A549肺癌细胞株中癌睾丸抗原的表达及生物学意义研究

目的:癌睾丸抗原(cancer-testis antigen,CTA)是一类主要表达于睾丸组织和癌组织,并具有较强诱导体液和细胞免疫应答能力的抗原,可以作为抗肿瘤的理想靶分子。本研究探讨了A549肺癌细胞系中CTA的表达情况及其生物学意义。方法:本研究中选取了A549肺癌细胞株,运用RT-PCR的方法检测了其中九种常见CTA的表达情况,进一步通过AV-PI双染法观察了表柔比星,紫杉醇,卡铂,伊立替康,依托泊苷五种化疗药物对A549细胞的凋亡作用及其调控CTA表达的情况。另外用转化生长因子β1(TGF-β1)处理A549细胞,验证了TGF-β1促进细胞生长的作用,进一步检测此时CTA的表达调控。结果:结果显示MAGEA1,MAGEA3,MAGEC1,HCA661在A549细胞系中稳定表达,表柔比星能够强烈诱导细胞发生凋亡,其诱导作用岁浓度增高而增强。表柔比星下调了MAGEA1,MAGEA3,MAGEC1的表达,对HCA661的表达无影响。TGF-β1增强了肿瘤细胞增殖能力,与此同时下调HCA661的表达,对MAGEA1,MAGEA3,MAGEC1的表达无影响。结论:MAGEA1,MAGEA3,MAGEC1,HCA661在肺癌细胞系A549中稳定表达。TGF-β1作用48小时,使HCA661的表达下调,MAGEA1,MAGEA3,MAGEC1的表达无变化。表柔比星作用48小时,使MAGEA1,MAGEA3,MAGEC1的表达下调,HCA661表达无影响,卡铂,紫杉醇,伊立替康,依托泊苷对CTA的表达无调控,为进一步明确CTA的表达调控机制奠定了研究基础,同时为将HCA661作为临床中诊断与治疗的新靶点提供了可行性。     

应用同工酶进行沙拐枣属植物亲缘关系和分类的研究

采用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术．对沙拐枣属(Calligonum L．)19个种的3种酶：过氧化物酶(PER)、酯酶(EST)、酸性磷酸酶(ACP)的同工酶进行了测定分析．结果表明3种酶的同工酶在19个沙拐枣种间表现出明显差异。通过对酶谱特征进行数量化分级,根据种间欧氏距离,应用类平均法(UPGMA)对l9个沙拐枣种进行系统聚类。结果表明：所有种明显聚为4组,第1组包括泡果沙拐枣(C．junceum);第2组包括心形沙拐枣(C．cordatum)、密刺沙拐枣(C．densum)、昆仑沙拐枣(C．roborowskii)、白皮沙拐枣(C．1eucotladum)、红皮沙拐枣(C．rubicundum)和奇台沙拐枣(C．klementzii);第3组包括头状沙拐枣(C．caput-medusae)、乔木状沙拐枣(C．arborescens)、艾比湖沙拐枣(C．ebi-nuricum)、三列沙拐枣(C．trifarium)、蒙古沙拐枣(C．mongolicum)和小果沙拐枣(C．pumilum);第4组包括柴达木沙拐枣(C．zaidamense)、若羌沙拐枣(C．rouqiangense)、阿拉善沙拐枣(C．alaschanicum)、河西沙拐枣(C．potaninii)、戈壁沙拐枣(C．gobicum)和甘肃沙拐枣(C．chinense)。同工酶资料聚类结果与传统的形态学分类结果相比,有一定的差异。     

红皮沙拐枣种群间的形态变异分析

调查和测定了中国西北荒漠地区的红皮沙拐枣(Calligonum rubicundum)5个种群的形态变异特征,应用方差分析、主成分分析和聚类分析方法．分别对其形态因子进行了单元和多元分析。结果表明,种群间16个形态指标中的15个具有显著性差异．而多元方差分析的种群间形态变异的差异性较小。灌高、种子重量和灌幅指标具有很强的形态变异性分析意义。种群间的形态差异(欧式距离)与种群问基因流动(地理距离)间没有发现相关关系。来自宁夏的R5种群在形态聚类分析巾较为孤立,其它4个来自新疆的种群具有较近的相似关系。     

活化相关分泌蛋白1单克隆抗体的制备及其在保守结构域鉴定中的应用

目的:制备重组活化相关分泌蛋白1(ASP-1)的单克隆抗体,并用其鉴定保守结构域。方法:用原核表达并纯化的重组ASP-1不加佐剂免疫BALB/c小鼠,采用杂交瘤技术及有限稀释传代法筛选稳定分泌特异性抗体的杂交瘤细胞株,制备单抗腹水后用间接ELISA进行抗体特异性鉴定和效价检测,利用肽结合ELISA和Western印迹鉴定单抗识别的保守结构域。结果:获得5株能稳定分泌抗ASP-1单克隆抗体的杂交瘤细胞株,且5株单抗的识别区域均为21~28氨基酸残基的保守性结构域。结论:制备了抗ASP-1的单克隆抗体,为深入研究ASP-1佐剂的活性功能区及作用机制提供了有效工具。     

