灰葡萄孢菌（Botrytis cinerea）基因组中T-DNA整合模式分析

摘要：【目的】研究灰葡萄孢菌（Botrytis cinerea）基因组中T-DNA插入位点的整合模式特征。【方法】利用农杆菌（Agrobactirium tumfacience）介导法构建灰葡萄孢菌T-DNA插入突变体库。利用热不对称交错PCR（TAIL-PCR）技术对转化子中T-DNA的旁侧序列进行扩增和克隆,对获得的旁侧序列进行比对分析。【结果】T-DNA插入在灰葡萄孢菌基因组非编码区的占69%,插入在外显子的占30%。T-DNA在插入的过程中发生了碱基缺失、增加等重组现象,其中左边界（left border,LB）整合到基因组碱基缺失较少,有的保持完整,而右边界（right border,RB）及其近邻的T-DNA区域缺失碱基较多。T-DNA的插入位点还发现有额外的序列插入。【结论】对灰葡萄孢菌中插入T-DNA的整合模式的分析为开展该菌的功能基因组学奠定了基础。     

小G蛋白在植物抗病性中的作用(英文)

小G蛋白一类是低分子量GTP结合蛋白,其分子量大约20～30 kDa。小G蛋白作为重要的分子开关参与了细胞许多重要生理信号途径的调控。近几年在植物中的研究、尤其是对模式植物水稻抗病分子机制的研究发现,Rho家族的小G蛋白在植物抗病信号传导途径的调控中起了关键的作用。本文对植物特有的Rho家族小G蛋白在植物免疫反应中的最新研究进展进行了综述。     

高等植物端粒和端粒酶的研究进展

端粒是构成真核生物线状染色体末端重要的DNA-蛋白质复合结构,DNA由简单的串联重复序列组成。它的合成由一个特殊的具有反转录活性的核糖核蛋白-端粒酶完成。端粒对染色体、整个生物基因组,甚至对细胞的稳定都具有重要意义。本文就植物端粒、端粒酶、端粒结合蛋白,以及端粒变化、端粒酶在植物生长发育中的调节作一概述。     

热稳定型α-半乳糖苷酶的应用及基因工程研究进展

α-半乳糖苷酶是一种水解酶,可以将食品、饲料中的不良寡糖等抗营养因子水解,改变其营养成分并被动物吸收利用。该酶广泛存在于植物、动物及微生物中,在饲料、食品等工业以及现代医学中都有应用。目前,开发热稳定的α-半乳糖苷酶并利用基因工程方法进行分子改造和外源表达已成为研究热点。本文对近年来热稳定的α-半乳糖苷酶的应用和基因工程研究进展进行综述。     

专业素质与法律素养融合教育的探索——以“微生物学”课程为例

高校是培养高素质创新创业人才的基地,大学生的法律素养成为高校素质教育的重要组成部分。培养大学生法制观念和法律意识,需要多渠道、多层次、多模式地渗透到专业课程的教学中。微生物学是一门涉及法律法规较多的学科,在微生物学的教学过程中,采用生动的语言、真实的案例和情境讨论将相关法律法规渗透于专业知识中,使学生对日常生活及专业相关的法律法规产生具体形象的认识;基于考核方法改革,引导学生设计微生物产品并撰写项目可行性报告,全面考虑产品及行业相关法律法规,提高项目执行力;结合实习、实践活动,了解企业运行法律法规框架,从企业可持续发展的高度认识法律法规的重要性。促使学生从自身实际出发,思考并运用法律法规为自己的人生规划服务,切实有效地推动大学生的综合素质教育,为创新创业人才培养奠定坚实的基础。     

小G蛋白在植物抗病性中的作用

小G蛋白一类是低分子量GTP结合蛋白,其分子量大约20～30 kDa.小G蛋白作为重要的分子开关参与了细胞许多重要生理信号途径的调控.近几年在植物中的研究、尤其是对模式植物水稻杭病分子机制的研究发现,Rho家族的小G蛋白在植物抗病信号传导途径的调控中起了关健的作用.本文对植物特有的Rho家族小G蛋白在植物免疫反应中的最...     

