应用CRISPR/Cas9技术创制低直链淀粉含量水稻种质

Wx基因直接控制水稻胚乳直链淀粉的合成,进而影响胶稠度等多个品质指标,是控制稻米食味的主效基因.适当降低稻米的直链淀粉含量可改善稻米品质.吉丰B是籼型优质杂交稻保持系,直链淀粉含量偏高,影响组配后代的食味品质.本研究以吉丰B为试验材料,对Wx基因编码区上游序列进行编辑,以期获得Wx基因表达下调,直链淀粉含量降低的水稻种...     

niaD基因与uidA基因共转化糖化酶高产菌株Aspergillus niger T21

从AspergillusnigerT21分离到自发性的氯酸盐抗性株,再经氮源生长试验获得硝酸盐还原酶缺陷的niaD突变体N44。用含有niaD的质粒pSTA10转化N44,转化频率为5个／μg（转化子／DNA）。转化子的Southern印迹分析表明niaD基因同源整合到N44的染色体DNA中。pSTA10与含葡糖苷酸酶基因（uidA）的质粒pNOM102共转化N44,共转化频率为40％。共转化子的GUS（葡糖苷酸酶）活力测定结果表明uidA基因已在N44中表达。由此可知,以niaD为选择标记,uidA为报告基因,以N44为受体的转化系统可用于丝状真菌启动子功能检测和已知调控序列的功能分析。     

超高忠实性PCR用DNA聚合酶

ＰＣＲ（ＰｏｌｙｍｅｒａｓｅＣｈａｉｎＲｅａｃｔｉｏｎ）法已在生物工程领域得到了广泛的应用,而ＰＣＲ法的推广完全得益于Ｔａｑ耐热性ＤＮＡ聚合酶。近年来,ＰＣＲ法的应用除生物工程领域外,已应用至工业、农业、医学、制药等与人们生活息息相关的各个领域。随着ＰＣＲ法的不断推广,人们对ＤＮＡ聚合酶的忠实性（Ｆｉｄｅｌｉｔｙ）要求越来越高,一般来说,ＴａｑＤＮＡ聚合酶在进行ＰＣＲ延伸反应过程中的错配率为０．５％左右。ＴａＫａＲａ公司独自研制成功的ＰｙｒｏｂｅｓｔＤＮＡ聚合酶是一种来源于Ｐｙｒｏｃｏｃｃｕｓｓ…     

杭州西湖水体中微生物生理群生态分布的初步研究

１９９５－０４～１９９６－０４对杭州西湖水体中微生物生理群生态分布的研究结果表明：①好气性异养型细菌平均达２．０６×１０３个／ｍｌ。放线菌、霉菌、酵母菌的量较少,分别为３５个／ｍｌ、２４个／ｍｌ和２个／ｍｌ。②从大肠菌群指数来看,西湖水体还受着生活污水的污染,其中岳湖和西里湖污染程度还相当严重。③纤维素分解菌平均为２５个／ｍｌ,氨氧化细菌为４５３个／ｍｌ,亚硝酸氧化细菌５８５个／ｍｌ,硝酸还原菌３．２×１０３个／ｍｌ,脱氮菌４３个／ｍｌ,有机磷分解菌８个／ｍｌ。④纤维素分解菌、氨化细菌、氨氧化细菌、硝酸还原菌在夏季较少,冬季反而较多,它们与温度的相关系数分别为－０．５４６７＊＊,－０．４５０６＊,－０．４３６８＊和－０．４５０２＊;而亚硝酸氧化菌和脱氮菌与温度的相关关系不明显。⑤自养型的硝化细菌在水质较好的小南湖、北里湖分布广泛,而异养型微生物在富营养化严重的岳湖、西里湖密度较大。⑥假单胞菌属（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ）、芽胞杆菌属（Ｂａｃｉｌｕｓ）、肠细菌科（Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒｉａｃｅａｅ）是西湖水体中的优势菌群。     

原位杂交检测大鼠前庭代偿中GAP-43 mRNA水平

用DIG标记的GAP-43 cDNA为探针,以大鼠海马切片作阳性对照,使用原位杂交方法检测了大鼠迷路损毁5、12、20和30 d后前庭核区GAP-43 mRNA水平的变化.结果表明,迷路损毁后前庭核区mRNA水平升高.原位杂交的应用,为前庭代偿中轴突发芽,突触重组的神经可塑性研究打下了方法学基础.     