不同长度热消散探针测定粉单竹(Bambusa chungii)液流的差异分析和原位验证

由于竹壁较薄,测定液流时安装常规长度(20 mm)的TDP探针易穿破竹壁。与木材的热传导不同,暴露于竹腔内的部分上探针的热量以辐射形式消散,加之竹壁水分传导分子的分布不均匀,导致液流密度的测定值不准确。因此,不少学者主张选用较短的探针,然而,对于改短探针的应用缺乏必要的户外原位验证。本文分析自制的5、8和10 mm的TDP探针原位测定粉单竹液流的适用性和理论依据。结果表明:新建立的液流密度公式与Granier原始经验公式的参数α值的差异较大,主要原因是竹腔的储热效应导致上探针周围温度偏高,竹秆水分含量较低,热消散系数(h0)较小,上探针周围的热量囤积致使上下探针的温差较大;此外,探针的安装方式也影响液流密度的测定结果,是导致相同长度探针测定粉单竹液流密度值明显差别的重要因子。本文通过分析探针周围介质的h0的变化,较合理地解释了这些差异的原因。     

海南地区番木瓜花叶病病原的分子鉴定与多样性分析

番木瓜环斑病毒(Papaya ring spot virus,PRSV)和番木瓜畸形花叶病毒(Papaya leaf-distortion mosaic virus,PLDMV)是热带、亚热带地区严重威胁番木瓜农业生产的主要病害。本研究对27份疑似番木瓜花叶病病叶样品进行分子鉴定,提取病叶总RNA,反转录获得对应的cDNA,根据PRSV病毒的CP、P1、Hc-Pro和NIb基因序列和PLDMV病毒的CP基因序列设计特异性引物进行PCR检测和测序分析。研究发现PRSV感染20例(74.1%),PLDMV感染3例(11.1%),PRSV和PLDMV交叉感染的样品1例(3.7%)。多样性分析结果表明,海南地区PRSV病毒存在3个株系,株系之间出现明显分化;海南地区PLDMV病毒与日本和台湾地区报道的PLDMV病毒株系有共同的起源。研究结果表明PRSV和PLDMV是海南地区番木瓜花叶病的主要病原,其中PRSV病毒3个株系之间P1基因同源性在95%以下,这可为后续研究构建抗PRSV和PLDMV的双价表达载体提供数据支持。     

小剂量多西环素联合强脉冲光对中重度痤疮患者皮损症状、炎性反应及Acne-QOL评分的影响

摘要 目的：观察小剂量多西环素联合强脉冲光对中重度痤疮患者皮损症状、炎性反应及痤疮特异性生活质量量表（Acne-QOL）评分的影响。方法：按照随机数字表法将江苏大学附属宜兴医院2020年3月~2021年5月期间接收的97例中重度痤疮患者分为对照组（小剂量多西环素治疗,n=48）和研究组（小剂量多西环素联合强脉冲光治疗,n=49）。对比两组疗效、皮损症状改善情况、炎性反应及Acne-QOL评分。结果：两组治疗后,研究组的临床总有效率（93.88%）高于对照组（77.08%）（P<0.05）。粉刺、炎性丘瘆、脓疱、囊肿、结节数目减少,且研究组低于对照组同期（P<0.05）。两组治疗后肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、超敏C反应蛋白（hs-CRP）、白细胞介素-8（IL-8）、降钙素原（PCT）下降,且研究组低于对照组同期（P<0.05）。两组治疗后情感功能、自我感知、社会功能、痤疮症状评分升高,且研究组高于对照组同期（P<0.05）。两组不良反应发生率对比无差异（P>0.05）。结论：小剂量多西环素联合强脉冲光可有效改善中重度痤疮患者的皮损症状,减轻机体炎性反应,从而有利于患者生活质量的提高。     

巨大芽孢杆菌BP931胞外青霉素G酰化酶的产生条件

研究了巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium)BP 931胞外青霉素G酰化酶的产生条件。菌在由葡萄糖0.7％,氮源1号0.5％,酵母膏1.0％和苯乙酸0.8％组成的液体培养基(灭菌前pH9.0,灭菌后pH8.0)中,28℃振荡培养44h。以6-硝基-3-苯乙酰胺基苯甲酸为底物,培养滤液酶活力为9.0IU/ml。诱导物苯乙酸于培养6h后加入,酶活力可以提高到11.0IU/ml。Ca²⁺、Al³⁺、Sn³⁺、Mn²⁺和Fe²⁺离子降低酶的形成;Cu⁺和C0²⁺离子显著抑制菌生长,降低酶的形成;Zn²⁺,Cd²⁺和Hg²⁺离子完全抑制菌生长和酶形成。     

氮碳添加和丛枝菌根对外来入侵植物豚草的影响

通过温室控制试验,研究了氮碳素添加及丛枝菌根(AM)对外来入侵植物豚草生长的影响.结果表明： 氮素添加对豚草的形态指标、生物量及其分配特征和生长速率均没有显著影响,却使豚草地上器官和根的氮含量显著增加;碳素添加增加了土壤中的有效氮含量,促使豚草增加营养吸收器官的生物量分配以缓解养分(氮素)胁迫,导致分枝数、总叶面积、比叶面积和叶生物量比明显降低,总生物量显著减少.豚草与AM真菌共生增强了其适应土壤氮素变化的能力,增加了比叶面积,提高了豚草的资源获取能力,其作用在土壤有效氮含量低时更加明显.AM真菌对豚草适应低氮生境有着重要意义.