海洋侧孢短芽孢杆菌Lh-1抗菌活性物质的分离及特性研究

采用超滤、DEAE-Sephadex A25和CM-Sepharose FF离子交换层析及HPLC反相层析等步骤得到了海洋侧孢短芽孢杆菌(Brevibacillus laterosporus)Lh-1的抗菌活性物质,命名为R-1。HPLC纯化出的抗菌物质经质谱测定其分子量为1608.023Da,BIO-RAD等电聚焦测得其pI为8.55,氨基酸分析表明该物质由Leu、Tyr、Val、Ile、Lys、Gly、Met、Ser、Ala9种氨基酸组成。该抗菌物质具有极强的耐热、耐酸碱特性,在pH11.0~12.0条件下,121℃处理1h,其活力保持在75%以上。经3种蛋白酶(碱性蛋白酶、胰酶、胃蛋白酶)处理后,活性保持在80%以上。茚三酮反应阳性。推测R-1可能是低分子量的脂肽。抑菌试验表明对食品腐败菌、致病性革兰氏阴性、阳性菌及少数真菌均有抑菌活性。     

海洋微生物溶菌酶的纯化与性质研究

海洋微生物溶菌酶发酵上清液经超滤、CM-SepharoseFF阳离子交换层析和SephadexG-10 0凝胶过滤层析纯化得到电泳纯的溶菌酶,纯化倍数为34.7,活力回收为24.1%。对纯化溶菌酶性质研究表明,该酶分子量约为39kD ,对溶壁微球菌的最适作用温度为35℃,最适作用pH为8 0 ,在5 0℃以下和pH 5 0～10 0之间都有较好的稳定性,与常见金属离子和化学试剂有良好的配伍性,广谱杀菌,对多种致病菌也有较强的溶菌作用。     

海洋细菌QD80低温碱性蛋白酶的基因克隆和性质

对海洋细菌QD80所产低温碱性蛋白酶进行了基因克隆和序列分析,对此酶的性质进行了初步研究.此酶基因开放阅读框架为1377bp,分子量为49.9kD.此序列上游-8bp处为该基因的SD序列,-10区和-35区分别有5′TAGAAT3′和5′TTGACC3′的保守序列.该酶最适pH为9.5,最适反应温度为30℃,在10℃酶活力仍能保持30%以上.该酶对氧化剂H2O2的抗氧化作用明显,浓度达到4gL时酶活仍保留85%.该蛋白酶的低温适应性和抗氧化特性将对其在低温洗涤领域的应用提供广泛的潜在应用价值.     

超嗜热羧酸酯酶的性质和应用研究

摘要 来源于超嗜热菌的超嗜热羧酸酯酶,结构上与激素敏感性脂肪酶(HSL)家族近似,属于α/β-水解酶,但是其空间结构比HSL更加紧密而有韧性,具有很强的热稳定性。性质研究表明,温度和有机溶剂对超嗜热羧酸酯酶的活性和对映选择性影响显著;其最适底物一般是对硝基苯酯,部分酯酶的基因含有GGGX基序,能够水解叔醇酯结构。由于超嗜热羧酸酯酶的独特结构和性质,其应用潜力巨大,尤其在拆分手性的外消旋酯方面独具优势。     

海洋侧孢短芽孢杆菌Brevibacillus laterosporus Lh-1 产抗菌肽R-1的培养条件优化

采用Plackett-Burman(PB)设计和响应面分析(RSM)方法, 对一株海洋侧孢短芽孢杆菌Lh-1产抗菌肽R-1的发酵条件进行了优化。研究中数据的统计和分析均使用MINITAB 15.0。在研究中, 首先使用了Plackett-Burman (PB)设计对影响Lh-1产抗菌肽的15个因素进行了筛选, 得到了影响产量的显著因素为：葡萄糖、蛋白胨和氯化钙。在此基础上采用响应面法对该3个显著因素的最佳水平范围进行研究, 得到的最佳浓度为 15.72 g/L 葡萄糖、6.01 g/L 蛋白胨和3.29     

