蛋白质相互作用网络进化分析研究进展

近年来,随着高通量实验技术的发展和广泛应用,越来越多可利用的蛋白质相互作用网络数据开始出现．这些数据为进化研究提供了新的视角．从蛋白质、蛋白质相互作用、模体、模块直到整个网络五个层次,综述了近年来蛋白质相互作用网络进化研究领域的主要进展,侧重于探讨蛋白质相互作用、模体、模块直到整个网络对蛋白质进化的约束作用,以及蛋白质相互作用网络不同于随机网络特性的起源和进化等问题．总结了前人工作给学术界的启示,探讨了该领域未来可能的发展方向．     

HBV和HCV的合并感染

乙型肝炎病毒和丙型肝炎病毒合并感染是病毒性肝炎的常见形式。本文就合并感染的流行病学、病毒间相互作用、临床致病、治疗预防等研究进展进行简要综述。     

微丝相关蛋白HSPC300/hHBRK1与肌球蛋白Ⅵ相互作用的鉴定

为鉴定微丝相关蛋白HSPC300/hHBRK1在肝脏组织的功能,采用GST pull-down结合质 谱技术,检测该蛋白在肝脏中的结合蛋白,结果提示,肌球蛋白Ⅵ与HSPC300/hHBRK1共沉降,Western 印迹杂交证实了质谱的结果．构建HSPC300/hHBRK1原核表达载体,诱导并获得了His-hHBRK1融合蛋白．利用免疫共沉淀证实hHBRK1与肌球蛋白Ⅵ存在相互作用,激光共聚焦检测显示hHBRK1与肌球蛋白Ⅵ在肺癌95D细胞的胞浆共定位,提示其相互作用可能是直接结合．肌球蛋白Ⅵ参与细胞迁移、高尔基分泌泡的运输和维持高尔基体稳定性等作用．hHBRK1与肌球蛋白Ⅵ相互作用,为微丝相关蛋白HSPC300/hHBRK1参与细胞迁移和胞内物质运输提供了进一步佐证．     

胰岛素受体底物PH结构域相互作用蛋白结构和功能研究进展

PHIP是一种与胰腺β细胞中胰岛素受体底物（IRS）的PH结构域相互作用的蛋白。根据小鼠PHIP（mPHIP）mRNA翻译的不同起始位点,除全长的PHIP1外,mPHIP基因还编码其他3种不同变异体。在胰岛素诱导的信号途径中,主要分布于细胞核的PHIP1和IRS-1的PH结构域相互作用,介导IRS蛋白酪氨酸的磷酸化。IRS-2和PHIP1的共表达能诱导IRS在细胞膜上的定位,促进葡萄糖转运蛋白4（GLUT4）向细胞质膜的转移。PHIP1的表达能提高β-细胞内细胞周期蛋白D2的表达,促进β细胞的生长。PHIP1的表达活化蛋白激酶B（PKB）,活化的PKB能明显抑制β细胞的凋亡。PHIP与胰岛素信号传导途径中其他信号分子的相互作用机制尚不明确。     

用FRET方法研究与Mps1蛋白有相互作用的CENP-E蛋白结构域

目的：探索与Mps1蛋白有相互作用的CENP-E蛋白结构域。方法：将重组质粒pEGFP-CENPE2（674~1085位氨基酸）、pEGFP-CENPE3（1200~2134位氨基酸）转染人胚肾293(HEK293)细胞,采用受体漂白荧光共振能量转移方法（FRET方法）,检测EGFP-CENPE2、EGFP-CENPE3和Mps1间的能量转移率(Ef), 进一步用免疫共沉淀方法验证FRET的实验结果。结果：重组质粒转染HEK293细胞后经激光共聚焦显微镜观察重组质粒表达的融合蛋白与Mps1都存在着共定位;FRET检测结果显示EGFP-CENPE3和Mps1间的能量转移率为［(12.63±0.48)%, n=30］,pEGFP-CENPE2和Mps1间的能量转移率为［(3.07±0.21)%, n=30］,与对照组［(2.96±0.27)%, n=30］比较pEGFP-CENPE3和Mps1间的能量转移率差异存在显著性（p<0.05）,免疫共沉淀实验结果显示EGFP-CENPE3与Mps1蛋白间存在相互作用。结论：FRET技术和免疫共沉淀实验证明了EGFP-CENPE3与Mps1间存在着相互作用。     

B23 interacts with PES1 and is involved in nucleolar localization of PES1

PES1, the human homolog of zebrafish pescadillo, is a nucleolar protein that is essential for cell proliferation. We report herein that a nucleolar marker protein B23 physically interacts with PES1 and is involved in the nucleolar localization of PES1. In vivo interaction between B23 and PES1 was verified by co-immunopreci- pitation of endogenous B23 and PES1 proteins, and they showed cellular co-localizations under both normal and actinomycin D-induced stress conditions. Furthermore, we mapped their interaction domains via in vitro pull- down assays. When B23 was knocked down by RNA interference, there appeared an increased nucleoplasmic distribution of PES1. Our results support a previous hypothesis that B23 might be a nucleolar hub protein for protein targeting to the nucleolus, and shed light on the nucleolar localization mechanism of PESI. The physical interaction between B23 and PES1 implies that they may participate in ribosome biogenesis in a protein complex.     

绿色荧光蛋白的神奇功能

高通量遗传筛选已经揭示出许多潜在的蛋白质·蛋白质之间的相置作用．但这些作用需要进一步验证和研究。在本文中．研究者为解决这一问题．研发出一种简单的分析方法．它整合了含有绿色荧光蛋白（GFP）荧光影像的酵母双杂交系统的威力．可以直接显示活细胞中蛋白质－蛋白质相互作用。这种方法就是荧光双杂交（F2H）分析．它采用了经过修改的lac阻抑物系统,将一种荧光诱饵蛋白固着在染色体lac操纵子阵列．形成一个亮色斑点．具有不同荧光的诱捕融合蛋白质可根据颜色的变化进行共定位分析。     

科研快讯

《细胞-干细胞》:研究将皮肤细胞"改编"成脑神经细胞美国研究人员首次把普通皮肤细胞"改编"成大脑神经细胞,给治疗阿尔兹海默氏症、帕金森病等大脑神经疾病带来新希望。