低频超声对金黄色葡萄球菌生物膜的促渗作用研究

目的:探讨低频超声对血卟啉单甲醚(Hematoporphyrin monomerthyl ether,HMME)在金黄色葡萄球菌生物膜中渗透效果的影响。方法:将直径25 mm,孔径0.22μm的微孔滤膜平铺于LB琼脂培养基表面,再将纯种的金黄色葡萄球菌(ATCC6538)菌液,通过均匀涂布接种到滤膜表面,37℃恒温培养48 h获得实验所需的生物膜模型。将培养所得生物膜样本随机分为空白对照组,单独超声组,单独药物组和实验组,其中实验组按超声强度(0.5 w/cm~2或1 w/cm~2)和超声作用时间(1 min、2 min或3 min)不同又分为实验(A、B、C、D、E、F)组。所用渗透药物为20μg/m L的HMME溶液。对照组使用等量的生理盐水孵育,孵育时间为3 min,单独超声组也用生理盐水孵育并加0.5 W/cm~2的超声作用3 min。HMME在405 mm激发光下有特征性光谱,通过测量光谱曲线下积分面积,可间接反映生物膜中HMME渗入量。结果:实验A组(0.5 w/cm~2,1 min)的荧光光谱曲线下积分面积显著高于单独药物组(P0.05)。声强相同时,随作用时间增加,所得光谱曲线下积分面积显著增加(P0.01或P0.05);作用时间相同时,声强越大,光谱曲线下积分面积亦越大(P0.01)。结论:低频超声可以显著增加HMME渗透进入金黄色葡萄球菌生物膜的量,且渗透效果与超声作用时间和超声声强正相关。     

超声引导下穿刺置管引流治疗肝脓肿的疗效分析

目的:探讨超声引导下穿刺置管引流治疗肝脓肿的临床疗效。方法:回顾性分析本院2012-2013年56例肝脓肿住院患者超声引导下穿刺置管引流治疗的临床资料。结果:56例患者行超声引导下穿刺置管引流治疗,其中3例多发脓肿行2次穿刺置管治疗,其余均一次穿刺置管成功,未出现出血、胆漏、周围脏器损伤等并发症,本组患者手术前后体温、白细胞数及脓肿面积比较均有统计学意义(P0.01)。24例体温升高患者中,21例术后3天内恢复正常,3例仍有升高;41例白细胞数升高患者中,29例术后3天内恢复正常,12例仍有增高;56例患者术后脓肿面积均明显减小,该组患者腹痛、肝区叩痛等临床症状均明显缓解。结论:超声引导下穿刺抽吸及置管引流治疗肝脓肿是一种简单方便、安全可靠、创伤小、明显有效的局部治疗方法,操作者需要充分作好术前准备,严格把握适应症,严谨操作步骤并结合全身抗生素治疗可以明显改善患者发热症状,有效降低患者白细胞及中性粒细胞,明显缩短治疗周期,提高治愈率。     

超声造影在肝硬化合并肝内局灶性小病灶中的诊断价值

目的:探讨超声造影(CEUS)在肝硬化合并肝内局灶性小病灶(≤3.0 cm)中的诊断价值。方法:选择我院自2010年4月至2014年8月患有肝硬化合并肝内局灶性小病灶的患者100例,采用MRI、CT及病理确定病灶良恶性,同时对比影像结果,计算常规超声和CEUS的准确性。结果:MRI、CT及病理确定病灶105个,其中恶性组45例,良性组60例,超声造影技术能清晰的显示出血流灌注的情况以及动脉相、门脉相及延迟相的特点。数据统计结果显示常规超声和CEUS的准确性、特异性和敏感性分别为59.05%、77.78%、45.00%和95.24%、95.56%、95.00%,两者之间的差异具有统计学意义(P0.05)。结论:相对于常规超声,CEUS对患有肝硬化合并肝内局灶性小病灶的患者具有更高的诊断价值。     

常规高频超声联合超声弹性成像在甲状腺良恶性结节鉴别诊断中的应用价值

目的:研究常规高频超声与超声弹性成像在甲状腺结节良恶性鉴别诊断中的应用价值。方法:选择住院的甲状腺结节性疾病患者120例(146个甲状腺结节)。对患者进行常规高频超声和超声弹性成像检查,以术后病理检查为金标准,计算不同方法对甲状腺良恶性结节鉴别诊断的灵敏度、特异度、准确度。结果:120例患者,经手术病理检查证实有146个结节,其中良性结节98个,恶性结节48个。常规高频超声显示在形态、边界、包膜、内部回声、微钙化及RI值上,甲状腺良、恶性结节之间的差异有统计学意义(P0.05)。常规高频超声与弹性成像相比,诊断效能之间的差异无统计学意义(P0.05);常规高频超声与联合超声诊断的灵敏度(X~2=12.22,P0.01)、特异度(X~2=10.21,P0.01)、准确度(X~2=9.31,P0.01)相比较,差异具有统计学显著性;超声弹性成像与联合超声诊断灵敏度(X~2=6.51,P0.01)、特异度(X~2=5.82,P0.05)、准确度(X~2=4.56,P0.05)相比,差异具有统计学显著性。结论:常规高频超声联合超声弹性成像对甲状腺良恶性结节的诊断灵敏度和准确度高,值得进一步推广临床应用。     

