角膜新生血管的治疗新进展

角膜本身无血管,毛细血管网围绕角膜缘,如果血管超越角膜缘进入透明区即为病理性。角膜新生血管不是一种独立的角膜病,而是一种病理改变。由于维持角膜无血管的平衡因素被破坏,角膜缘的毛细血管侵入角膜周边部1-2 mm,即可视为角膜新生血管(CNV)形成1。随着它对感染的消除、创伤愈合、抑制免疫介导的角膜溶解有一定作用,但其结构和功能不完善,容易发生血浆渗漏,造成角膜水肿、脂质沉着以及激发的角膜瘢痕化,严重影响视力;也使角膜移植排斥反应的发生率大大增加。CNV的生长有利于病原微生物的清除和组织的修复,但严重影响了角膜的透明性,导致一系列的并发症,破坏眼球的完整性,目前国内外对治疗角膜新生血管的药物进行了大量的研究,希望通过不同的药物、不同的治疗方法解决这个大难题。     

EGFL7 基因RNAi慢病毒表达载体的构建及鉴定

目的：构建人类表皮生长因子域7（EGFL7）基因RNA干扰（RNAi）重组慢病毒表达载体。方法：参照小分子干扰RNA 的设 计原则,应用OligoDesigner 3.0 软件设计三条靶向人EGFL7 基因的RNA干扰序列（hEGFL7-RNAi）,并将其分别插入含有绿色 荧光蛋白（GFP）的慢病毒载体pLV3 中,获得重组质粒,与包装质粒pRsv-REV、pMDlg-pRRE 和pMD2G共同转染293T细胞,包 装产生重组慢病毒,培养72 h后,应用qRT-PCR 检测慢病毒感染人脐静脉内皮细胞（HUVEC）后靶基因mRNA 的水平,以评价 其基因沉默效果。结果：筛选出3 条人EGFL7 基因的RNAi 序列,分别包装出重组慢病毒,其滴度分别为1× 108、2× 108和5× 108TU/mL,将其转染入HUVEC 后,EGFL7mRNA表达均受到明显抑制(P<0.05)。结论：成功筛选出三条针对人EGFL7基因的 RNAi有效靶序列,并成功构建重组慢病毒表达载体,证明该序列可沉默HUVECs 中EGFL7 基因的表达。     

结缔组织生长因子在心衰后心室重构的研究进展

心力衰竭是各种心血管疾病发展的终末阶段,而心室重构贯穿于心衰发生、发展的全过程,阻断心室重构是防治心衰不容忽视的一个重要环节。结缔组织生长因子是一种新发现的具有多种生物学功能的成纤维细胞生长因子,在病理情况下,能抑制心肌细胞外基质的降解,促进心肌细胞的凋亡,与动脉粥样硬化、器官纤维化、创伤后修复及组织瘢痕形成等密切相关。作为参与心力衰竭后心室重构的细胞因子,不仅能够成为评价心衰患者临床预后的指标,还有望成为抗纤维化治疗的新靶点。     

曲妥珠单抗辅助或新辅助治疗HER2 阳性转移性乳腺癌的临床结果

目的:比较人表皮生长因子受体2过表达(HER2+)的患者既往接受以曲妥珠单抗为基础辅助或新辅助治疗后再次接受针曲妥珠单抗治疗的临床结果。方法:共247例(I-III期170例,IV期77例)HER2+转移性乳腺癌患者,其中首次接受曲妥珠单抗治疗患者211例(I-III期134例,IV期77例),再次接受曲妥珠单抗治疗患者36例(I-III期)。使用Cox比例风险回归和logistic回归分析首次或提前接受曲妥珠单抗治疗的患者的预后的临床结果,生存评估使用Kaplan-Meier法。结果:I-III期HER2+转移性乳腺癌患者中,未预先接受曲妥珠单抗治疗组的中位总生存期为36个月和预先接受曲妥珠单抗治疗组为28个月(危害比[HR],1.45;95%CI,1.05-2.02[P=0.012]);I-IV期HER2+转移性乳腺癌患者中,未预先使用曲妥珠单抗组的中位总生存期为37个月,客观缓解率58%;临床获益率77%;预先使用曲妥珠单抗组为25个月,客观缓解率28%;临床获益率37%;调整后的比值比为客观缓解率0.37(9%CI,0.18-0.77;P=0.010)和临床获益率0.28(95%CI,0.14-0.59;P=0.014)。单因素分析没有提前接受曲妥珠单抗治疗组中位总生存率较长(P=0.012)。多因素分析发现总生存率没有显著差异(P=0.19)。结论:当曲妥珠单抗用于转移性疾病,没有提前接受曲妥珠单抗治疗的HER2+乳腺癌患者临床结果优于提前接受曲妥珠单抗治疗的患者。     

