HIV-1 C／B’亚型多价重组MVA病毒疫苗免疫原性的研究

目的:检测人类免疫缺陷病毒1型(HIV-1) C/B'亚型与痘苗病毒安卡拉株(MVA)的多价重组疫苗的免疫原性,此疫苗中包含HIV-1 C/B'CRF 株的5个基因,分别是env,gag,pol,nef,tat.方法:设105pfu/ml,106 pfu/ml,107 pfu/ml ADMVA 3个剂量组,用ELISPOT方法检测细胞免疫反应.同时,以Gag蛋白作为包被抗原,使用间接ELISA的方法检测体液免疫反应.结果:免疫后的小鼠对插入基因env,gag,pol和nef所表达蛋白均产生了特异性细胞免疫应答,且免疫效果与免疫剂量呈正相关.ELISA结果表明, MVA重组疫苗免疫诱导产生了特异性体液免疫,抗HIV-1Gag的抗体滴度与免疫次数和免疫剂量都存在正相关性.结论:多价MVA重组疫苗能有效地诱导小鼠产生特异的细胞免疫和体液免疫反应.     

不同精氨酸添加水平对哺乳仔猪生长性能的影响

为了研究日粮中不同精氨酸(Arg)水平对哺乳仔猪生长性能的影响,试验选用70头7日龄健康哺乳仔猪(长×大),按照所饲日粮精氨酸添加水平的不同(分别为0、0.2%、0.4%、0.6%和0.8%),随机分为5组,每组14头,单栏饲养,试验期为14 天,并分别于7、14和21日龄空腹称重,记录每周采食量;并在采食后1 h颈静脉采血,检测血浆中氨基酸、血浆尿素氮、胰岛素和生长激素浓度.结果表明:7～21日龄段,试验组血浆精氨酸浓度随日粮精氨酸添加水平增大而升高,与对照组相比,0.6%和0.8%精氨酸添加组血浆尿素氮水平分别降低(P<0.05)30%～40%,生长激素和胰岛素的浓度提高(P<0.05)24%～27%,平均日增重分别提高了(P<0.05)42.2%和41.4%;各组采食量在整个试验期内无显著差异.本试验结果表明7～21日龄,仔猪日粮中精氨酸适宜添加水平为0.6%.     

洱海沿岸带刚毛藻群落的特性分析

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农杆菌GV3101中反式玉米素合成基因促进烟草再生

胭脂碱型农杆菌GV3101已经被广泛用于植物遗传转化研究。已有的研究结果证明,农杆菌GV3101株系含有的反式玉米素合成 (trans-zeatin synthesizing,tzs)基因编码产物会影响烟草细胞器的形态及细胞的生理状态。然而,有关tzs基因对遗传转化过程外植体再生的影响研究却少有报道。本文在前期研究工作的基础上,以2种烟草、4个农杆菌株系为组培实验材料,验证了胭脂碱型农杆菌tzs基因产物的生理活性。结果表明：以外源添加生长调节物质的外植体为阳性对照,在不添加任何生长调节剂的培养基上,与GV3101菌株共培养的烟草外植体能分化再生,并发育成完整植株;外植体再生与GV3101携带的质粒种类无关;外植体与农杆菌GV3101培养液共培养24 h,烟草再生效果较好;与GV3101株系共培养24 h,将外植体烟草叶片匀浆,经亲和柱分离纯化后,检测出烟草外植体叶片中高达0.78 ng/g FW-1的反式玉米素含量。菌落PCR扩增结果证实,农杆菌GV3101株系有tzs基因序列。以上结果表明,农杆菌GV3101株系内的tzs基因的表达产物有生理学活性,能够促进烟草外植体再生,调节细胞生长。     

甲烷氧化过程中铜的作用研究进展

甲烷生物氧化在全球甲烷平衡和温室效应控制中扮演着重要的角色,而铜是甲烷生物氧化过程中的重要影响因子.一方面,铜是调控不同类型甲烷单加氧酶表达的主要影响因子,是组成颗粒性甲烷单加氧酶的必需金属元素;另一方面,在自然环境体系中,铜含量及其形态的变化对甲烷氧化菌的分布、代谢甲烷和非甲烷类有机化合物的能力以及甲烷氧化菌的特异性铜捕获系统也会产生较大影响.准确把握铜在甲烷生物氧化过程中发挥的作用将有助于全面了解甲烷生物氧化过程,进而更好地指导甲烷氧化微生物在温室气体减排及非甲烷有机物污染修复中的应用.本文主要从铜的角度,概述了铜对甲烷氧化菌的分布和活性的影响,介绍了铜在调控甲烷单加氧酶的表达和活性以及调节甲烷氧化菌铜捕获系统方面的作用,并展望了其研究方向.     

