非酒精性脂肪性肝病大鼠肝组织瘦素受体表达的变化

目的检测高脂饮食诱发的非酒精性脂肪性肝病(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)大鼠肝组织瘦素受体的表达,探讨NAFLD瘦素抵抗的发生机制及瘦素抵抗在NAFLD发病中的作用.方法采用高脂饮食制备Wistar大鼠NAFLD模型;ELISA法测定大鼠血清瘦素(leptin,LP)浓度;全自动生化分析仪测血清甘油三酯(triglyceride,TG)、空腹血糖(fasting blood glucose,FBG),比色法测游离脂肪酸(free fatty acid,FFA),放射免疫法测空腹血清胰岛素(fasting insulin,FINS),计算空腹状态下胰岛素抵抗指数;对肝组织分别进行HE染色、苏丹Ⅳ染色、瘦素受体免疫组化染色,并进行半定量分析.利用SAS 8.0统计软件处理实验数据.结果模型组大鼠肝组织瘦素受体表达比正常组明显减弱,且与血清瘦素浓度、游离脂肪酸、胰岛素敏感指数、肝细胞脂变、炎症活动度显著负相关,相关系数分别为r = -0.83,-0.71, -0.65,-0.83, -0.87.多元线性回归分析显示,瘦素受体表达减弱是肝脂变的独立影响因素.结论肝组织瘦素受体表达减弱是NAFLD瘦素抵抗的重要病理机制之一,瘦素抵抗与胰岛素抵抗相互作用,共同促进了脂肪肝的发生发展.     

db/db小鼠的实验室应用

db/db小鼠为广泛应用的2型糖尿病动物模型,由瘦素受体(leptin receptor,Lepr)的自发性突变引起极度肥胖、多食、消渴、多尿。其表型的严重程度受基因背景的影响,在C57BLKS/J背景下更严重。Lepr还在其它多个位点发生自发性突变,产生一系列肥胖动物,包括db3J/db3J小鼠、db5J/db5J小鼠、dbpas/dbpas小鼠、Zucker fa/fa大鼠和Koletsky fak/fak大鼠等。这些啮齿动物在食欲旺盛和严重肥胖方面表型相似,但在血糖、肾脏损伤及生殖能力等方面的表型不尽相同,为探讨Lepr的复杂功能提供了丰富的素材。本文将就瘦素信号通路的发现史,db/db小鼠在代谢、生殖、免疫等方面的异常表型,其实验室应用、繁殖与鉴定策略,其它自发性突变动物的表型差异及对应的Lepr突变模式等进行较全面的综述。     

高原鼠兔瘦素蛋白乳腺特异表达载体的构建及细胞表达

瘦素(Leptin)蛋白是调节机体能量代谢的关键因子之一。前期研究显示高原鼠兔Leptin蛋白发生了适应性进化。功能实验表明,在温暖或寒冷条件下高原鼠兔Leptin通过减少食物摄取和增加能量消耗调节能量平衡,显示了其调节适应性产热过程的潜力。本研究以高原鼠兔Leptin cDNA为模板扩增高原鼠兔obese (ob)基因编码区序列504 bp,改造并构建哺乳动物真核细胞乳腺特异表达载体pBC1-lep,同时通过组织块法原代培养建立奶山羊乳腺上皮细胞系,并通过pBC1-lep质粒脂质体法转染及转基因细胞的筛选,成功获得转染Leptin的阳性细胞。本研究为利用转基因动物实现奶山羊乳腺中特异表达高原鼠兔Leptin提供了一条可能的途径,完成了乳腺特异真核表达载体的构建。     

