青、草、鲢、镰四大家鱼的血红蛋白和红细胞乳酸脱氢酶同工酶分析

过去对物种的分类一般沿用形态特征的比 较分类法。随着生物学中各种新技术的应用及 各学科间的相互渗透,用生物化学等方法来鉴 别物种的特异性和它们在进化上的亲缘关系已 日益多见［[1,73。特别是对某些基因的特定产物 — 一些特异性蛋白和酶有了可靠的鉴别方 法,所以它们已被用于鉴别生物遗传特征或器 官特异性的标记［s10     

In vitro Oocyte Maturation in the Zebrafish Brachydanio rerio and Fertilization and Development of the Mature Egg

Maturation process of zebrafish oocyte was investigated using in vitro incubation.In medium EM-199 containing 0.5 μg/ml of 17α-hydroxyprogesterone incubated under 80％ O_2 and at 25°C,germinal vesicles(GV)of oocytes in stage Ⅳ migrated from midway between the center and theperiphery ofoocytes to the periphery in 40 minutes and the oocytes went into stage V.Half an hourlater,the oocytes underwent germinel vesicle breakdown(GVBD)with a breakdown rate of 59％.Two more hours were needed for such oocytes to complete their final maturation.The mature eggscould not come off from the follicle layer surrounding them by themselves(ovulation).By removingthe follicle and adding active sperms for insemination,we could make the mature eggs fertilized.Thechorion was elevated and blastoderm formed on the animal pole.The cleavage and development ofthese fertilized eggs followed the same course as the naturally matured and fertilized eggs.Usingblastula formation as a marker of successful fertilization of the in vitro matured egg,the fertilizationrate was 78％.This is the first report on the successful in vitro incubation of mature oocytes inzebrafish.The establishment of this in vitro oocyte maturation technology has laid the foundationfor further investigation of the transfer of foreign genes in the germinal vesicles of oocytes.     

基因在哺乳动物细胞内的转移

Ⅰ引言 在每次受精过程中均存在着将基因从一个有机体转移到另一个有机体的情况,其结果便产生了一些遗传物质的新的特殊组合。     

《生物工程讲座》(Ⅴ)——细胞工程(一)细胞工程概述

当今,在世界上各科学技术发达的国家内,不论是政府、科技界或一般人士均关注着“生物工程”的发展及其可能为人类谋取的巨大福利。这是因为目前生物科学和工程技术的发展,已使它们之间能在非常精密而有效的基础上结合在一起,为人类创造新的物质财富。在过去的年代里,人类社会借助于科学技术的发展,把它们的成果转化为生产力,成为人类创造生活资料和其它财富的源泉。因此把科学研究中基     

抗冻蛋白的生物化学与抗冻作用机制

生物的抗冻作用已引起人们的广泛注意,海洋鱼类血液中含有Nacl和少量的Ca~+、K~+、尿素、糖和游离氨基酸而略微降低体液的冰点,但南北极严寒地区的海洋鱼类则主要依靠血液内所含的抗冻蛋白降低体液的冰点,减少冰晶的生长速度,以防止因体液冻结而致死。     

草鱼和鲤鱼线粒体 DNA 的分离纯化及其 COI 基因的分子克隆

本文报道配合使用差速离心和DNaseI核酸酶处理等步骤,从草鱼和鲤鱼新鲜肝组织分离线粒体DNA(mtDNA)的实验方法。这种方法经济简便,纯化的mtDNA产率多,纯度高,经限制性内切酶消化后进行琼脂糖凝胶电泳分离,可以得到清晰的DNA片段谱带,并可直接用于构建酶切图谱和线粒体基因的分子克隆。用这样的mtDNA,我们已克隆了草鱼和鲤鱼的细胞色素氧化酶亚基I基因(COI基因)。     

金鱼卵母细胞发育过程中环孔片层的电镜观察

本文研究了环孔片层在金鱼卵母细胞发育过程中的一些形态变化。描述卵母细胞发育的五个阶段中每个阶段环礼片层的分布以及排列的情况。结果表明随着卵母细胞的生长,环孔片层的出现率和每束中片层的数目都逐渐增加。除了在卵原细胞以外,环礼片层一般都分布在远离细胞核的卵质中。尚观察到孔结合物质和片层间物质与多核蛋白体有联系。我们从观察结果推测金鱼卵母细胞的环孔片层可能是由粗面内质网衍生而成。     

淡水瓦氏雅罗鱼基因文库的构建和抗冻蛋白基因同源序列的筛选

极地海域中的鱼类非常耐寒。它们的血液里常含有两种能降低其体内冰点的蛋白质：抗冻糖蛋白（ＡＦＧＰ）和不含糖的抗冻蛋白或抗冻多肽（ＡＦＰ）。这些蛋白的编码基因已经被克隆,并将黄盖鲽ＡＦＰ导入虹鳟鱼和大西洋鲑鱼,而改变了它们的抗冻性能。为开展中国的抗冻转基因鱼研究,本项目对中国北方的耐寒淡水鱼的抗冻基因进行了分离研究。所用实验材料鱼为中国内蒙古北部生活的瓦氏雅罗鱼（Ｌｅｕｃｉｓｃｕｓｗａｌｅｃｋｉｉ）,属鲤形目（Ｌｙｐｃｉｎｉｆｏｒｍｅｓ）,鲤科（Ｌｙｐｒｉｎｉｄａｅ）,雅罗鱼亚科（Ｌｅｕｃｉｓｉｎａｅ）。基本按标准方法构建瓦氏雅罗鱼的基因文库,只在包装反应至３０分钟时,再加一份ＢＨＢ２６９０制备物,并延长３０分钟反应时间。所得文库的成斑率大于１×１０５ｐｆｕ。已知ＡＦＰ基因常常多至４０个拷贝,故已够用。采用通用的原位分子杂交和Ｓｏｕｔｈｅｒｎ分析进行瓦氏雅罗鱼ＡＦＰ基因同源序列的分离及其亚克隆分析。以北美黄盖鲽ＡＦＰ基因片段为探针,从瓦氏雅罗鱼ＤＮＡ文库中筛选了三个阳性克隆。图一所示为其中一个的双份膜及其复筛结果。图二为这个阳性克隆ＤＮＡ经过三种限制酶切后,同时与北美黄盖鲽ＡＦＰ基因片段和该基因０．４ＫｂｃＤＮ     

鱼类细胞核移植的历史回顾与讨论

介绍60年代以来主要是中国在鱼类克隆研究中所获得的实验进展和成果,包括迄今只能在鱼类中得到的,具有发育“全能性”的核质杂种克隆鱼,和早在80年代初中国就已报道过用体细胞核移植所获得的“克隆鱼”,其记录要比“多莉羊”的报道早15年之久。本文还对过去36年中所获得的有关实验结果进行了分析和讨论并试图联系其它“克隆动物“对其发展前景作些探讨。