云南汉族HLA-DRB1多态性分析及与9个汉族群体的比较

主要应用聚合酶链反应—微孔板杂交(Polymerase Chain Reaction and Microtitre Plate Hybridization,PCR-MPH)的方法对云南129个无亲缘关系的汉族样品进行了HLA-DRB1的遗传多态性分析,对MPH初分出的DRB1*15组的样品进行了单链构象多态（Single-Strand Conformation Polymorphism, SSCP）检测。共发现36种等位基因,其中等位基因频率大于0.05的有DRB1*1501(0.1240),DRB1*09012(0.0969),DRB1*08032(0.0930),DRB1*1202(0.0891),DRB1*1201(0.0814),DRB1 *1401(0.0775),DRB1 *0701(0.0620)。云南汉族HLA-DRB1等位基因频率与中国其他9个汉族群体进行χ²检验,结果显示与云南汉族比较χ²>10的有西安汉族（DR8,χ²=13.9712）、上海汉族（DR4,χ²=10.1632）、广东汉族（DR9,χ²=12.6121）和南京汉族（DR4,χ²=10.5796）。从遗传距离分析发现,在9个国内汉族群体中云南汉族与辽宁汉族有最近的距离（0.0541）,而与广东汉族最远（0.1851）。云南汉族在构成上可能与辽宁汉族更为接近,尽管地处南方,但已不属典型的南方汉族。这也可能因云南汉族与当地的少数民族存在基因交流,从而形成了一个较为特殊的群体。     

日本迷你南瓜的组织培养及快速繁殖

1植物名称日本迷你南瓜(Cucurbitapepo),日文名为プツチィ一二,英文名为Puccini. 2材料类别带节茎段、子叶苗茎尖. 3培养条件基本培养基为改良MS(2倍FeSO4·7H2O和KH2PO3).芽诱导培养基:(1)改良MS 6-BA 1.0mg·L-1(单位下同),(2)改良MS 6-BA 1.0 NAA 0.1;增殖继代培养基:(3)改良MS 6-BA 0.8 IBA 0.05;壮苗培养基:(4)改良MS 6-BA 0.2;生根培养基:(5)1/2改良MS IBA0.6,(6)1/2改良MS NAA0.6.培养基中均添加绵白糖3%、琼脂粉0.6%,pH 6.0.培养温度为(25±2)℃,光照度2 500～3 000 lx,光照时间为14 h·d-1.     

lncRNA XIST-miR137-ATG5调节细胞自噬功能在肠癌细胞5-氟胞嘧啶耐药性中的作用

摘要 目的：本文旨在研究长链非编码RNA XIST-miR137-ATG5的相互作用,同时探讨其调节细胞自噬功能与肠癌细胞5-氟胞嘧啶敏感性的关系。方法：实时聚合酶链反应(real time PCR)检测XIST与miR-137在肠癌细胞中的表达;采用脂质体转染法将si-XIST,miR-137转染入肠癌SW480及HCT116细胞中。采用CCK-8检测瞬时转染si-XIST对肠癌细胞增殖及5-FU敏感性的影响;并利用双荧光素酶报告实验检测miR-137与XIST, miR-137与ATG5相互关系。Western blot方法检测XIST- miR137- ATG5对细胞自噬的影响。结果：与正常结肠细胞FHC比较, XIST在结肠癌细胞系明显高表达,miR-137在结肠癌细胞系明显低表达。与阴性对照组比较,转染si-XIST后,SW480及HCT116细胞增殖能力明显受到抑制,对F-5U的敏感性增强,且抑制自噬蛋白Beclin-1及LC3II/LC3 I的表达。miR-137可与XIST,ATG5 3''UTR结合,抑制XIST和ATG5的表达及功能。在结肠癌SW480细胞中共转染miR-137 inhibitor或过表达ATG5可逆转XIST沉默引起的5-FU耐药,同时可逆转因XIST沉默引起的自噬蛋白表达的抑制。结论：LncRNA XIST或可通过调控mir137-ATG促进结直肠癌细胞SW480自噬从而提高其对5-FU的耐药,针对其这一机制,可为将来针对结肠癌的靶向治疗提供一定的实验基础。     

HBI-8000诱导成人T细胞白血病/淋巴瘤的细胞凋亡与Bim和NLRP3活化的相关性

本研究通过评估HBI-8000对日本ATL患者ATL细胞系和原代细胞的作用,来研究HBI-8000诱导成人T细胞白血病/淋巴瘤的细胞凋亡与Bim和NLRP3活化的相关性。选取若干侵袭型ATL患者作为研究对象,口服新型HBI-8000,跟踪并分析药物效果。研究表明,在大多情况下,HBI-8000在原代ATL细胞和细胞系中诱导细胞凋亡。Bim活化、NLR族、NLRP3炎症体通道对HBI-8000诱导ATL细胞死亡具有重大作用。实验为临床研究HBI-8000对ATL患者的疗效提供了理论基础。NLRP3可用于癌症新型治疗策略研究,但对ATL细胞死亡的作用仍有待验证。     

饥饿对尼罗罗非鱼肌肉和肝KLF15基因节律性表达的影响

Krüppel样转录因子15 (Krüppel-like factors,KLF15)是Krüppel样转录因子家族的一员。Krüppel样转录因子家族的特征是含有3个高度保守的Cys2His2锌指结构,与DNA的CACCC元件和富含GC区连接,从而调控转录激活或抑制。KLF15在糖、脂肪酸、氨基酸代谢过程中发挥重要的调控作用。本研究克隆了尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus) KLF15基因全长cDNA序列,根据推测的氨基酸序列分析,发现其具有KLF15的两个典型结构域zf-H2C2-2和zf-C2H2。系统进化树的比较分析表明,尼罗罗非鱼KLF15与雪鲷(Maylandia zebra) KLF15亲缘关系最为接近。尼罗罗非鱼短期饥饿实验结果显示:正常进食状态时尼罗罗非鱼肌肉、肝中KLF15基因都呈现明显的昼夜节律性,均为昼低夜高;饥饿7 d后KLF15基因依然有显著昼夜节律性,但振幅降低,且在肝中表现出昼高夜低现象。以上结果说明尼罗罗非鱼的营养变化在一定程度上直接或间接影响KLF15基因节律性表达。