妊娠早期流产的阴道超声影像表现及与血清瘦素、ADAM12、CA-125水平的相关性研究

摘要 目的：探讨妊娠早期流产的阴道超声影像表现及与血清瘦素、融合素 -α（ADAM12）、糖类抗原 -125（CA-125）的相关性。方法：选取 2017年 7月 -2020年 9月于我院就诊的 419例具有早期先兆流产征象的孕妇患者,按妊娠结局分为妊娠早期流产组（流产组,61例）和正常早期妊娠组（正常组,358例）。所有患者均进行阴道超声检查,观察卵黄囊的大小和形态。测定胎儿冠臀长（CRL）、胎囊直径（GSD）、卵黄囊直径（YSD）和胎心率（FHR）。同时检测患者血清瘦素、ADAM12、CA-125水平。采用 Spearman秩相关分析评价阴道超声影像学表现与血清瘦素、ADAM12、CA-125水平的相关性。结果：正常组孕妇超声影像表现可见孕囊形态饱满,孕周和胎芽大小相符,可清晰显示原始心管、卵黄囊和胎心波动。流产组孕妇部分超声影像表现可见卵黄囊过大、过小或未见显示,胎芽略小,卵囊位置位于宫腔中下段,孕囊外形稍欠规则,同时可见原始心管或胎心波动。流产组孕妇平均 CRL、GSD、FHR均显著低于正常组,差异均有统计学意义（P＜0.05）;流产组患者平均 YSD稍低于常组,差异有统计学意义（P＜0.05）。流产组孕妇各孕周 CRL、GSD、FHR均显著低于正常组,差异均有统计学意义（P＜0.05）;流产组患者第 6-7周 YSD高于正常组、第8-9周和第 10-11周 YSD低于正常组,差异均有统计学意义（P＜0.05）。流产组患者血清瘦素、ADAM12水平明显低于正常妊娠组,差异有统计学意义（P＜0.05）,流产组患者血清 CA-125水平明显高于正常妊娠组,差异有统计学意义（P＜0.05）。妊娠早期流产患者阴道超声参数 CRL、GSD、FHR与血清瘦素、ADAM12呈正相关（P＜0.05）,与 CA-125水平呈负相关（P＜0.05）。结论：妊娠早期阴道超声及血清瘦素、ADAM12、CA-125可作为早期流产的有效预测因素,阴道超声参数 CRL、GSD、FHR与血清瘦素、ADAM12、CA-125水平具有相关性,临床可通过测定这些指标以提高妊娠早期流产预测的准确性。     

血清瘦素、鸢尾素、SHBG、AQP8与PCOS不孕症接受IVF-ET患者激素水平和妊娠结局的关系研究

摘要 目的：研究血清瘦素、鸢尾素、性激素结合球蛋白（SHBG）、水通道蛋白8（AQP8）与多囊卵巢综合征（PCOS）不孕症接受体外受精-胚胎移植（IVF-ET）患者性激素水平和妊娠结局的关系。方法：选取2020年1月～2022年1月我院收治的293例接受IVF-ET的PCOS不孕症患者,根据是否临床妊娠成功将其分为临床妊娠失败组（n=118）和临床妊娠成功组（n=175）。收集患者临床资料,检测血清瘦素、鸢尾素、SHBG、AQP8水平。Pearson相关系数分析PCOS患者不孕症血清瘦素、鸢尾素、SHBG、AQP8水平与性激素水平的相关性,多因素Logistic回归分析PCOS不孕症接受IVF-ET患者妊娠结局影响因素,受试者工作特征（ROC）曲线分析血清瘦素、鸢尾素、SHBG、AQP8水平单独及联合预测PCOS不孕症接受IVF-ET患者临床妊娠失败的价值。结果：与临床妊娠成功组比较,临床妊娠失败组促卵泡生成素（FSH）、促性腺激素（Gn）用量、获卵数、受精率、优胚率、SHBG水平降低,黄体生成素（LH）、LH/FSH、睾酮（T）、胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）、瘦素、鸢尾素、AQP8水平升高。Pearson相关系数显示,PCOS不孕症患者血清瘦素、鸢尾素、AQP8与FSH水平呈负相关,与LH、LH/FSH、T水平呈正相关（P均＜0.05）;SHBG与FSH水平呈正相关,与LH、LH/FSH、T水平呈负相关（P均＜0.05）。多因素Logistic回归分析显示,LH/FSH、T、HOMA-IR、瘦素、鸢尾素、AQP8为PCOS不孕症接受IVF-ET患者临床妊娠失败的危险因素,优胚率、SHBG为保护因素（P均＜0.05）。ROC曲线显示,血清瘦素、鸢尾素、SHBG、AQP8水平联合预测PCOS不孕症接受IVF-ET患者临床妊娠失败的曲线下面积（AUC）大于各指标单独预测。结论：血清瘦素、鸢尾素、SHBG、AQP8水平与PCOS不孕症接受IVF-ET患者FSH、LH、LH/FSH、T水平和临床妊娠失败相关,有助于预测PCOS不孕症患者妊娠结局。     

