谷子光敏色素基因光周期、非生物胁迫响应特性及关键自然变异位点鉴定北大核心CSCD

比较分析光敏色素基因家族成员对光周期、非生物胁迫响应模式并鉴定其有利自然变异类型,为全面了解光敏色素基因家族在光周期调控谷子生长发育及应对非生物胁迫中的作用机制、开展关键性状的分子辅助选择奠定基础。文中利用RT-PCR技术从超晚熟谷子农家种‘毛粟’中克隆了3个光敏色素基因SiPHYA、SiPHYB和SiPHYC;在进行生物信息学分析后,利用荧光定量PCR技术研究了3个基因的光周期调控模式及对聚乙二醇(polyethylene glycol,PEG)模拟干旱、自然干旱、脱落酸(abscisic acid,ABA)、高温、Na Cl五种非生物胁迫的响应特性;最后检测这3个基因在160份谷子材料的突变位点,通过单倍型分析确定基因的功能效应。结果表明,获得了基因SiPHYA、SiPHYB和SiPHYC包含完整编码区的c DNA序列,长度分别为3 981、3 953、3 764 bp,其中基因SiPHYB和SiPHYC具有较近的进化关系。基因SiPHYA、SiPHYB和SiPHYC均受光周期调控,但光周期对SiPHYB、SiPHYC昼夜表达模式的影响要强于SiPHYA;短日照条件临近抽穗SiPHYA、SiPHYB表达水平显著低于长日照,暗示其在谷子长日照抑制抽穗中发挥作用。SiPHYB和SiPHYC共同响应PEG模拟干旱、自然干旱、ABA、高温4种胁迫;SiPHYA和SiPHYB以不同方式响应盐胁迫,SiPHYC没有参与谷子盐胁迫响应过程。基于160份谷子材料重测序数据发现基因SiPHYB高度保守,基因SiPHYA含有两个错义突变:单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP) 7 034 522;,SNP7 036 657;,导致延迟抽穗、增加株高。基因SiPHYC含有一个错义突变(SNP5 414 823;),导致短日照缩短抽穗期,长日照延长抽穗期,对株高、穗长的增加作用不受光温环境影响。光周期对基因SiPHYA、SiPHYB和SiPHYC具有不同的调控作用,除了盐胁迫,SiPHYB和SiPHYC共同响应多种非生物胁迫,相比参考基因型,SiPHYA、SiPHYC突变延迟抽穗、增加株高和穗长。     

适宜浓度短链脂肪酸混合物对小胶质细胞炎症 抑制及机制研究

本研究的主要目的是探讨适宜浓度短链脂肪酸(short chain fatty acids,SCFAs)混合物对炎症环境下小胶质细胞的抑炎作用及其机制.采用脂多糖(LPS)刺激小鼠小胶质细胞系BV-2细胞建立神经炎症模型,并利用CCK8试剂盒检测不同浓度单一的乙酸钠、丙酸钠、丁酸钠处理后的细胞活力.设计选取这三种SCFAs对细胞活力无影响、且有抑炎效果的特定浓度进行组合(SCFAs mix),进一步检测SCFAs mix对LPS刺激下BV-2细胞炎症反应的影响及机制,包括:a.用一氧化氮(NO)试剂盒检测NO的释放;b.用ELISA检测炎症因子TNF-α、IL-6的释放;c.用qRT-PCR和Western blot检测炎症因子TNF-α、IL-6、炎症小体NLRP3、炎症通路相关蛋白TLR4、NF-κB等的表达变化.结果表明LPS刺激BV-2细胞4 h后,在体系中添加特定浓度的单一SCFA处理12 h后,不能缓解BV-2细胞的炎症反应,而将上述SCFAs配制成同等终浓度的SCFAs mix处理12 h却能显著降低细胞培养上清液中NO、TNF-α和IL-6 (均P0.001)的量,还能抑制BV-2细胞内iNOS、TNF-α、IL-6和NLRP3 mRNA的升高(均P0.001);通过对炎症信号通路关键分子的检测发现,SCFAs mix可以抑制LPS诱导的BV-2细胞内TLR4、MyD88、TRAF6和NF-κB蛋白的表达升高.综上可见:适宜浓度的混合SCFAs可通过调控TLR4/MyD88/TRAF6/NF-κB炎症通路抑制LPS诱导的小胶质细胞的炎症反应,而起到抗炎的保护作用.     

