贴壁培养细胞简便染色方法

细胞染色是细胞生物学研究和应用中最为常见的一种技术．使细胞的形态和结构更加明显,可以直接观察细胞某些生物学特征的变化。不仅在医学基础研究中像细胞凋亡和肿瘤细胞株的观察方面广泛应用,而且在生物医学教学与临床检验中更是不可缺少的手段,包括基本的细胞形态观察、血液细胞分类、骨髓细胞相、以及脱离细胞等的分析方面,帮助学生提高学习,以及临床医生了解就诊者的身体状况做出正确的诊断。但细胞染色技术尚存在拓展的空间,本文结合细胞制片和细胞染色技术,对生物学基础研究中的贴壁细胞进行处理．方便了贴壁细胞的染色分析,从而丰富了这一传统技术的应用。     

浙贝母鳞茎衰退过程的解剖学研究初报

采用徒手制片、石蜡切片和电子显微镜技术,系统而深入地研究了浙贝母（ＦｒｉｔｉｌｌａｒｉａｔｈｕｎｂｅｒｇｉｉＢａｋｅｒ）鳞茎衰退过程中的形态、组织结构和细胞内部的变化情况．看到了大分子物质进行运输时采用集装囊泡形式的可能性。进一步论证了胞间连丝作为细胞间原生质通道的观点．     

一种新的染色体制片永久封片法

细胞的有丝分裂和减数分裂制片是植物细胞学和细胞遗传学研究不可缺少的技术。对于一些重要的染色体制片进行永久封片,不仅为实验结果保存了必要的细胞学证据,而且也为特殊细胞学现象的重新观察和研究提供了可能性。传统染色体制片的封片剂主要有加拿大树脂(Canada balsam)、Euparal胶和DPX     

改进的植物染色体制片方法

文章以外来物种肿柄菊和濒危物种三棱栎的根尖和茎尖为材料,改进植物染色体制片技术的结果表明:改进后的方法能明显提高植物染色体制片的质量和所需目的细胞的获得率。     

杜仲含胶细胞的整体观察

用常现石蜡制片法及变性试剂（澳一碘一冰醋酸）处理,虽然可以观察到杜仲含胶细胞在植物体中的分布部位、密度及直径等,但很难观察到含胶 细胞的整体特征。采用整体透明法,可对合胶细胞整体特征进行观察以获得比较满意的效果,现将制片过程介绍如下：1．配制溶液配制10％的Na0H溶液和澳．碘冰醋酸试剂（碘2．5克,漠1．25克,冰醋酸加至100毫升）。2．取材及变性处理取新鲜的杜仲叶片,用清水冲洗干净,根据观察要求切成小块,放入盛有变性试剂的瓶中（变性试剂大约为材料的20－30倍）,处理48小时,为加速渗透可抽气约5分钟。3．透…     

华中五味子染色体制片优化及核型分析

比较不同预处理和解离方法对华中五味子染色体制片的影响,采用华中五味子的萌发芽、新枝茎尖、幼叶等不同部位进行染色体制片,观察500个细胞,比较不同部位中期细胞和适宜核型分析的中期细胞所占比例,结果显示,0.1%秋水仙素预处理1 h、1 mol/L盐酸常温解离12 min制片所得染色体分散效果最佳。5~15 mm幼叶侧边组织制片最适宜华中五味子核型分析。核型公式为2n=2x=28=26 m 2sm,核型不对称系数(As.k)为56.30%,属于1B类型,核型对称性程度高,表明华中五味子在进化中处于比较原始类型。     

简讯

举办遗传学实验进修班△为了提高中学生物学教师的实验技能,北京遗传学会、北京教育学院于2月10日至14日联合举办了高中生物学教师遗传学实验进修班,实验内容包括:细胞的有丝分裂和染色体制片技术、花粉母细胞减数分裂的观察与制片技术、遗传学三个基本规律及基因互作的验证、果蝇性状识别和果蝇唾液腺染色体的观察与制片技术等实验。 (李维德) 开设人口教育课△北京市十五中学,自1980年起开设了人口教育课,生物教师,给学生讲授了生殖生理、青春期卫生、遗传、优生等常识。在讲近亲结婚遗传病比例增高时,还组织学生调查社会上先天痴呆及白化病的发病因素,提高了学生关于优生优育意义的认识。 (赵常忠)     

