实验动物心肌梗塞模型的建立和染色方法的改进

介绍了如何建立可靠稳定的心肌梗塞动物模型。通过应用常规病理苏木素－伊红（H.E)染色及改进的碱性复红－苦味酸（HBFP）组织化学染色,结果表明,在建立实验动物心肌梗塞模型时,操作规范、及时取材制片、选用改进的染色液和染色时间流程,即可证明心肌梗塞的发生。     

人神经生长因子信号肽介导β-内啡肽的分泌表达

目的:构建人神经生长因子信号肽与人β-内啡肽融合基因的真核表达载体,研究人神经生长因子信号肽介导β-内啡肽的分泌表达.方法:取得人基因组后,PCR 法获取人的神经生长因子信号肽部分序列及人β-内啡肽序列;通过 SOE-PCR法将两段 DNA 序列连接,然后插入到真核表达载体内,测序正确后扩增转染级的真核表达载体.表达载体脂质体法转染 NIH3T3细胞,转染后 48-72h 收集细胞及培养上清,RT-PCR 法检测融合基因的转录.RIA 法测定细胞外β-内啡肽的浓度.结果:成功构建全人源的分泌型表达β-内啡肽的真核表达载体,DNA 序列经测序完全符合实验设计;融合基因能够顺利地得到转录并进行表达翻译,在细胞培养上清中可检测到其产物.结论:构建的真核表达载体能够分泌表达人β-内啡肽,提示人神经生长因子信号肽序列能够发挥其介导蛋白产物分泌表达的作用.     

220次大鼠心脏移植的经验体会

作者采用Ono等创建的大鼠异位心脏移植模型,并作了部分改进,手术成功率达93.5％,手术时间和供心缺血时间缩短。本文着重介绍手术方法与经验体会。     

C-L单柱瓣体外流体动力学研究

本文报告国产C—L单柱瓣(C—LM瓣)体外流体动力学研究随机选择3只C—LM瓣,用C—L标准瓣(C_LS瓣)作对照,在同一条件下进行静态泄漏、定常流、脉动流测试静态泄漏率C—LM瓣与C—LS瓣相近,均符合临床应用要求,定常流跨瓣压差C—LM瓣小于C—LS瓣,P<0.01。流场模型显示C—LM瓣瓣后流场涡流明显小于C—LS瓣。脉动流跨瓣压差C—LM瓣小于C—LS瓣,P<0.05有效开口面积、机械效率、功能指数、流量系数C—LM瓣大于C—LS瓣,P<0.05,返流率C—LM瓣大于C—LS瓣,P<0.05,与Bjork—Shiley单柱瓣相近。结果表明:C—LM瓣为流体动力学性能优良的一种新型国产机械瓣,与Bjork—Shiley单柱瓣性能相近,较C—LS瓣为优。     

保留腱索换瓣和瓣叶腱索乳头肌成形术的一些技术探讨——二尖瓣装置应用基础研究的启示

近5年来,我国在二尖瓣手术中,两种术式在逐渐增多,其一是保留腱索换瓣,其二是包括瓣叶、腱索及乳头肌为矫正对象的二尖瓣成形术。在保留腱索换瓣中,医院之间的效果相差甚远,作者施行的71例中,无1例因人造瓣梗阻而发生不良后果。在二尖瓣成形术中,对瓣叶的矫形争论颇多,而腱索或乳头肌的矫形尚在积累经验阶段,作者施行成形术     

IABP在瓣膜病合并巨大左心室患者中的临床应用

目的评价瓣膜病合并巨大左心室患者术后应用主动脉内球囊反搏泵(IABP)的效果.方法回顾分析本院1997～2000年瓣膜病合并巨大左心室换瓣术后应用IABP患者26例(组Ⅰ),对照组(组Ⅱ)为同期未应用IABP患者30例.观察其血流动力学、心功能、心律、ST段的,比较两组早期生存率.结果IABP辅助时间为(57±29)h,患者在应用IABP后,桡动脉压力在早期有所下降(P＜0.01);舒张压上升(P＜0.01);平均动脉压于应用后即可见明显提高,外周阻力明显降低.心律失常的变化于应用IABP后1 h频发室早或室速转为偶发室早,ST段的抬高或降低在30 min～1 h后恢复正常.组Ⅱ患者出现的频发室早或室速于(22±11)h后转为偶发室早,ST段的抬高或降低于(24±10)h后.持续左心功能(CCO)监测结果见组Ⅰ CO、CI于应用IABP后2 h明显恢复,24 h已经恢复到术前水平;组Ⅱ于24 h才有所恢复.组Ⅰ早期生存率为80.3%,与组Ⅱ(64.7%)比较P＜0.01.结论IABP能够有效地控制瓣膜病合并巨大左心室患者术后室性心律失常的发生,使心功能得到了有效的支持,大大降低了早期死亡率.     