多柔比星脂质体单药和联合洛铂方案治疗复发卵巢癌的临床研究

目的:评价盐酸多柔比星脂质体单药(PLD)与盐酸多柔比星脂质体联合洛铂治疗复发性卵巢癌的安全性和临床疗效。方法:收集2012年4月至2015年10月我科收治的31例复发晚期上皮性卵巢癌患者,根据患者是否存在铂类耐药分为多柔比星组(单药组)15例及多柔比星+洛铂组(对照组)16例。单药组给盐酸多柔比星脂质体50 mg/m~2,静滴;对照组给盐酸多柔比星脂质体20-30 mg/m~2,洛铂30-50 mg/m~2,静脉滴注,两组每21-28天重复一次,观察和比较两组的临床疗效和毒性反应的发生情况。结果:所有患者完成3-8周期,客观有效率(ORR)为38.7%。单药组为33.3%,对照组为占43.8%,两组ORR比较差异无统计学意义(P=0.411)。单药组骨髓抑制的毒副作用较对照组发生率显著升高高(P=0.019),两组其他毒副反应的发生情况比较差异无统计学意义(P0.05)。单药组和对照组中位生存时间(MST)分别为10个月(95%CI:1.242-18.758)、18个月(95%CI:8.261-27.739),中位无进展生存期(PFS)分别为7个月(95%CI:2.210-13.797)、13个月(95%CI:4.368-21.632),两组MST、PFS比较差异均无统计学意义(P0.277)。结论:聚乙二醇脂质体阿霉素单体或聚乙二醇脂质体阿霉素联合洛铂治疗复发性卵巢癌的疗效相当,而聚乙二醇脂质体阿霉素单体的安全性更高。     

伞裙追寄蝇滞育关联基因的转录组学分析

【目的】本研究旨在探讨调控伞裙追寄蝇Exorista civilis滞育的重要关联基因以及代谢途径,为明确该虫在转录组水平下的滞育分子机制提供理论基础。【方法】采用新一代高通量测序平台Illumina HiSeq^TM2000对伞裙追寄蝇非滞育以及滞育的蛹进行转录组测序分析以及生物信息学分析;应用KAAS在线pathway比对分析工具对筛选出的满足padj＜0.05且fold change≥32或padj＜0.05且fold change≤1/32条件的差异表达基因进行KEGG通路富集分析。【结果】根据测序结果,共获取58 050个基因。差异倍数在32倍以上的滞育关联基因(diapause-associated genes, DAGs)有454个,其中406个表达上调,共涉及134条通路,包括氧化磷酸化、柠檬酸循环及其他重要通路;48个表达下调,涉及32条通路。KEGG通路富集分析结果表明,滞育关联基因主要集中在信号转导、内分泌系统、碳水化合物代谢等途径中。【结论】本研究获得的伞裙追寄蝇转录组数据揭示了其滞育调控的重要代谢途径与关联基因。     

湖北蕨类植物新记录

该文报道了湖北蕨类植物1个新记录属:冷蕨属(Cystopteris Bernhardi)及对应的新记录种宝兴冷蕨(Cystopteris moupinensis Franchet); 4个新记录种:台湾剑蕨(Loxogramme formosana Nakai)、扇羽阴地蕨[Botrychium lunaria (Linnaeus) Swartz]、耳状紫柄蕨[Pseudophegopteris aurita (Hooker) Ching]、巢形鳞毛蕨[Dryopteris transmorrisonense (Hayata) Hayata]; 2个新记录变种:尾头凤尾蕨(Pteris oshimensis var.paraemeiensis Ching)和西藏粉背蕨[Aleuritopteris subvillosa var. tibetica (ChingS. K. Wu) H. S. Kung]。这些蕨类新记录在湖北的发现,大大丰富了湖北的植物区系及物种多样性,同时对这些蕨类的经济价值或药用价值进行了简要分析,为其资源的进一步合理开发和利用提供了一些理论依据。     