三维细胞培养技术应用于肿瘤细胞的研究进展

三维细胞培养是一种模拟细胞在体内微环境生长的新兴培养技术。在三维支架中细胞能以三维空间的方式生长,并以三维方式与周围的微环境交互作用,能充分体现肿瘤细胞的黏附、侵袭及远端转移过程,可作为动物模型和二维培养模型之间的桥梁。三维细胞培养技术广泛应用于肿瘤模型构建、肿瘤细胞生理学研究以及肿瘤耐药机制分析等的研究。     

芒草中总黄酮的提取工艺研究及其挥发油成分的鉴定

以黄酮提取率为指标,采用超声辅助法研究了芒草中黄酮类化合物的提取工艺。最佳提取条件为:乙醇浓度70%、料液比1∶30、提取温度70℃、提取时间40 min、提取级数3次,在此条件下测得南荻中总黄酮含量为7.24 mg/g,并在此条件下测定了芒草10个品系中总黄酮含量为4.16~7.84 mg/g,且在不同品系间的差异均达到极显著水平。采用气质联用技术鉴定奇岗六倍体、‘GMG121’、芒杂中的挥发油成分,从中共鉴定出28种成分。本研究对芒属植物的遗传育种以及开发和综合利用具有重要意义。     

杆状病毒-昆虫细胞系统表达的戊型肝炎病毒衣壳蛋白p495的纯化、结构解析以及免疫原性分析

本研究目的是利用杆状病毒-昆虫细胞表达系统建立戊型肝炎病毒(HEV)p495蛋白的高效稳定表达和可放大纯化的方法,研究其理化性质和解析三维结构,与上市戊肝疫苗益可宁(Hecolin)进行免疫原性的比较。本研究选择基因1型HEV毒株的开放读码框2(ORF2)的aa112-606片段构建杆状病毒,感染昆虫细胞进行重组蛋白的表达,经过PEG沉淀和阴离子交换层析的纯化,获得纯度为95%以上的p495蛋白,每升细胞培养液最终获得15mg的目的蛋白。经ELISA、分析超离、分子排阻色谱和电镜负染等分析显示p495蛋白具有良好的抗原性且呈现为均一的病毒样颗粒(VLP),沉降系数为51.3S,颗粒直径约20nm。冷冻电镜三维结构解析获得分辨率为3.8的三维结构,揭示p495形成了T=1的等二十面体结构,与已报道的晶体结构相一致。小鼠免疫实验表明p495蛋白与益可宁中p239抗原的免疫原性相当。本研究为进一步开展HEV的受体鉴定、表位结构研究以及疫苗改进等奠定良好的基础。     

高频超声对乳腺导管内乳头状瘤的诊断价值分析

目的探讨高频彩色多普勒超声对导管内乳头状瘤的诊断价值。方法回顾性分析36例39个病变经手术和病理证实为导管内乳头状瘤的超声图像表现及特征,并与病理结果比较。结果高频超声对Ⅰ型导管内乳头状瘤的诊断准确率为92.8%,Ⅱ型为90.9%,Ⅲ型为50%,Ⅳ型为80%,Ⅴ型为60%。结论高频多普勒超声可作为导管内乳头状瘤首选的检查方法之一。     

超声成像技术分析糜酶转基因小鼠心脏功能

目的 应用小动物高频超声技术对糜酶转基因小鼠的心功能进行分析,以探索糜酶基因对心脏结构和功能的影响。方法 通过VisualSonics Vevo770高分辨率小动物超声系统检测不同年龄的转基因小鼠及对照小鼠包括心壁厚度、主动脉血流速度、左心室内径、左心室容积、每搏输出量、射血分数、短轴缩短率和心输出量等的心脏功能指标的改变进行比较分析。结果 随着小鼠年龄的增大,转基因阳性小鼠心壁厚度和主动脉血流速度逐渐增加,至6月龄时,转基因小鼠的左心室前壁收缩期厚度增加37%,增长率是对照小鼠的1.2倍（P〈0.05）;主动脉血流速度比对照小鼠高29%（P〈0.05）;转基因阳性小鼠的左心室内径、左心室容积、每搏输出量、射血分数、短轴缩短率和心输出量等的心脏功能指标表现出和以上变化相一致的表型。结论 转基因小鼠糜酶表达水平升高,引起心脏AngⅡ形成增多,可使心肌细胞的收缩力提高;心肌细胞肥大,心壁增厚;且有随年龄增加的趋势,可研究建立慢性、老年性肥厚型心脏病模型。     

正交试验法优选超声提取知母皂甙的研究

用正交实验法对知母(Anemarrhena asphodeloides Bge.)中总皂甙的超声提取工艺进行了研究,采用正交表L9(34),以提取剂的体积分数、料液比(mA∶VB)、提取时间以及提取次数为因素,以知母总皂甙元的含量为指标,用紫外分光光度计法进行检测,所得提取液经大孔树脂纯化,得到的最佳提取参数和结果为:以φ(乙醇)=75%的水溶液为提取剂、提取料液比mA∶VB=1∶8、提取次数2次、每次30min,提取率92.8%,纯度91.0%。结果证明了对知母而言,超声提取法是一种提取效率高、操作简便、省时的方法。