间充质干细胞长期传代培养条件的研究

间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)是存在于成体组织间质部分的多能前体细胞,在体外具有自我更新增殖及向成脂、成骨、成软骨分化的潜能,在组织工程和细胞治疗方面具有广阔的应用前景。MSCs在体外长期培养获得足够数量的细胞是MSCs应用的一个重要因素。然而,目前还没有建立MSCs长期传代培养的最适培养体系。该文分别从培养体系中的基础培养基、血清和生长因子对于MSCs细胞长期传代培养的影响进行了论述,旨在为建立MSCs体外长期传代生长的最适培养体系提供理论依据。     

绿洲城市——奎屯市春夏季鸟类群落特征

2007年及2009年3～8月期间,对绿洲城市代表——奎屯市的8类生境(依据其城市功能划分)的鸟类进行了调查。共记录鸟类61种,隶属于9目23科30属。留居型中夏候鸟29种、冬候鸟7种、留鸟24种、旅鸟1种。区系组成:广布型27种、古北型17种、全北型5种、中亚型12种。8类生境的鸟类多样性指数(H’)由大到小依次是:公园>苗圃果园>市区间农田>学校校园>工厂区>交通用地>居民区>商业区。公园的鸟类多样性指数最高,达1.421 2;而商业区的鸟类多样性最低,仅有0.413 7;公园的鸟类均匀度指数最高0.859 7,商业区的鸟类均匀度指数最低,仅0.319 0。以上数据显示:鸟类在城市中的分布极不均匀;在绿洲城市中,区域内鸟类种类数量与其林木覆盖率呈正相关关系。     

Livin shRNA质粒载体的构建及评价

目的:构建有效的Livin shRNA重组质粒.方法:设计、合成Livin shRNA,与pGenesil-1质粒载体链接构建重组质粒,通过酶切电泳、基因测序证实是否正确构建,通过转染高表达Livin的大肠癌HT-29细胞检测Livin mRNA下降水平,筛选出最佳的shRNA.结果:重组质粒pGenesil-shRNA经酶切电泳、基因测序证明寡核苷酸片段成功插入预计位点,且序列与我们设计合成的完全一致;重组质粒载体转染HT-29细胞后,肿瘤细胞Livin mRNA含量较转染前及对照组均有明显的下降(p＜0.01),其中尤以Livin1抑制作用明显,抑制率达到66%.结论:我们正确构建了Livin ShRNA重组质粒,且制备的shRNA能有效抑制Livin基因的表达,为探讨针对Livin基因的RNAi对肿瘤的治疗奠实验基础.     

热带假丝酵母高效利用甘油研究

目的:热带假丝酵母以油脂为底物发酵时会产生副产物甘油,研究对热带假丝酵母gk基因进行过表达,将副产物甘油转化为能量,提高油脂转化利用效率。方法:以热带假丝酵母Candida tropicalis 1798中的甘油激酶(gk)为研究对象,利用PCR技术获得同源臂基因gkpR,通过一步法无缝克隆将同源臂和G418抗性基因(kanr)连接至pPICzαA载体,同时将解脂假丝酵母Candida lipolytica 1457中的启动子基因pGAP无缝连接至载体中的gkpR,构成质粒pPICzαA-gkp,并电转化至C.tropicalis 1798感受态细胞中,通过一次同源单交换,将启动子pGK替换为pGAP。结果:经过G418抗性筛选和PCR鉴定,成功获得pGAP基因替换菌株C.tropicalis 1798-gkPr;发酵验证结果显示,启动子基因替换C.tropicalis 1798在以甘油为底物培养时重组菌OD600值比野生型菌株高46.4%,重组菌培养基中甘油剩余量比野生菌降低56.1%,表明启动子替换能促进C.tropicalis1798对甘油的吸收利用。此外,以油脂为底物进行发酵实验时还发现重组菌产长链二元酸的量比野生菌提高32.7%。结论:通过启动子替换手段构建的重组菌C.tropicalis 1798-gkPr,提高了热带假丝酵母对油脂组分中甘油成分的利用效率。     

Nicorandil对心肌细胞静息状态及缺氧后复氧时细胞内游离钙的影响

大量实验显示Ｎｉｃｏｒａｎｄｉｌ有明显抗缺血再灌注损伤的作用。细胞内钙超载是心肌缺血再灌注损伤的主要发生机理之一,本研究旨在研究Ｎｉｃｏｒａｎｄｉｌ对静息状态下心肌细胞内Ｃａ２＋的动态作用及对缺氧后复氧时细胞内Ｃａ２＋的影响。１材料及方法１．１细胞培...     

