冷驯化提高金边卫矛抗寒力期间细胞ATP酶的超微细胞化学定位

采用磷酸铅沉淀的电镜细胞化学方法,对经冷驯化及未经冷驯化的金边卫矛 EuonymusradicansEmorald&Gold. 以及两者在-5℃下处理1d后的叶肉细胞进行了ATPase的超微细胞化学定位的比较观察,并对冷驯化可提高植物抗寒力及ATPase与植物抗寒性关系进行了探讨.标志ATPase活性反应的磷酸铅沉淀物主要分布在叶片栅栏细胞和海绵细胞的质膜和液泡膜上,ATPase在这两类细胞中的分布及活性无明显差异.金边卫矛幼苗经4℃低温驯化7d后,其质膜和液泡膜的ATPase活性高于22℃下生长的幼苗,冷驯化后的金边卫矛幼苗在-5℃处理1d后,其质膜和液泡膜上仍可观察到ATPase的活性反应,但较低温胁迫前有所降低,且超微结构完整,未见任何伤害.而未经冷驯化的金边卫矛幼苗在-5℃处理1d后,其质膜和液泡膜上的ATPase完全失活,同时细胞的超微结构受到严重伤害.实验结果表明,冷驯化可提高金边卫矛幼苗ATPase在低温胁迫下的稳定性,这种活性变化与植物抗寒力的提高呈正相关,同时还发现液泡膜ATPase活性较质膜ATPase变化幅度大,推测液泡膜可能较质膜ATPase对低温更为敏感.     

3种芦荟属植物叶的表皮扫描电镜观察及芦荟素含量的测定

以库拉索芦荟、木立芦荟和皂质芦荟为材料,用扫描电镜观察其叶表皮气孔和角质膜的结构,用高效液相色谱法(HPLC)测定了3种芦荟属植物叶中芦荟素的含量。扫描电镜观察结果表明,3种芦荟叶表皮都覆盖有厚的角质膜,气孔下陷,表现出典型的旱生植物特征。但角质膜的纹饰和厚度在不同芦荟间有显着差异。木立芦荟角质膜表面呈瘤状突起,角质膜厚度为5～6μm,库拉索芦荟和皂质芦荟的角质膜表面较平,库拉索芦荟的角质膜厚度为3～4μm,皂质芦荟的角质膜厚度为8～10μm。高效液相色谱法(HPLC)测定结果表明,木立芦荟叶含芦荟素最高,库拉索芦荟叶含量较低,而皂质芦荟叶含量最低。此外,本文还初步探讨了芦荟属植物叶表皮结构与芦荟素含量的关系。     

囊膜病毒膜融合的分子机制

囊膜病毒可能采用相似的病毒-宿主细胞膜融合机制,即病毒表面糖蛋白结合到宿主细胞受体后,启动了病毒融合蛋白的一系列构象变化,根据囊膜蛋白构象变化特征,囊膜病毒可采用两种以上的方式发生膜融合,并据此分为两类：Ⅰ型病毒膜融合和Ⅱ型病毒膜融合.Ⅱ型病毒膜融合以黄病毒为代表,其分子机制与Ⅰ型病毒膜融合不同,但不很清楚.而Ⅰ型病毒膜融合中,如艾滋病毒,流感病毒等,在囊膜蛋白变构形成稳定折叠的发夹三聚体结构时,拉近了两膜之间的距离,此过程释放出来的能量进一步促使两膜融合.膜融合使病毒蛋白及病毒RNA基因组释放到宿主细胞内而感染宿主.以上述研究为基础设计的C肽/N肽小分子抑制子, 可以在病毒糖蛋白中间体构象形成的短时间内,高效、特异地竞争结合其配体,从而阻止糖蛋白的进一步折叠,达到抑制病毒入侵的目的,为病毒疾病的防治提供了新思路和策略.针对艾滋病毒设计的C肽,即T20或Enfuvirtide在临床应用效果很好.以艾滋病毒和流感病毒为例,主要对Ⅰ型病毒膜融合的研究进展进行了讨论.     

两种除草剂对狼毒和棘豆组织结构及膜代谢的影响

研究了自然状况下2种草原毒草狼毒(Stellera chamaejasme)和棘豆(Oxytropis ochrocephala)在除草剂“灭狼毒”和“灭棘豆”作用下组织结构和膜代谢的变化。在适当剂量的药剂处理下,两种除草剂分别对细胞膜系统产生影响．使膜脂过氧化生成MDA;细胞外渗液的电导率增大。“灭狼毒”和“灭棘豆”都可以使狼毒和棘豆叶片栅栏组织排列呈疏松变化趋势．细胞间隙增大．叶肉细胞结构破坏,形成大的空腔;保卫细胞萎缩．气孔下腔增大。这表明,这两种除草剂在各自作用的植物体内部即能破坏植物细胞的膜结构,引起原生质电解液外漏．导致细胞失水,同时还影响植物的运输机能．进而影响植物的结构,最终导致植物的死亡。     