川穹嗪对胸部肿瘤患者TGF-beta1水平的影响及放疗性肺损伤的预防作用

目的：探讨川穹嗪注射液对血浆TGF-beta1 水平的影响及对放射性肺损伤的预防作用。方法：随机选取120 例胸部肿瘤放疗患 者分为观察组与对照组,所有研究对象给予三维适形放射治疗,观察组在放疗期间川芎嗪注射液每日静脉滴注1 次;检测两组放 疗前后血浆TGF-beta1含量变化、放射性肺损伤及肺功能情况。结果：放疗后两组血浆TGF-beta1 均上升,观察组在放疗结束时、放疗 结束后3 月、6 月的血浆TGF-beta1 含量明显低于对照组(P<0.05) (19.12± 5.23) vs(26.69± 5.38)ng/mL、(5.62± 3.48)vs(9.64± 7.82) ng/mL、(3.28± 1.81)vs (7.98± 5.16) ng/mL;观察组放射性肺损伤发生率低于对照组(P<0.05);观察组放疗后三月肺功能指标用力肺 活量(FVC)、第1 秒用力呼气容积(FEV)、肺总量(TLC)、CO弥散量(DLCO)出现明显下降的例数显著低于对照组(P<0.05)。结论：川 芎嗪注射液可以降低放疗肺损伤患者的血浆TGF-beta1 含量,降低放射性肺炎与放射性肺纤维化的发生率,改善肺功能,无明显不 良反应、安全性好,可起到较好的预防放疗后放射性肺损伤的作用。     

表达K1-5 蛋白的人胎盘间充质干细胞抑制大鼠主动脉环血管生成的实验研究

目的:观察表达外源性Kringle1-5(K1-5)蛋白的人胎盘组织的间充质干细胞(HPMSCs)在体外对大鼠主动脉环血管生成的影响。方法:用胶原酶和贴壁法从人胎盘组织中提取间充质干细胞。选取感染复数MOI:50,将重组腺病毒载体rAd-K1-5感染HPMSCs至48 h;应用荧光显微镜观察转染效率。取8周雌性SD大鼠的腹主动脉,建立主动脉环血管生成体外模型,6天后观察基质胶内微血管形成的情况。结果:从人胎盘组织提取的成纤维样细胞具有贴壁生长特性,可向成骨细胞、脂肪细胞分化,证明从胎盘提取的细胞是间充质干细胞。采用rAd-K1-5腺病毒载体感染的HPMSCs可分泌Kringle1-5蛋白,表达K1-5蛋白的转基因HPMSCs处理的基质胶栓中管样结构的形成明显减少。结论:表达外源性Kringle1-5蛋白的HPMSCs能够体外抑制大鼠主动脉环新生血管生成。     