JBC：介导瘦素影响胰岛素分泌

来自中国农业大学和解放军第306医院的研究人员在小鼠中证实,LIM同源结构域转录因子Isl一1介导瘦素（leptin）影响了胰岛素分泌。     

西藏小型猪Leptin及其受体胞外区片段的克隆及原核表达

目的克隆及原核表达西藏小型猪瘦素（Leptin）成熟肽及瘦素受体胞外区片段。方法根据西藏小型猪瘦素序列（GenBank号：GQ240885.1）和猪瘦素受体基因胞外域序列（GenBank号：AF167719.1）分别设计并合成两对引物扩增瘦素、瘦素受体基因胞外域编码区1654-2319位片段,以西藏小型猪组织总RNA为模板,经反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）方法获得了特异性片段。再以该两个特异性片段为模板,另外设计两对带有BanHⅠ和HidⅢ酶切位点的套式引物分别扩增瘦素64-504位（成熟肽编码区）和瘦素受体基因胞外域编码区1655-2314位的cDNA片段,将该两片段克隆入pMD18-T载体并转化感受态细菌E.coli DH5α测序并永久保存。此两片段经酶切后克隆到表达载体pRSET A的BamHⅠ和HindⅢ两酶切位点之间,构建重组质粒pR-OB和pR-OBR-a并在大肠杆菌E.coli BL21（DE3）中表达,SDS-PAGE电泳鉴定表达产物。结果在IPTG诱导下促使重组菌pR-OB表达了相对分子质量约18×103左右的融合蛋白;重组菌pR-OBR-a表达了相对分子质量约27×103左右的融合蛋白。结论说明重组质粒pR-OB、pR-OBR-a在大肠杆菌BL21（DE3）中分别可表达西藏小型猪瘦素成熟肽、瘦素受体片段蛋白,为进一步研究瘦素、瘦素受体功能和应用提供了基础。     

阿仑膦酸钠对小鼠骨髓基质细胞分化脂肪细胞瘦素表达的影响

目的探讨阿仑膦酸钠(ALN)对髓内脂肪细胞瘦素表达的影响.方法采用原代小鼠骨髓基质细胞(MSCs)培养诱导培养脂肪细胞技术,模拟髓内脂肪细胞的分化过程,在相同成脂诱导条件下,分别以0mol/L(对照组)、1×10-7mol/L(低剂量组)、1×10-5mol/L(高剂量组)ALN干预诱导成脂过程,Westem-blot法检测各组脂肪细胞瘦素的表达情况.结果在诱导培养4d后,Westem-blot结果显示各组蛋白条带光密度值分别为0.8098±0.1042、0.5531±0.0534、0.4125±0.0354.随着ALN浓度的增加,瘦素表达量依次降低,经方差分析显示各组差异具有统计学意义(P<0.01).结论ALN可通过抑制髓内脂肪细胞瘦素表达而影响髓内脂肪细胞的功能.     

冷驯化条件下长爪沙鼠血清瘦素浓度的变化及其与能量收支和产热的关系

为研究低温胁迫条件下长爪沙鼠的适应对策及瘦素对体重和能量平衡的调节作用 ,我们将 7只成年雌性长爪沙鼠在 5℃条件下驯化 2 1d ,另选 7只作为对照 ,对体重、血清瘦素含量、体脂含量、摄入能、基础代谢率、非颤抖性产热等进行了测定。结果发现 :1 ) 5℃条件下长爪沙鼠的体重没有明显变化 ;2 ) 5℃条件下长爪沙鼠的血清瘦素浓度和体脂含量均明显低于对照组 ,且瘦素浓度与体脂含量呈显著正相关 ;3) 5℃条件下长爪沙鼠的摄入能、基础代谢率和非颤抖性产热等显著高于对照。这些结果表明 :长爪沙鼠在低温条件下产热能力和自身维持能量消耗都增加 ,能量摄入因此而增加 ;瘦素参与了能量平衡和体重的调节 ,但没有直接参与产热调节