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胚胎干细胞(embryonic stem cells,ESCs)是从囊胚的内细胞团分离出来的多潜能干细胞,具有多向分化的能力。将外源基因导入ES细胞建立转基因动物,对于研究外源基因的功能和调控具有一定的价值。载有外源性基因的病毒在感染ES细胞后,可通过囊胚注射获得具有胚系遗传的该转基因动物,并且这一外源基因可以稳定遗传和表达。该研究主要是利用携带hPML-RARα基因的慢病毒感染小鼠ES细胞系(R1),获得携带该基因的ES细胞,感染后的ES细胞核型正常。在此基础上,将感染后的ES细胞经囊胚注射,获得了携带有hPML-RARα基因的3只嵌合小鼠,其中,有1只具有遗传特性。对嵌合体小鼠与C57杂交的后代给予强力霉素(doxycycline)处理,3天以后骨髓细胞hPML-RARα基因开始表达,这证明了在小鼠体内该外源基因表达的可诱导性。以上证实,已经成功利用ES细胞建立了可诱导的白血病转基因小鼠模型。 相似文献
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An antisperm monoclonal antibody 6B10 was produced by hybridoma technique of the isotype IgG. The monoclonal antibody was purified by means of ammonium sulfate precipitation and protein A-Sepharose Cl-4B affinity chromatography. SDS polyacrylamide gel electrophoresis was used to evaluate the purity of the antibody. Evaluation of the sperm acrosomal status was determined by chlortetracycline (CTC) staining. It was found that monoclonal antibody 6B10 can inhibit the sperm acrosome reaction induced by progesterone. The corresponding antigen recognized by monoclonal antibody 6B10 was located on the plasma membrane of the sperm acrosome by indirect immunofluorescent microscopy and immunoelectronmicroscopy. Sperm protein was extracted by 1% Triton X-100. The molecular weight of the antigen is 50 ku, detected by Western blot. The antigen is a key protein in the sperm acrosome reaction and may be the receptor of progesterone on the sperm acrosome. It may either be developed as a candidate contraceptive vaccine 相似文献
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多能干细胞(pluripotent stem cell,PSC)是一类具有自我更新能力和多向分化潜能的细胞,具有广泛的临床应用前景.诱导性多功能干细胞(induced pluripotent stem cell,iPS cell)的获得,解决了传统方式中的细胞来源和伦理学等问题,从理论研究和应用上实现了体细胞重编程的重大突破,也为疾病发生机制研究、药物筛选、个性化药物选择、细胞治疗和再生医学等研究创造了难得的机会,从而开启了多能干细胞应用的新纪元.iPS过程中有很多问题尚未得到解决,尤其是诱导重编程的分子机制方面,这也是近年来干细胞领域研究的热点.其中如何实现表观遗传的重编程被认为是亟待解决的核心问题之一.本文结合我们的研究,主要介绍诱导重编程领域表观遗传修饰重塑机制的研究进展,并展望未来研究中大规模信息整合分析的重要性. 相似文献
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体细胞重编程是生命科学以及再生医学领域的研究热点之一,目前包括体细胞核移植、细胞融合和转录因子诱导等几种方法都可以实现体外重编程。数量众多的表观遗传修饰在重编程过程中发挥着关键作用,因此,了解表观遗传修饰的动态变化以及各自的作用有助于更好地理解、优化以及运用重编程技术。该文简要阐述了体细胞核移植技术和诱导多能干细胞技术的发展历程和研究进展,并讨论这两种重编程过程中的表观遗传调控机制。 相似文献
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用Hoechst33342标记及氨银反应的方法在光镜和电镜水平上研究不同发育阶段的小鼠卵母细胞转化精核的能力。生发泡期卵母细胞质不能诱发精子组蛋白替代鱼精蛋白及精核解聚。生发泡破裂后,卵母细胞获得使精核解聚的能力,但直到卵母细胞完成成熟前,雄原核均不能形成。进一步研究表明,卵母细胞成熟过程中持续的蛋白质合成是雄原核形成所必需的,鱼精蛋白质磷酸化是精核解聚中的关键步骤。 相似文献
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卵母细胞成熟过程中伴随有多种蛋白质的合成与磷酸化,蛋白质的合成对卵细胞的成熟具有重要作用。本实验较系统地阐述小鼠卵母细胞体外成熟培养的不同阶段蛋白质合成对卵母细胞成熟的影响。放线菌酮是肽链延伸的抑制因子。将生发泡(GV)期的卵母细胞分别于T6成熟培养液中培养0、4、6、9小时后,转至含有10mg/ml放线菌酮的T6成熟培养液继续培养1215小时。固定、染色、观察卵母细胞。结果如Table1。0小时实验组:抑制处理4小时,其生发泡破裂(GVBD)发生率与对照组无明显差异。表明:卵母细胞GVBD所需蛋白质(如:成熟促进因子MPF等)是在卵巢的卵泡卵母细胞生长过程中完成的。4、6小时实验组:笫一极体的释放被完全抑制,卵母细胞不能达到MI期,染色质处于凝集状态(Fig.3&4)。表明:GVBDMI期间所需蛋白质的合成对卵母细胞MI期中期纺缍体的形成与维持具有重要作用。9小时实验组:可能由于卵母细胞发育速度存在个体间的差异。没有进入MII期的便停滞于MI期以前。进入MI期的则能排出笫一极体。因此,笫一极体的释放总体上呈不完全抑制状态,其释放率低于对照组。但是,后者虽然弪过恢复培养至15小时,可能由于微管蛋白的合成 相似文献
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6-Dimethylaminopurine(6-DMAP) Spontaneously Induces Interphase Transition Of Metaphase Mouse Oocytes
6-Dimethylaminopurine(6-DMAP)SpontaneouslyInducesInterphaseTransitionOfMetaphaseMouseOocytes¥SUNQing-yuan(孙青原);GAOShao-rong(高... 相似文献