预防性应用不同剂量羟考酮对腹腔镜胆囊手术拔管期应激反应的影响

目的:探讨预防性应用不同剂量羟考酮对腹腔镜胆囊手术(laparoscopic cholecystectomy,LC)拔管期应激反应的影响。方法:将75例接受LC的患者随机分为低、中、高剂量组,每组均25例。术毕15 min,低、中、高剂量组分别预防性静脉注射盐酸羟考酮0.1 mg/kg、0.15 mg/kg、0.2 mg/kg。比较各组拔管前(T_1)、拔管时(T_2)、拔管后5 min(T_3)、拔管后10 min(T_4)、拔管后30 min(T_5)血流动力学改变、麻醉苏醒时间、拔管情况及不良反应的发生情况。结果:与T_1时刻比较,各组T_2时刻收缩压(systolic blood pressure,SBP)、舒张压(diastolic blood pressure,DBP)、心率(heart rate,HR)均明显升高(P0.05),但中、高剂量组T_3时刻后SBP、DBP、HR均显著下降,恢复至T_1时刻水平(P0.05),各指标水平明显低于低剂量组(P0.05)。中剂量组与高剂量组各指标比较差异均无统计学意义(P0.05)。随着剂量羟考酮的增加,患者苏醒时间、拔管时间逐渐延长(P0.05);中、高剂量组拔管质量评分显著低于低剂量组(P0.05),而中、高剂量组间拔管质量评分比较差异无显著性(P0.05)。高剂量组恶心呕吐、呼吸抑制的发生率明显高于低剂量组,中、高剂量组追加镇痛药物的比例明显低于低剂量组(P0.05)。结论:预防性使用羟考酮可不同程度抑制LC术后拔管期应激反应,0.15 mg/kg羟考酮能够更好地维持患者血流动力学的稳定,促进患者早期苏醒,且安全性较高。     

全凭静脉麻醉对腔镜下甲状腺手术的苏醒躁动及术后镇痛效果的影响

目的:探讨全凭静脉麻醉(TIVA)对腔镜下甲状腺手术的苏醒躁动及术后镇痛效果的影响。方法:将74例接受腔镜下甲状腺手术的患者随机分为TIVA组与静吸复合麻醉(VICA)组,每组各37例。比较两组诱导麻醉前(T0)、切皮后1 min(T1)、手术开始后30 min(T3)、手术结束时(T3)及术后30 min(T4)血糖(GLU)、血清皮质醇(COR)、白介素(IL-6)水平的变化、麻醉药物用量、术后自主呼吸恢复时间、苏醒时间、拔管时间、苏醒期躁动及术后镇痛效果。结果:T1时刻,两组GLU、COR、IL-6水平均呈现出不同程度升高,而TIVA组T1~T4时刻各指标均较VICA组明显降低(P0.05)。与VICA组比较,TIVA组丙泊酚的术中使用量显著减少,术后自主呼吸恢复时间、苏醒时间及拔管时间均显著缩短(P0.05),苏醒期躁动的发生率及躁动程度均较VICA组明显降低(P0.05),术后12、24 h切口疼痛的VAS评分均明显高于VICA组(P0.05)。结论:TIVA应用于腔镜下甲状腺手术可减少机体的应激反应和全麻药剂量,改善苏醒期质量,但应根据患者的疼痛感受采取必要的镇痛措施。     

低温碱性蛋白酶QDAPr的生物信息学分析及同源模建

对一株来自黄海的假单胞杆菌QD80所产的碱性蛋白酶QDAPr进行了生物信息学分析,并用生物信息学软件对其空间结构进行了模拟,同时对模建结果进行了结构质量的分析和检测。最后对模建的结果进行了初步的实验验证。结果表明：该碱性蛋白酶的等电点为8．52,外源性氨基酸为32．9％,二级结构中α螺旋占5．88％,β折叠片占14．6％,与铜绿假单胞菌的碱性蛋白酶的同源性为76％。三维结构检测表明此模型的结构符合立体化学和生物学功能。同源性分析表明该模建模型含有HEXXHXUGUXH的基元（motif）,通过BrAc修饰实验初步验证了活性中心的功能。     

Bohaisea-9145海洋低温碱性脂肪酶研究

从 2 0 0 0多份渤海海区海水海泥样品中分离获得一株新型脂肪酶高产菌株BohaiSea 914 5 ,经鉴定为适冷性海洋酵母 (Yarrowialipolytica)。菌株在以豆饼粉、棉籽饼粉和花生粕作为碳氮源并添加 0 5 %花生油的培养基中能较好地生长产酶 ,最适产酶温度 2 6± 1℃ ,产酶周期为 2 3h。所得脂肪酶的最适反应温度为 35℃ ,最适pH 8 5 ,pH4 0～ 9 0范围内稳定 ,热稳定性差。该酶与常见金属离子和化学试剂的配伍性较好 ,受表面活性剂SDS的激活 ,且具有良好的耐盐及抗氧化特性 ,是一种新型的海洋低温碱性脂肪酶 ,在洗涤剂行业特别是冷洗行业中具有良好的应用前景