淀粉样蛋白Aβ的插膜作用可以抑制其形成纤维

作为老年性痴呆(AD)患者脑中淀粉样斑块的核心蛋白,β-淀粉样蛋白(Aβ)是从淀粉样前体蛋白(APP)水解而来。该蛋白是多种长度多肽的混合物,其中Aβ40和Aβ42是主要组分。分别研究了膜中胆固醇含量及溶液pH对Aβ40和Aβ42形成纤维的影响。电镜观察发现,含有胆固醇的脂质体几乎可以完全抑制Aβ40的纤维形成,而低pH只能部分地抑制Aβ42的纤维形成。单层膜的实验证明这两种因素都有利于Aβ40和Aβ42的插膜。构象研究表明插膜会诱导Aβ40和Aβ42的二级结构发生不同的变化。结果说明,Aβ40和Aβ42的插膜作用能够在一定程度上抑制蛋白形成纤维,但两者具有不同的抑制机制。     

兔、犬、猴硬脊膜外腔及椎管内置管法

硬脊膜外腔及椎管内用药是目前临床镇痛和麻醉药物的常用施药途径,在镇痛麻醉药物临床前研究中需要对动物施以硬脊膜外与椎管内置管手术以便进行药效与毒性研究。本研究建立一种实用于兔,犬,猴等较大动物的硬脊膜外及蛛网膜下腔的短期（数天）和长期（数月）置管方法。该方法结合临床穿刺和造影术定位,并根据动物的不同种类和差异进行适配和改进。上述置管法应用于虎纹镇痛肽（HWAP－I）的临床前药效和毒理研究,经200多例次兔,犬和猴动物实验证明,这是一种定位准确稳定可靠的置管法。     

温度胁迫下淫羊藿的膜脂过氧化和保护酶活性

采用分光光度法测定了箭叶淫羊藿在不同温度处理后的过氧化物酶（POD）活性,超氧化物歧化酶（SOD）活性及丙二醛（MDA）含量,发现在高温胁迫下POD活性,SOD活性,MDA含量均呈上升趋势,而在低温胁迫下,POD活性,SOD活性下降,而MDA含量在0℃以上低温下降,0℃以下低温又开始上升;在25℃时,POD活性,SOD活性,MDA含量均处于最低水平。     

羧甲基壳聚糖膜对皮肤成纤维细胞相容性研究

通过玻璃流延法制备不同分子质量的壳聚糖及羧甲基壳聚糖膜,以体外培养的人皮肤成纤维细胞作为对象,利用膜的浸渍液培养及膜表面直接培养法研究比较了两种多糖膜的细胞相容性.实验发现两种多糖膜的浸渍液对细胞均无毒性效应,生物安全性是小分子质量膜好于大分子质量膜,羧甲基壳聚糖膜好于壳聚糖膜.皮肤成纤维细胞在壳聚糖膜上的生长受到抑制,生长一段时间后细胞有聚集和脱落现象,而羧甲基壳聚糖膜上细胞能很好地贴附、生长,没有聚集和脱落现象.结果表明羧甲基壳聚糖膜具有比壳聚糖膜更优越的细胞相容性.     

高碱性pH诱导紫膜片层表面结构变化的原子力显微镜直接观测

报道了在高碱性pH下,紫膜中细菌视紫红质(BR)表面结构变化的直观信息.紫外可见光谱实验发现,当pH上升到12.6,BR分子上的生色团视黄醛脱落,分子完全变性;原子力显微镜实验观测到在此pH下,紫膜片层的晶格结构瓦解,BR分子在紫膜上无规则聚集,同时出现非特征“岛屿”结构和特征“岛屿”结构.     

多效唑对盾叶薯蓣叶片活性氧代谢与膜脂过氧化反应的影响

研究了多效唑 (Paclobutrazol,PBZ)对正常生长状况和干旱胁迫下盾叶薯蓣叶片中活性氧代谢与膜脂过氧化反应的影响 ,结果发现多效唑处理的盾叶薯蓣叶片在正常生长状况下超氧物自由基 (O2 )产生速率比对照降低了 14 .5 % ,超氧化物歧化酶 (Superoxide dismutase,SOD)、过氧化氢酶 (Catalase,CAT)、过氧化物酶 (Puaiacolperoxidase,POD)活性分别比对照提高了 35 .9、15 .2和 2 5 .0 % ,丙二醛 (Malondialdehyde,MDA )的含量比对照降低了 4 4 .9% ,可溶性蛋白质和叶绿素含量分别比对照提高了 13.9和 12 .3%。而在干旱胁迫下 ,多效唑处理均显著抑制了 O2 和 MDA的产生 ,SOD、CAT、POD活性的降低以及可溶性蛋白质和叶绿素的降解。