2000-2015年丹顶鹤重要繁殖地景观格局变化研究

以18个自然保护区为研究对象,全面系统地研究了我国丹顶鹤大陆种群重要繁殖地景观格局变化,结果表明：2000-2015年丹顶鹤重要繁殖地土地利用变化明显,突出表现为沼泽湿地面积急剧减少了1400.5 km²,主要转化为耕地、水体和草地,耕地面积大幅增加了1085.4 km²,主要由沼泽湿地、草地和林地转化而来;丹顶鹤重要繁殖地2000-2015年景观连通性保持稳定,但吉林莫莫格、黑龙江七星河、挠力河等自然保护区景观破碎化程度明显增加;东部种群重要繁殖地沼泽湿地缩减面积和不适宜生境增加面积均大于西部种群,表明东部种群繁殖地的恶化程度更为严重,需引起高度关注。首次基于长时间序列对丹顶鹤大陆种群繁殖地的变化开展了较为全面的研究,为有针对性地开展栖息地保护管理工作、促进丹顶鹤野生种群健康可持续发展提供了依据。     

短短芽孢杆菌几丁质酶BBChi4基因的原核表达及抑菌活性研究

采用生物信息学方法分析短短芽孢杆菌GZDF3菌株几丁质酶BBChi4基因,以GZDF3菌株全基因组DNA为模版设计特异性引物,通过PCR扩增出BBChi4基因的全序列并对其测序验证。将测序验证无误的基因序列连接到原核表达载体(pET-28a),构建重组表达载体pET-28a-BBchi4,转入大肠杆菌BL21进行诱导表达,利用打孔法对诱导表达产物进行抑菌活性研究。生物信息学分析显示BBChi4基因全长为2 181 bp,编码726个氨基酸,分子量大小为77.69 kD,等电点为4.83,属于酸性几丁质酶。破碎重组表达菌体上清液SDS-PAGE电泳显示,重组蛋白质分子量大约为78 kD,与生物信息学预测结果一致。诱导表达最佳参数为1 mmol/L IPTG,30℃诱导4 h。破碎重组表达菌体上清液对半夏致病真菌(尖孢镰刀菌)有较强的拮抗作用。重组表达载体pET-28a-BBchi4的成功构建及表达为深入研究几丁质酶的功能提供科学依据。     

斑马鱼蛋白酪氨酸硫酸化修饰的检测方法研究

蛋白酪氨酸硫酸化(protein tyrosine sulfation, PTS)是一种重要的翻译后修饰,调控生命活动中多种生理和病理过程,但由于PTS状态不稳定且目前缺乏有效的富集方法,因此在生物样品中难以进行有效地检测。本研究以模式动物斑马鱼(Danio rerio)为研究材料,利用Orbitrap Exploris 480高分辨质谱仪检测了斑马鱼胚胎发育早期总蛋白的酪氨酸硫酸化修饰水平,通过该方法共计检测到26种蛋白(包括膜蛋白、分泌蛋白、胞质蛋白和核蛋白等)存在潜在的29个酪氨酸硫酸化修饰位点。本研究建立了斑马鱼胚胎发育早期蛋白酪氨酸硫酸化修饰的检测方法,为探索生物体蛋白硫酸化修饰的作用机制奠定了技术基础。     

甘遂中激活NF-κB信号通路的化学成分

采用95%乙醇对甘遂进行提取,溶剂回收后得总浸膏;然后采用不同极性的有机溶剂进行萃取得萃取物;将总浸膏和各萃取物进行激活NF-κB信号通路活性检测;选取激活作用最强的氯仿萃取物进行硅胶柱层析,TLC检测合并;将得到的各部位进行进一步的激活NF-κB信号通路测试;结果表明激活作用最强的部位为非极性部位,因此我们采用GC-MS技术分离并鉴定了56个化合物,占总量的99.72%,主要成分为脂肪酸及其衍生物、长链烷烃及其衍生物,还有单萜、倍半萜类、芳香族类和脂肪醛等。在激活NF-κB信号通路的指导下,我们从甘遂非极性部位分析并鉴定了其中的促炎成分如(Z)-7-Hexadecenal和7,11-Hexadecadienal等,这些成分激活NF-κB信号通路的表达,从而引起炎症因子的释放,导致炎症,从上述非极性部位中还分析了部分毒性物质,为阐明甘遂的毒效物质基础提供了参考。     

酪蝇交配行为和能力

在(27±1)℃,光周期L∶D=12∶12的条件下对酪蝇Piophila casei L.交配行为及能力进行了研究。结果表明,雌虫在羽化1min后即可交配,而雄虫在羽化30min后进行交配。进一步观察结果表明,羽化后80min的两性成虫交配率最高(90%),成虫一天之中的交配高峰期出现在10∶00—11∶00,次高峰出现在11∶00—12∶00。两性交配持续时间从4～9min不等,以5min为最多(43.3%),6min次之(23.3%)。一般情况下,雌虫一生只交配1次,雄虫从1～7次不等,但以2次为最多(45%),3次的次之(20%)。     

一种贴壁培养细胞制片方法

细胞形态分析以及免疫组织化学技术中一个必不可少的操作过程,就是细胞制片,即把细胞附着于透明的支撑物上（比如：玻璃、塑料等）,大部分的细胞制片是对离体组织细胞进行固定切片处理．而对于科研、教学等基础实验室的少量培养细胞制片．则需要有更合适的技术。     