蜘蛛胚胎细胞染色体制片技术

蜘蛛的染色体制片方法和核型分析,对蜘蛛遗传变异、种群演化、分类和染色体结构、功能与形态之间关系等问题的研究是十分重要的基本技术手段。目前,制作大型个体蜘蛛的染色体方法,常采用生殖腺的压片或蜘蛛血液细胞的常规制片法来制备染色体标本,然而,对于个体微小的真正蜘蛛类染色体的制片,如用上述二种方法就难以进行,国内也一直未见有关真正蜘蛛染色体制片方法的报道,至使小型个体蜘蛛的染色体组型分析工作进展缓慢。1977年美国的Seiji Malsimoto等采用蜘蛛胚胎细胞制作染色体标本,取得了较好的结果。胚胎细胞染色体制片法操作简便、快速,特别适用于小型个体蜘蛛染色体标本的制作。近年     

小鼠骨髓细胞染色体G显带制备实验的问题与改进

就小鼠骨髓细胞染色体制备方法进行了探讨,对常见的实验技术及结果存在的问题进行分析,并对实验进行了探究改进,建立了一套简单易行、染色体标本清晰、结果稳定的染色体制片技术,为《遗传学》和《细胞生物学》等课程实验教学提供较好的方法.     

3D-SIM结构照明超分辨率显微镜实现蛋白质在植物亚细胞器内的定位

基因表达产物蛋白质的亚细胞定位是解析基因生物学功能的重要证据之一。近年来出现的超分辨率光学成像技术已成功应用于人类和动物细胞中,预示着显微成像技术继激光共聚焦技术后的又一重要进步。由于植物细胞的特殊性和成像技术的研发取向,超分辨率光学成像技术在植物细胞蛋白质亚细胞定位的应用尚未见报道。该研究利用Delta Vision OMX显微镜技术,克服了叶绿体基粒中叶绿素自发荧光与融合蛋白荧光不易区分的缺陷,解决了受分辨率局限无法将植物细胞中蛋白质在亚细胞器内可视化精确定位的技术难题,成功地将植物蔗糖合成酶Zm SUS-SH1定位在烟草表皮细胞叶绿体基粒周围。该研究同时建立了一套基于撕片制片法的简便OMX显微镜制片方法,并针对OMX显微成像技术在植物细胞中蛋白质亚细胞定位的应用进行了讨论。     

FISH检测宫颈脱落细胞与宫颈组织中hTERC基因制片方法的研究

目的:探讨FISH实验中用直接涂片法、盐水制片法、TCT制片法、低渗滴片法制片法和宫颈切片组织取材方法对于FISH成功率的影响.方法:收集2008年3月至2009年3月青岛大学医学院附属医院妇科162例宫颈脱落细胞标本及2008年5月至2009年3月手术切除或活检的宫颈组织63例,用荧光原位杂交(FISH)方法检测hTERC基因.结果:直接涂片法、盐水制片法、生理盐水法、TCT制片法和石蜡包埋组织切片法hTERC基因杂交成功率分别为58.3%,65%,55%,87.1%,85.7%,TCT制片高于其它四组;低渗滴片法背景干净度、细胞形态、裸核数量满意度最高;TCT制片法细胞数量满意率最高;石蜡包埋组织切片法荧光信号满意率最高.结论:在检测hTERC基因的宫颈癌筛查中,TCT制片法明显优于其他方法,而在指导宫颈病变及宫颈癌的治疗中,石蜡包埋组织切片法的染色体破坏最小,实际意义更大.     

