙浓度（［Ｃａ２＋］ｉ）为１０７±１４ｎｍｏｌ／Ｌ（ｎ＝１０）;三磷酸腺苷使［Ｃａ２＋］ｉ呈双相增加：初相峰型,其后的第二相为平台期。峰相系内钙释放引起,平台期源于外钙内流。