排序方式: 共有208条查询结果,搜索用时 46 毫秒
91.
本文首次报道疟疾多表位抗原基因在转基因烟草中表达成功。疟疾是当今最需要研究有效疫苗的主要传染病之一。过去的研究表明,AWTE基因编码的疟疾多种抗原表位是有效的抗疟表位,CTB基因编码的霍乱毒素B亚基,是一种既能引起细胞免疫又能引起体液免疫的免疫载体和佐剂。本研究把AWTE-CTB融合基因构建到植物表达载体pBVG-ny1上,采用共转化的方法,通过基因枪导入转化烟草。经PCR扩增AWTE-CTB基因片段检测,证实了疟疾多表位抗原基因在转基因烟草中的整合。SDS-PAGE蛋白电泳结果显示转基因烟草中表达了AWTE-CTB融合基因分子量相同的特异蛋白。经抗原性分析实验和Western免疫印迹实验结果表明,特异表达的融合蛋白可与CTB和AWTE抗体结合,具有CTB和AWTE抗原性。 相似文献
92.
金黄色葡萄球菌肠毒素A的基因克隆、表达及活性试验 总被引:6,自引:0,他引:6
利用PCR从金黄色葡萄球菌标准株(Staphylococcus aureus, ATCC13565)中克隆了金黄色葡萄球菌肠毒素A(SEA)的基因,序列测定结果与报道完全一致。构建了表达载体pETSEA并获得高效表达,重组蛋白(rSEA)在37℃诱导时以包涵体形式存在,降低温度则出现可溶表达,可溶性rSEA占总rSEA的55%。可溶性rSEA经Ni2+亲和层析纯化,达电泳纯。通过同源模建对rSEA对SEA进行结构比较,结果表明尽管rSEA比野生型SEA多了9个氨基酸但其结构并没有明显的变化。单核细胞增殖试验进一步证明了该结论:将rSEA与SEA同外周血单个核细胞共同培养,两者均能有效地促进其增殖。将rSEA与体内激活的脾细胞共培养,则能增强脾细胞的体外抑瘤活性。 相似文献
93.
大肠杆菌K12 DY330菌株的染色体上整合有一种新型的同源重组系统——缺陷型λ原噬菌体同源重组系统。以DY330为出发菌,通过同源重组构建大肠杆菌thyA-株DY330TI,其基因组特点是:thyA基因除保留N端的1~49氨基酸残基相对应的必需核苷酸序列外,将其余部分全部缺失;此外,还敲除了DY330TI中与缺陷型λ原噬菌体同源重组功能相关的基因,从而尽可能避免了通过同源重组产生回复突变的可能性。通过大肠杆菌thyA基因对该突变株的转化实验,检测转化子的回复突变率,进一步证实该突变株的突变性状稳定,为构建以thyA为选择标志的大肠杆菌染色体质粒平衡致死系统提供了合适的缺陷型宿主菌。 相似文献
94.
临床应用重组SARS病毒双抗原夹心诊断试剂盒的检测效果评价 总被引:1,自引:0,他引:1
严重急性呼吸综合征(severe acute respiralory syndrome,SARS)的临床表现为非典型性肺炎.继加拿大首次完成SARS病毒株Tor2的全基因组测序后[1],世界卫生组织(WTO)宣布一种新型的冠状病毒(coronavirus)是引发SARS的病原体[2,3].由于SARS具有极强的传染性和较高的病死率(5%~15%),且早期疾病体征较难与某些非SARS病毒引起的非典型肺炎相区分[4],由此导致大量疑似病例无法确诊,以及因误诊引起的交叉感染给人们造成巨大的心理压力和社会恐慌.所以,建立快速、准确的早期诊断方法显得尤为重要.目前的实验室诊断方法中,主要有基于病毒抗体检测的免疫荧光法和酶联免疫吸附试验(ELISA),以及基于基因检测的多聚酶链式反应(PCR)和基因芯片法.其中ELISA主要是使用病毒裂解抗原,检测病毒IgG及IgM抗体的间接ELISA.由于病毒裂解抗原的复杂性,以及间接ELISA中二抗带来的假阳性结果,间接ELISA试剂在正常人群中有1.5%~2%的阳性结果. 相似文献
95.
96.
97.
胶原蛋白XⅧ(COL XⅧ)是一种十分保守的基底膜胶原蛋白成分,根据其蛋白质结构特点,它和COL XⅤ一起构成MULTIPLEXINs胶原亚家族。同时,它还含有丰富的硫酸肝素糖链,是迄今发现的第三个基底膜硫酸肝素蛋白聚糖。COL XⅧ基因具有两个结构不同的启动子区,由此产生组织分布各异的不同变体,它们在胚胎发育中具有器官特异的调控功能,特别是在视网膜发育中,完整的COL XⅧα1链必不可少。 相似文献
98.
糖多孢红霉菌A226 的原生质体转化和染色体同源整合 总被引:15,自引:0,他引:15
糖多孢红霉菌的原生质体转化和染色体同源整合,是红霉素生物合成基因改造的重要途径。本研究对糖多孢红霉菌A226原生质体制备和转化条件进行了优化,结果表明以对数生长后期和稳定期菌丝体制备的原生质体转化效率较高;质粒、原生质体和PEG-T缓冲液体积比例为15:40:200(μl)时转化效果较好;比重小原生本的转化效率虽高,但在转化子中有效整合的比例较低;PEG1000和PEG3350对转化效率没有显差异;而Yamamoto转化系统优于Weber转化系统。PCR鉴定、抑菌活性鉴定和质谱分析均表明,转化质粒已整合到染色体红霉素合成基因位点。 相似文献
99.
100.