海拔对滇重楼种子大小和数量的影响

种子大小和数量关系是植物繁殖对策研究的重要问题之一。为了解不同海拔下滇重楼(Pairs polyphylla var.yunnanensis)种子数量和大小的差异及其关系,以云南省普洱地区滇重楼为研究对象,对该地区景东(海拔1984 m)和镇沅(海拔1025 m)2个不同海拔点滇重楼种子数量与大小进行比较研究。结果表明:不同海拔下滇重楼果实内种子总数差异不显著(P0.05),但景东县滇重楼果实内饱满种子数量显著高于镇沅县(P0.05),败育种子数显著低于镇沅县(P0.01),种子百粒重以镇沅县高于景东县(P0.05);不同海拔下滇重楼种子败育与种子数量和大小的关系不一致,低海拔试验点种子败育率与种子数量呈极显著正相关关系(P0.01),而高海拔试验点种子败育率则与种子大小呈显著正相关关系(P0.05);不同海拔下滇重楼果实内种子数量与大小呈显著或极显著负相关,即滇重楼果实内种子数量与大小在不同海拔下均存在权衡关系,但海拔1025 m试验点的回归斜率显著低于海拔1984 m试验点(P0.05),表明滇重楼种子数量和大小之间的权衡关系对海拔的响应具有敏感性。     

真菌DWL-C010的鉴定及其可溶性红色素热稳定性分析

从广西大王岭自然保护区内原始森林土壤中分离得到一株能够产可溶性红色素真菌 DWL-C010,通过形态特征和多基因位点系统发育分析对其进行了鉴定,并分析了该菌红色素的热稳定性,同时还测定了其纤维素半纤维酶和糖化酶酶活。结果表明,菌株 DWL-C010 形态特征与白二轮蓝状菌基本一致,且其 ITS、RBP2、RBP1 和 Ben A 序列与白二轮篮状菌 CBS133440T相应序列的一致性均高达 99%,Ca M 序列相似性为 96%,并且在系统发育树中二者均聚在了一起,故将其鉴定为白二轮篮状菌。菌株DWL-C010 红色素具有较好的热稳定性,其不同温度下的热解常数与时间具有良好的线性关系,符合一级动力学模型 ;依赖温度的热降解常数也符合 Arrhenius 模型,其活化能为 51.82 k J·mol-1。此外,菌株 DWL-C010 第 6 天的木聚糖酶、纤维素内切酶及糖化酶酶活依次为 33.098、1.880 和 0.976 U/m L。     

三种内分泌细胞在极北鲵幼体胃内的发育

采用免疫组织化学亲和素-生物素复合物(ABC)法研究极北鲵(Salamandrella keyserlingii)41至46期共6个时期幼体胃内5-羟色胺(5-HT)细胞、生长抑素(SS)细胞和胃泌素(GAS)细胞的分布位置及形态,5-羟色胺细胞和胃泌素细胞最先在41期幼体被检测出来,而生长抑素细胞发育略晚,在42期幼体才被检测到。文中采用Duncan多重比较的方法,对胃内同一种内分泌细胞不同发育时期的分布密度进行统计学分析,5-羟色胺细胞在41期分布最少,密度为1.2±0.51,46期分布最多,密度为2.3±0.91,随着胃的发育,5-羟色胺细胞密度呈递增的变化趋势;胃泌素细胞在42期分布最多,密度为2.1±0.99,46期分布次之,密度1.7±0.49,44期分布最少(密度1.0±0.00),从42期到46期呈先减后增的变化趋势;而生长抑素细胞在43期密度(2.6±0.99)高于其他各期,且差异显著(P0.05)。三种内分泌细胞最先均出现在胃上皮细胞之间,随着胃的不断发育,除了在上皮细胞之间分布以外,在腺泡上皮之间也有分布。不同内分泌细胞随着发育时间的不同,细胞形态也表现不同,如5-羟色胺细胞由最开始的椭圆形到后期的锥体形,胃泌素细胞由最先出现的锥体形到椭圆形再到锥体形,生长抑素细胞由锥体形到椭圆形。上述三种内分泌细胞的分布及形态学特点可能与极北鲵的生长发育以及胃的功能相适应。     

天丹通络胶囊联合丁苯酞软胶囊治疗急性脑梗死的疗效及对炎症因子和脑血流动力学的影响

摘要 目的：探讨天丹通络胶囊联合丁苯酞软胶囊治疗急性脑梗死（ACI）的疗效及对炎症因子和脑血流动力学的影响。方法：按照随机数字表法将合肥市第一人民医院2019年1月-2021年12月间接收的100例ACI患者分为对照组（50例,丁苯酞软胶囊治疗）和观察组（50例,天丹通络胶囊联合丁苯酞软胶囊治疗）。对比两组疗效、量表评分、炎症因子和脑血流动力学,统计两组治疗期间不良反应发生率。结果：观察组84.00%的临床总有效率高于对照组66.00%（P<0.05）。与对照组比较,治疗后观察组Barthel指数评分升高,美国国立卫生研究院卒中量表（NIHSS）评分降低（P<0.05）。观察组治疗后的白介素-6（IL-6）、超敏C反应蛋白（hs-CRP）低于对照组,白介素-10（IL-10）高于对照组（P<0.05）。观察组治疗后的阻力指数（RI）低于对照组,脑血流收缩期峰值血流速度（Vs）、平均血流速度（Vm）、舒张期血流速度（Vd）较对照组高（P<0.05）。不良反应发生率组间对比无差异（P>0.05）。结论：天丹通络胶囊联合丁苯酞软胶囊有助于降低ACI患者的炎症因子水平,改善脑血流动力学,效果显著。