灰盖鬼伞过氧化物酶功能表达及部分酶学特性

摘要:【目的】旨在用毕赤酵母高效表达灰盖鬼伞过氧化物酶。【方法】借助DNAworks 3.1软件设计、优化引物,用自己构建的基因合成、定点突变平台合成了毕赤酵母密码子偏好性的灰盖鬼伞过氧化物酶基因,测序后构建在表达载体pPICZαA上,整合于巴斯德毕赤酵母GS115染色体,来自酿酒酵母的α因子作为信号肽序列指导重组蛋白的分泌表达。从82个PCR检测为阳性的酵母转化子中筛选出6株高Zeocin抗性的菌进行表达,选表达酶活性最高的作为实验菌株命名为CIP/GS115。【结果】以ABTS为底物时,CIP/GS115 在甲醇诱导第4天酶活最高达到487.5 U/mL,是目前摇瓶培养诱导表达灰盖鬼伞过氧化物酶活性最高报道。纯化后的酶最适反应温度为25℃,45℃酶反应速度是最适温度时的61.5%,在低于40℃时比较稳定,超过45℃稳定性迅速下降。最适反应pH 为5.0,在pH 4.5－6.5之间比较稳定。以不同的底物研究纯酶底物特异性发现最适底物的顺序是:ABTS ＞ 愈创木酚＞ 2,6-二甲氧苯酚＞ 2,4-二氯苯酚＞ 苯酚。【结论】灰盖鬼伞过氧化物酶在毕赤酵母中的高效分泌表达和高的特殊活性为该酶在废水处理、染料脱色等方面的工业化应用奠定了一定基础。     

孕妇体内维生素D含量与新生儿湿疹的相关性

目的:研究孕妇维生素D(25(OH)D)含量与新生儿湿疹的关系,为改善孕期维生素D缺乏,预防婴儿湿疹提供临床依据。方法:选取2013年9月-2013年11月在我院生产的孕妇及所生的新生儿,调查研究对象的基本情况。采集孕妇的静脉血进行25(OH)D含量测定,并诊断新生儿湿疹的发生情况。结果:孕妇25(OH)D含量的中位数是15.17 ng/m L,新生儿湿疹的发病率是26.1%。孕妇不同含量25(OH)D水平与孕中晚期补充复合维生素、服用奶制品、摄入鱼蛋类次数、每天晒太阳时间等有关(P0.05);孕妇25(OH)D含量20 ng/m L会增加子女6个月内患湿疹的风险(OR=3.19,95%;CI:1.54,4.21)。结论:孕妇25(OH)D含量缺乏会增加新生儿湿疹的发病率。     

C02加富对UV-B辐射胁迫下亚心形扁藻光合作用和膜脂过氧化以及抗氧化酶活性的影响

在CO2浓度分别为当今CO2浓度(360μL/L)和加富浓度(5000μL/L)条件下,研究了UV-B胁迫对亚心形扁藻(Platymonas subcordiformis(Wille)Hazen)的光合作用、膜脂过氧化和抗氧化酶活性的影响。实验结果表明：(1)UV-B单独作用下,亚心形扁藻的干重、光合速率、叶绿素a(Chl a)和类胡萝卜素(Car．)含量显著降低,CO2加富单独作用下,亚心形扁藻的干重和光合速率显著升高,叶绿素a和类胡萝卜素含量与对照相比没有显著变化,而UV-B与CO2共同作用则使亚心形扁藻的干重和光合速率与对照相比没有显著变化,叶绿素a和类胡萝卜素含量显著降低。(2)UV-B单独作用和CO2加富单独作用都使可溶性蛋白含量显著降低,UV-B与CO2共同作用下的可溶性蛋白含量比UV-B单独作用的要高。高CO2对藻的可溶性蛋白含量的变化在很大程度上归因于Rubisco蛋白的降低。(3)UV-B单独作用下,O2产生速率、H2O2含量和MDA含量显著升高,而C02加富单独作用下,O2产生速率、H2O2含量和MDA含量显著降低,与UV-B单独作用相比,UV-B与CO2共同作用使02产生速率、H2O2含量和MDA含量显著降低。说明CO2加富可以减少活性氧对亚心形扁藻的氧化胁迫,同时减少UV-B对亚心形扁藻的膜脂过氧化伤害。(4)UV-B单独作用下,SOD、POD、CAT、GR和GPx活性显著升高,高CO2单独作用使SOD、POD和GR活性显著降低,而CAT和GPx活性与对照相比稍有所降低,但降低不明显,而UV-B与CO2共同作用则使SOD、POD、CAT、GR和GPx活性比UV-B单独作用少得多。结果表明,高CO2对UV-B胁迫所造成的氧化胁迫具有一定的改善作用,因此CO2浓度升高可能对增强海洋微藻的抗逆能力有利。     