人tBID蛋白的表达纯化及其偶联的新型分子探针对前列腺癌细胞的促凋亡作用研究

目的:以PQE-30为原核表达载体,构建PQE30-tBID重组表达载体,表达和纯化目的蛋白tBID,并利用金磁纳米微粒将tBID蛋白与人HER2抗体偶联成分子探针Anti HER2-Gold Mag-tBID,以探究其对前列腺癌细胞的促凋亡作用。方法:根据tBID的基因序列设计特异性的上下游引物,利用普通PCR扩增目的基因tBID,构建重组表达载体PQE30-tBID,将其转化到BL21(DE3)中,IPTG诱导表达,经SDS-PAGE凝胶电泳和Western Blot鉴定分析,验证目的蛋白tBID的表达,并对其进行纯化。利用金磁纳米微粒与蛋白质之间的静电相互作用以及疏水相互作用,将人HER2抗体与tBID蛋白偶联在其表面,构建分子探针Anti HER2-Gold Mag-tBID。流式细胞术检测该分子探针与前列腺癌PC-3细胞的特异性亲附结合能力,通过Annexin V-FITC细胞凋亡检测试剂盒分析分子探针对PC-3细胞的促凋亡作用。结果:普通PCR扩增后得到了411 bp的DNA片段,经双酶切鉴定以及菌液测序,表明重组表达载体PQE30-tBID构建成功。促凋亡蛋白tBID成功地在大肠杆菌中表达,蛋白相对分子量约15 KD,经过纯化,得到了纯度较高的tBID蛋白。经过与金磁纳米微粒的偶联,成功构建出一种新型的分子探针Anti HER2-Gold Mag-tBID。该分子探针可与PC-3细胞特异性结合,且经Annexin V-FITC染色分析可见PC-3细胞发生明显凋亡,凋亡率达62.9%,与未处理组(3.79%)和对照组(4.33%)相比,具有显著的统计学差异。结论:PQE30-tBID重组表达载体能在大肠杆菌中高效表达,且成功得到了纯度较高的人促凋亡蛋白tBID。经金磁纳米微粒偶联,该蛋白能够与人HER2抗体重组成新型的分子探针,且能特异性地靶向前列腺癌PC-3细胞并显著促进其凋亡。     

彩色多普勒超声在血管性勃起功能障碍中的诊断价值

目的:研究彩色多普勒超声(CDDS)在血管性勃起功能障碍(ED)中的诊断价值,从而为患者临床诊断方式的选择提供参考。方法:选择本院内2012年4月至2015年3月期间因ED入院接受治疗的男性患者248例,在患者接受检查前,需将酚妥拉明、罂粟碱以及前列腺素-E1等药物混合液0.2 m L注入阴茎海绵体内,使得诱导阴茎勃起,随后使用彩色多普勒超声系统进行诊断,对阴茎海绵体动脉的收缩期最大血流率(PSV)、舒张末期血流率(EDV)、阻力指数(RI)等指标进行记录,对各指标诊断ED的应用价值进行评估。结果:在248例患者中,存在血流动力学异常病例172例,其中96例患者为动脉性ED,72例患者为静脉性ED;72例血流动力学正常病例,为非血管性ED。合并糖尿病25例,占10.08%;高血压17例,占6.85%;高血脂116例,占46.77%;阴茎硬结症7例,占2.82%;阴茎海绵体纤维化8例,占3.23;经腹前列腺切除术后者9例,占3.2%,经尿道切除前列腺术后者8例,占3.23;吸烟者196例,占79.03%。血管性ED患者的FPSV、PSV、EDV明显低于非血管性ED患者的,差异均有统计学意义(P0.05);且在血管性ED患者中,动脉性FPSV、ED、EDV患者的PSV明显低于非血管性ED患者的,差异均有统计学意义(P0.05)。在指标对比中,血管性ED患者的RI与非血管性ED患者的RI无明显差异(P0.05),但静脉性ED患者的RI明显低于非血管性ED患者的,差异均有统计学意义(P0.05)。在96例动脉性ED患者中,行选择性阴部内动脉造影术有11例,动脉性病变8例,彩色超声多普勒检查与选择性阴部内动脉造影术符合率为72.73%。结论:在诱导阴茎勃起后,对患者进行彩色多普勒超声系统诊断,能够有效排除阴茎在疲软状态下存在的可变性因素,能够准确反映阴茎血流动力学状态,从而能够准确筛查血管性ED疾病,其检测结果的准确性优于动脉造影,临床应用价值较高,值得进一步推广使用。     

高流量颅外内血管搭桥技术在颅底肿瘤手术中的应用进展

颅底肿瘤尤其是侵及颈内动脉等颅内主供血血管的肿瘤治疗一直是神经外科的难题,由于此类肿瘤与重要血管的关系密切,手术风险极大,导致治愈率底下。而颅外内血管搭桥技术通过重建颅内血运,可以有效提升此类肿瘤的全切率。本文回顾了高流量颅外内血管搭桥技术的历史进展、探讨了颅外内血管搭桥技术辅助切除颅底肿瘤的意义所在,复习文献归纳了该技术应用的适应症、术中注意事项及其疗效与争议,旨在为其临床推广应用提供更多的参考依据。熟练及合理地应用颅外内血管搭桥技术,制定个体化的治疗方案,复杂颅底肿瘤的治愈率将会得到进一步提升。