体外循环预充还原型谷胱甘肽对心脏瓣膜置换术患者的临床研究

摘要 目的：观察体外循环（CPB）预充还原型谷胱甘肽（GSH）对心脏瓣膜置换术患者心肌损伤指标和炎症因子指标的影响。方法：选择2020年10月到2021年10月期间于我院行心脏瓣膜置换术治疗的180例患者。以随机数字表法分为对照组和研究组,均为90例。研究组患者CPB预充GSH 1200 mg,对照组患者预充等量氯化钠注射液。观察两组患者围术期指标、心肌损伤指标[肌酸激酶（CK）、乳酸脱氢酶（LDH）、肌钙蛋白Ⅰ（cTnⅠ）、肌红蛋白（Mb）]、炎症因子指标[肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白介素-6（IL-6）]变化,并记录两组并发症发生情况。结果：研究组术中转流时间、呼吸机使用时间、ICU留置时间、术后多巴胺使用天数短于对照组,术后多巴胺使用总量少于对照组（P<0.05）。主动脉开放后2 h、12 h、24 h,两组CK、LDH、cTnⅠ、Mb水平均升高后下降（P<0.05）,且研究组CK、LDH、cTnⅠ、Mb水平低于对照组（P<0.05）。主动脉开放后2 h、12 h、24 h,两组IL-6、TNF-α水平均升高后下降（P<0.05）,且研究组IL-6、TNF-α水平低于对照组（P<0.05）。研究组的并发症发生率低于对照组（P<0.05）。结论：CPB预充GSH可减轻心脏瓣膜置换术患者心肌损伤,有效控制炎症反应,同时还可降低并发症发生率,缩短呼吸机使用时间、术中转流时间、ICU留置时间、术后多巴胺使用天数,减少术后多巴胺使用总量,效果显著。     

羊源丁酸梭菌HDRyYB1发酵工艺的优化

【目的】目前,国内外鲜有关于羊源丁酸梭菌的报道。本课题选用羊源丁酸梭菌HDRy YB1为研究对象,对其发酵工艺进行优化,为该菌株作为饲料添加剂应用于畜牧业生产奠定基础。【方法】采用Plackett-Burman(PB)试验设计法和响应面法分析并优化显著影响HDRy YB1菌株发酵液中芽胞数的培养基成分。【结果】发酵培养基中的面粉浓度、鱼粉浓度和米粉浓度显著影响发酵液中的芽胞数,优化后的发酵培养基组分(质量体积比)为:面粉3.72%、鱼粉0.90%、米粉3.96%、酵母粉0.60%、Na Cl 0.19%、Mg SO4·7H2O 0.19%、KH2PO4 0.01%、Na HCO3 0.01%、Ca CO3 0.48%;培养参数为:37°C,初始p H为7.2-7.4,瓶装量100/250,接种量3%。在此条件下,HDRy YB1菌株发酵完全(18 h)的芽胞数为1.478×108 CFU/m L,是优化前的2.7倍。【结论】HDRy YB1菌株发酵培养基得到了优化,优化后的培养基可用于后期的扩大发酵试验,验证其在实践生产中的应用价值。     

饲喂外源性DNA对小鼠体内LPO和Lf生成的影响

目的：探讨外源性DNA对体内LPO和Lf生成的影响。方法：分别用外源性DNA和VE定时定量喂养小鼠,测定和比较小鼠体内LPO、Lf含量变化。结果：外源性DNA与VE一样,有效地降低了小鼠体内LPO、Lf含量,对肝、心脏的作用较对脑组织明显,高剂量DNA抑制效果强于低剂量DNA。结论：外源性DNA具有抗氧化剂的作用,对动物体内LPO、Lf的生成有明显抑制作用。     

猪特异性脂肪细胞膜蛋白基因cDNA 5′端的分子克隆

猪特异性脂肪细胞膜蛋白是近年来才被报道的一种可能与前脂肪细胞生长、发育和脂肪沉积调控有关的蛋白质。采用PT-PCR和PACE技术,首次获得猪特异性脂肪细胞蛋白基因cDNA 5‘端的克隆和序列。