细胞氧化损伤时8-羟基鸟嘌呤的测定

利用H₂O₂易通过细胞膜而到达核这一特点,初步探讨了不同浓度H₂O₂对HL-60细胞DNA的氧化损伤程度.发现H₂O₂浓度在0.4 mmol/L以上时,作用8～24 h可以用气相色谱/火焰离子检测器(GC/FID)检测到氧化损伤标志产物——8-羟基鸟嘌呤(8-oh-G),并观测到在0.4～0.8 mmol/L H₂O₂作用一定时间时,8-羟基鸟嘌呤含量随H₂O₂浓度升高而升高.     

大熊猫犬瘟热病毒融合蛋白基因3′端的序列测定

从死亡大熊猫的肝脏中直接提取细胞总ＲＮＡ,经反转录后,用犬瘟热病毒的两对引物,分两段扩增出融合蛋白基因３′端的片段。经序列分析表明：此片段的长度为６９３ｂｐ;此毒株在核苷酸和氨基酸水平与某疫苗弱毒株、Ｏｎｄｅｒｓｔｅｐｏｏｒｔ弱毒株、海豹瘟热病毒２型毒株和海豹瘟热病毒１型的同源性分别为９７．５％和９６．２％、８８．６％和９４．５％、９２．９％和９５．６％、６３．２％和７６．５％;大熊猫毒株与其它毒株融合蛋白３′端疏水性和二级结构均有一定差异;其非编码区比国外报道的Ｏｎｄｅｒｓｔｅｐｏｏｒｔ弱毒株多９个碱基,在非编码区最后５８个碱基,两毒株仅有１７个相同。至于这种差异的生物学意义尚待进一步的研究     

阿勒泰山蝴蝶种类调查及其垂直分布的研究

对阿勒泰山南坡中国境内的蝴蝶进行了采集调查,共鉴定整理出７科、６１属、１００余种。其中凤蝶科１属１种,绢蝶科１属６种,粉蝶科８属２２种,眼蝶科１６属２３种,蛱蝶科１６属３２种,灰蝶科１２属１５种,弄蝶科７属１０种。分析了这些种类的垂直分布特点,将其划分为４个垂直分布带,即低山半荒漠带、山地灌木草地带、山地森林草原带和亚高山草原－草甸草原－高山垫状植被带。     

越鞠保和丸联合穴位埋线对肝胃不和型功能性消化不良患者胃动力指标、血清胃肠激素和胃蛋白酶原的影响

目的：探讨越鞠保和丸联合穴位埋线对肝胃不和型功能性消化不良（FD）患者胃动力指标、血清胃肠激素和胃蛋白酶原的影响。方法：采用随机数字表法将2020年6月～2023年6月期间北京市鼓楼中医医院收治的123例FD患者分为对照组（61例）和研究组（62例）。对照组接受常规治疗联合穴位埋线治疗,研究组在对照组的基础上结合越鞠保和丸治疗。对比两组疗效、中医证候积分、胃动力指标、胃肠激素指标和胃蛋白酶原指标。结果：研究组的临床总有效率高于对照组（P<0.05）。治疗后研究组主症、次症、中医证候积分总分低于对照组（P<0.05）。治疗后研究组胃动素（MLT）高于对照组,生长抑素（SS）、胃泌素（GAS）低于对照组（P<0.05）。治疗后研究组餐后胃窦收缩频率（F）、收缩幅度（P）、运动指数（MI）高于对照组（P<0.05）。治疗后研究组胃蛋白酶原Ⅰ（PGⅠ）、胃蛋白酶原Ⅱ（PGⅡ）高于对照组（P<0.05）。结论：越鞠保和丸联合穴位埋线可有效改善肝胃不和型FD患者的血清胃肠激素和胃蛋白酶原水平,促进胃动力,进而改善胃肠功能。     

全球生物多样性监测及其进展

全球生物多样性监测及其进展曹志平（中国农业大学资环学院生态系,北京１０００９４）钟晓东（国家环保局国际合作司,北京１０００３５）１背景生物多样性监测最主要的目的是为管理者和决策者服务［１］,为他们在保护生物多样性、制定土地利用规划、评价环境影响等问...