体外HCN2转染脂肪干细胞构建起搏细胞的实验研究

目的:体外HCN2基因转染人脂肪干细胞(Adipose-derived stem cells,ADSCs)构建起搏细胞.方法:取人脂肪组织分离得到脂肪干细胞并进行体外培养,Ad.HCN2转染后检测HCN2表达情况,检测转染后ADSCs自主产生起搏电流(pacemaker current,If)的能力.结果:RT-PCR结果显示实验组HCN2基因表达.Western-blot可检测到实验组HCN2蛋白表达.流式细胞仪检测可见实验组HCN2阳性比例明显升高.免疫荧光检测可见转染的ADSCs发出红色荧光.膜片钳可记录到起搏电流,其激活电位约为-60 mV,完全激活电位140mV,呈电压依赖性.结论:ADSCs被Ad.HCN2转染后可表达目的基因HCN2,并自主产生起搏电流.     

肥厚预刺激对苯肾上腺素诱导的心肌细胞肥大的保护作用

目的:研究不同肥厚预刺激对苯肾上腺素(Phenylephrine,PE)诱导的心肌细胞肥大的影响。方法:胶原酶联合差速贴壁法分离培养原代SD乳鼠心肌细胞后分组:(1)对照组(常规培养48 h);(2)PE组(50μM PE刺激48 h);(3)不同预刺激+PE组:A,不同浓度的PE(10、20、50μM)预刺激(12 h干预,12 h常规培养);B,PE(50μM)预刺激不同时间(period-1,6 h干预,6 h常规培养;period-2,6 h干预,6 h常规培养,再次6 h干预,6 h常规培养;period-3,8 h干预,8 h常规培养;period-4,12 h干预,12 h常规培养)。预刺激后再用PE(50μM)刺激48 h。经细胞骨架蛋白(α-actining)免疫荧光染色,利用激光共聚焦显微镜观察细胞表型,Image J软件计算心肌细胞表面积,利用实时定量PCR检测肥厚相关标志物表达水平。结果:分离的心肌细胞纯度在90%以上。PE组较对照组心肌细胞明显肥大,细胞表面积增加2.3倍,心肌肥厚标记基因心钠肽(atrial natriuretic peptide,ANP)、脑钠肽(brain natriuretic peptide,BNP)和β肌球蛋白重链(βmyosin heavy chain,βMHC)表达明显升高(P0.05);而不同预刺激+PE组心肌细胞肥大表型明显缓解,其中PE(50μM)两次6 h预刺激最为显著(P0.05)。结论:肥厚预刺激可以减轻PE诱导的心肌细胞肥大的程度,从而对心肌肥厚有保护作用。     

羊心乳头肌附着部或其上部局部心肌坏死对二尖瓣关闭功能影响的实验研究

作者通过制造羊心乳头肌附着部心壁或其上部的局部心肌坏死模型,采用两维、三维心脏超声观察乳头肌、心肌的活动状态,二尖瓣的关闭功能以及心功能的变化,模拟了两种不同部位的心肌坏死对二尖瓣关闭功能和心肌功能的影响,为临床外科处理提出了自己的观点。     

实验动物心肌梗塞模型的建立和染色方法的改进

介绍了如何建立可靠稳定的心肌梗塞动物模型.通过应用常规病理苏木素-伊红(H.E)染色及改进的碱性复红-苦味酸(HBFP)组织化学染色,结果表明,在建立实验动物心肌梗塞模型时,操作规范、及时取材制片、选用改进的染色液和染色时间流程,即可证明心肌梗塞的发生.