简讯

为了适应高中生物课实验教学的需要和提高中学生物学教师的实验技能,北京遗传学、北京教育学院于今年2月10日至14日联合举办了高中生物学教师遗传学实验进修班。开班的第一天中国遗传学会副秘书长吴鹤龄副教授做了报告,介绍了遗传学的近况与展望。实验班的内容包括:细胞的有丝分裂和染色体制片技术、花粉母细胞减数分裂的观察与制片技术、遗传学     

一种酶标板转子低速离心细胞制片方法

常规培养悬浮细胞Jurkat,离心收集细胞后,通过载玻片直接涂片、细胞涂片离心机和酶标板转子低速离心机3种方法制备细胞涂片,经瑞氏-姬姆萨染色后,显微镜下观察拍照。发现直接涂片中细胞图像难以观察,效果差,而细胞涂片离心机和酶标板转子低速离心机制备的细胞涂片,细胞图像清晰,均可达到细胞制片要求。酶标板转子低速离心细胞制片是一种便捷的新方法。     

用蝾螈表皮装片制作永久制片技术

蝾螈表皮装片制做的永久制片,显微镜下观察,细胞呈多角形,细胞之间镶嵌排列,间质很少。细胞膜、细胞质、细胞核和核仁４种结构清楚明晰,观察细胞的基本结构非常理想。１取材１．１蝾螈将蝾螈放在盛有清水的玻璃缸中饲养,１０ｄ（天）左右即可看到从蝾螈皮肤上脱落下...     

观察植物细胞胞间连丝的方法

植物体是由无数具细胞壁的生活细胞所构成,细胞之间靠胞间连丝相互联系。凡是生活的细胞都应该能看见胞间连丝,但并不是所有的植物细胞的胞间连丝都能看得很清楚。观察胞间连丝制片,对学生理解植物体是由多细胞组成的统一整体是有好处的。下面谈谈胞间连丝制片和观察的方法:     

简易制备牛蛙精巢染色体——观察动物细胞减数分裂

简化常规染色体滴片的操作程序,对牛蛙精巢进行染色体制片,基本观察到精巢组织中细胞行减数分裂各阶段的染色体行为。实验结果表明．用牛蛙精巢制备染色体能相对简捷稳定的获得有效的实验结果．是一种观察动物细胞减数分裂行为的好方法。     

植物染色体制片方法的改进

染色体是生物细胞核中最重要而稳定的成分，它具有特定的形态结构和一定的数目，具有自我复制能力，并积极参与细胞的代谢活动，能出现连续而有规律的变化，是决定物种繁衍的遗传物质的载体。人们一直在不断地探索和改进染色体的观察和鉴定方法。从早期的涂片法．到经典的常规压片法，直至20世纪60年代末建立起来的显带技术，以及90年代迅速发展的染色体原位杂交技术。作者长期从事植物染色体的研究，并给本科生和研究生讲授细胞遗传学理论和实验课，结合科研对染色体的制片技术进行了改进．供参考．[第一段]     

蚤类染色体的制片方法及分带技术

本文首次介绍了蚤类染色体的空气干燥制片方法和分带技术。以蚤成熟三龄幼虫和成蚤生殖腺为材料,采用体外短期培养、空气干燥、Giemsa染色技术制片,具取材容易、操作简便、中期分裂相多且染色佳、标本不需封片即可长期保存等优点,克服了以往醋酸地衣红压片法染色体分散不佳、杂质多、染色易褪色及标本需封片才能保存等缺点。在印鼠客蚤等四种蚤的染色体研究中均获得满意效果,成功率高,重复性好,尤以生殖腺染色体制片成功率为100%。在此基础上还摸索建立了蚤类染色体的C一分带、G一分带和银染技术。     

杜仲含胶细胞形态特征的研究

利用离析、石蜡制片以及电镜扫描等方法对杜仲含胶细胞的形态特征进行研究,结果表明,大多数的含胶细胞是一种细长的、两端略膨大的,丝状的分泌单细胞、少数含胶细胞在表面形成突起,并能进一步伸长,形有盲端或分枝。     

人口腔粘膜上皮细胞系列制片

人口腔粘膜上皮细胞有着取材简便,对人体几乎无伤害等优点,被广泛应用于教学实验和科研中。我们使用它作为材料来源的几种制片技术,在普通显微镜下就可清晰看到细胞膜、细胞质、细胞核以及部分细胞器和化学成分,是学生观察高等生物———人的细胞的理想用材。现分别介...