紫花苜蓿种子对逆境贮藏条件的反应

以陇东紫花苜蓿 (MedicagosativaL .cv .“Longdong”)种子为材料 ,在室温、35℃和 35℃ +10 %的种子含水量 (SMC) 3种贮藏、接种或不接种燕麦镰刀菌 (Fusariumavenaceum (Fr.)Sacc .)的条件下 ,1年贮藏期内对各逆境处理的种子每隔 6 0d进行 1次标准发芽试验 ,2 0℃恒温、第 10d统计种子的发芽率和死亡率 ,试验结束时计测种子幼苗的长度和感病率 ;在大田条件下观测各处理种子的出苗率 ,确定催腐 (CD)与各种贮藏条件下的苜蓿种带真菌种类和检出率 .结果表明 ,随着贮藏温度和种子含水量等逆境贮藏条件胁迫的加剧 ,苜蓿种带真菌检出率逐渐增高 ,从室温、35℃条件下的 10 %上升到CD +35℃ +10 %SMC条件下的 2 9% ;抗病性逐渐减弱 ,35℃ +10 %SMC条件下幼苗的感病率和种子死亡率显著 (P <0 .0 5 )高于室温和 35℃下的感病率和种子死亡率 ;室内种子发芽率和田间出苗率逐渐下降 ,35℃ +10 %SMC条件下的种子的发芽率和田间出苗率显著 (P <0 .0 5 )低于在室温和 35℃下的发芽率和田间出苗率 ;幼苗生长受到抑制 ,35℃ +10 %SMC条件下的苗长和根长显著 (P <0 .0 5 )低于在室温和 35℃下的幼苗长度 .随着贮藏时间的延长 ,种子真菌检出率和田间出苗率下降 ,幼苗感病率增加 .与未接种的对照相比 ,接种燕麦镰刀菌的种子     

农杆菌介导的灰葡萄孢T-DNA插入突变体库构建及插入位点分析

【目的】利用农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)介导法对灰葡萄孢(Botrytis cinerea)进行转化,构建T-DNA插入突变体库,为从分子水平上认识灰葡萄孢的致病机制打下基础。【方法】以含有pCAMBIA 1390双元载体的农杆菌对灰葡萄孢进行转化,利用潮霉素进行筛选。对抗性稳定的转化子进行生物学和形态学观察,采用离体番茄叶片进行致病性测定。利用TAIL-PCR技术对突变体中T-DNA的旁侧序列进行克隆。【结果】得到了一些突变体,表现为生长速率减缓、产孢能力下降、致病力减弱等。克隆并分析了其中一个突变体中T-DNA插入的位置和旁侧序列。【结论】本实验建立了农杆菌介导的灰葡萄孢转化体系,构建了T-DNA插入的灰葡萄孢突变体库。用TAIL-PCR进行突变体中T-DNA旁侧序列的分析是可行的。     

丝状真菌胞吐体的研究进展

胞吐体(Exocyst)是真核生物细胞内由8个亚基组成的复合体,在后高尔基体产生的分泌囊泡与细胞膜特定位置的定向与拴系过程中发挥重要作用。一些小G蛋白通过直接与胞吐体的亚基相互作用,对极性胞外分泌进行精确的时空调节。丝状真菌的生长是通过菌丝顶端的极性生长来完成的,并且具有极强的分泌蛋白质能力,是研究胞吐体的理想系统。胞吐体对丝状真菌的形态发生和致病性都有极大的影响。本文综述了当前在丝状真菌中胞吐体的研究进展,包括它的组成、亚基定位、相关功能和调控。     

基因组重排技术在酵母菌育种中的应用

基因组重排(genome shuffling)技术是在传统诱变育种的基础上与细胞原生质体融合技术相结合一种新兴微生物菌种改良手段,由于该技术高效的正向突变效率和频率,近年来被广泛应用于酵母菌种的选育和改良。本文主要对基因组重排技术在酵母菌育种中的应用进行了综述。