甘草抗肿瘤活性成分的研究

为了研究甘草Glycyrrhiza uralensis Fisch中的抗肿瘤活性成分.本文利用正相硅胶柱层析、葡聚糖凝胶Sephadex LH-20、制备薄层层析、反相制备色谱等手段进行分离纯化,并通过1H NMR 13C NMR等波谱技术进行结构鉴定.采用MTT法对从甘草分离到的化合物作小鼠肺腺癌LA795细胞株抗肿瘤活性筛选.从甘草中分离鉴定了甘草西定(1)、β-谷甾醇(2)、桦木酸甲酯(3)、6,8-异戊烯基金雀异黄素(4)、Glisoflavanone(5)五个化合物.化合物3为首次从该种植物中分离得到,化合物1、2、4对小鼠肺腺癌LA795细胞的增殖有一定的抑制作用.     

人工全髋关节置换并发症的护理研究进展

自1938年willess首次将人工全髋关节置换术（THR）应用到临床后,该手术已在世界各地广泛推广与应用,它是多年来矫形外科学中投入最多、发展最快的领域之一。目前,THR被认为是效果非常肯定的治疗方法,但也存在各种各样的并发症,甚至一些并发症给患者带来的是终生的痛苦或生命的代价。如何治疗和预防术后并发症是提高人工全髋关节置换术疗效的重要手段,术后并发症的观察护理和预防。是提高手术疗效的重要因素。现结合人工全髋关节置换术后常见问题、文献进行综述。     

中国天牛科一新记录种

记述了天牛科Cerambycidae花天牛亚科Lepturinae驼花天牛属Pidonia1新记录种——雅玛驼花天牛Pidonia (Pidonia) yamato Hayashi et Mizuno,标本保存在西南大学昆虫博物馆。     

辽宁新品系绒山羊血液蛋白多态性及其与经济性状的关系&

利用聚丙烯酰胺凝胶电泳法对120只辽宁新品系绒山羊的6种血液蛋白进行多态性检测,并分析了蛋白标记座位与体重、绒产量和绒细度等经济性状的相关性。采用SAS统计软件处理,统计各经济性状的最小二乘均值（LSM）,并进行方差分析和多重比较。结果表明：EsBB型可作为体重性状的优势基因型。TfBB和Amy1-2型位点可作为绒产量的优势基因型,可望作为遗传标记用于标记辅助选择。     

麻疯树毒蛋白curcin2基因的两个原核表达载体的构建和表达

从麻疯树基因组中扩增到毒蛋白curcin2基因成熟肽编码区,成功构建了原核表达载体pET-C和pQE-C,并转化大肠杆菌获得转化子PCB和PCM。在不同温度、不同浓度IPTG和不同诱导时间下,PCB都没有curcin2重组蛋白产生,而PCM能表达出curcin2,主要以包涵体形式存在。诱导温度较低时,延长诱导时间有可溶性的curcin2产生。在文章的实验中,PCM表达curcin2的优化条件为:温度16℃,IPTG1mmol·L-1,时间16￣24h。     

长白山天蛾科昆虫区系特点及地理分布

调查研究表明:长白山自然保护区有天蛾科昆虫31种,隶属5个亚科19属。其中白须天蛾Kentrochrysalis sieversiAlpheraky、女贞天蛾K.streckeriStaudinger为长白山新记录,黄脉天蛾AmorphaamurensisStaudinger为优势种。绝大多数天蛾种类是单带种,仅分布阔叶红松林带,只有黄脉天蛾为多带种。天蛾成虫活动期为5月下旬~8月中旬,种群数量最多时间为6月~7月。昆虫区系主要起源于古北区,区系以东方成分为主,其次是欧洲-西伯利亚成分,亦有一定数量中亚细亚或印度-马来西亚成分。     

多药耐药基因分型芯片的制备及优化

目的:建立多药耐药基因(mdr1)分型芯片,以检测患者的单核苷酸多态性(SNPs)。方法:设计并合成探针和引物,制备芯片;构建野生型和突变型质粒,以其为模板经PCR仪扩增后,与芯片上的探针杂交,并用扫描仪分析结果。结果:构建了野生型和突变型质粒,与芯片杂交能很好地区分基因型;优化了制备条件,建立了分型标准。结论:该基因芯片是一种快速特异的基因分型方法。