Ca2+对非细胞体系细胞核重建影响机制的研究

研究Ｃａ＾２＋与非细胞体系细胞核重建的关系以及Ｃａ＾２＋的作用机制,结果显示：Ｃａ＾２＋对非细胞体系中核装配有抑制作用,随着Ｃａ＾２＋浓度的增加,抑制核装配作用增加,在Ｃａ＾２＋作用的早期（作用１０分钟后）中入ＥＧＴＡ,可以部分地逆转Ｃａ＾２＋的抑制作用,Ｃａ＾２＋作用１小时后再加入ＥＧＴＡ,不再有逆转作用。对Ｃａ＾２＋作用机制的研究结果显示,不是由于ＡＴＰ和ＧＴＰ被沉淀而导致细胞核组装被抑制,Ｃ     

四膜虫（Tetrahymena shanghaiensis）大核核仁与去膜大核能诱导非…

外源ＤＮＡ或染色质在非洲爪蟾卵提取物中可以诱导细胞核样结构的重建。重建核除不具有核仁样结构外，在其它形态结构上与真核细胞核十分相似。前人的工作 重建中具有核仁前体结构。但可以是由于缺洗涤戌一核仁组织者的缘故，这些核仁前体不能相互融合形成新生核仁。那么活性核仁组织 重建核中是否能发挥其功能呢？为了研究这一问题，我们提取纯化了四膜虫的大核与大核的周边核仁。进一步去除大核与大核核仁分别加入非洲爪蟾卵非细     

缝隙连接蛋白43 研究进展

缝隙连接蛋白(Connexin,Cx)组成缝隙连接通道发挥其通讯功能,其本身也对细胞的生长、分化、凋亡、肿瘤具有调节作用。缝隙连接蛋白43(Cx43)在肺泡上皮和肺血管内皮高表达,在多种肺损伤的病理过程中起重要作用,因此成为研究热点。Cx43的表达和功能受多种因素的调节,丝裂原激活的蛋白激酶(MAPKs)是主要的调节途径。本文就Cx43在肺的病理生理过程中的作用及MAPK对其调节作用进行综述。     

MRSA感染性创面菌群结构分析

目的探究耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)感染性创面与创面旁菌种组成的差异并寻找可能的有益菌,为从皮肤微生态角度治疗MRSA感染性创面提供理论依据。方法采集湖南省人民医院MRSA感染性创面及创面旁的皮肤样本,其中创面部位样本22份为D组,创面旁样本11份为N组,提取样本DNA,采用高通量测序技术对16S rRNA基因V3-V4区测序并进行生物信息学分析。结果根据Alpha多样性分析,D组的Chao1指数、Ace指数和Shannon指数明显低于N组(Z=62, P=0.023 8；Z=66, P=0.035 9；Z=30, P=0.000 2),而Simpson指数明显高于N组(Z=211, P=0.000 3)。Beta多样性分析显示2组皮肤菌群组成具有差异,表明分组合理(R=0.584 3、0.467 3, P=0.001 0)。D组葡萄球菌属(Staphylococcus)及韦荣球菌属(Veillonella)丰度显著性升高(Z=213, P=0.000 5；Z=48.5, P=0.004 8),其他常驻菌群均下降。N组的乳杆菌属(Lactobacillus)相对丰度均值较D组高(Z=38, P=0.000 8)。结论MRSA感染性创面的菌群结构较创面旁组具有一定变化,Lactobacillus为皮肤有益菌,可能对创面的恢复有益。     

乙酰氨基半乳糖转移酶14多抗的制备及鉴定

利用生物信息学方法分析乙酰氨基半乳糖转移酶14(GALNT14)蛋白序列, 根据亲水性、抗原性、柔韧性及表面性等指标选择一段多肽序列作为抗原用于抗体制备。将该DNA片段插入pET-DsbA,构建原核表达载体pET-DsbA-GALNT14。用IPTG诱导表达蛋白,经镍柱纯化蛋白后免疫新西兰大白兔,获得GALNT14多克隆抗血清。用免疫扩散和免疫印迹检测抗体效价及特异性。结果显示,成功表达并纯化了目的蛋白。免疫动物后获得了效价较高、特异性强的GALNT14多克隆抗体,GALNT14蛋白在人乳腺癌和肾癌细胞株中均有表达。该结果为进一步研究GALNT14的功能及其在肿瘤发生发展的作用方面奠定了基础。