不同剂量阿托伐他汀钙短期应用对冠状动脉粥样硬化性心脏病患者血清 胆红素水平的影响

目的:探讨不同剂量阿托伐他汀钙短期应用对冠状动脉粥样硬化性心脏病患者血清胆红素水平的影响。方法:按照详细的纳入及排除标准的筛选共计264例冠状动脉粥样硬化性心脏病患者入选,分为20 mg和40 mg治疗剂量组,观察患者用药前后胆红素水平的变化水平的改变。结果:与服药前的相比,服用阿托伐他汀钙40 mg和20 mg的患者血清总胆红素、直接胆红素水平均呈显著性上升(P0.05),而间接胆红素水平差异无显著性。服药1个月后,40 mg组患者血清总胆红素、直接胆红素水平升高较20 mg组更显著(P0.05),但两组间接胆红素水平差异没有显著性。总胆红素变化率与患者胆固醇水平呈显著相关性,其20mg组为0.419,40 mg组为0.634(P0.001)。结论:阿托伐他汀钙治疗冠状动脉粥样硬化性心脏病患者可导致其血清总胆红素和直接胆红素水平升高,且高剂量较低剂量对总胆红素和直接胆红素的影响更明显。     

两种不同密度分离液分离的脐血CD34+、CD34-细胞造血活性比较

目的:比较两种不同密度的ficoll-泛影葡胺分离造血干细胞群的效果,找出更适合分离脐血造血干、祖细胞的分离密度,为脐血造血干细胞的医学研究及临床应用提供一定依据。方法:采集脐血6份,根据密度梯度离心法,用质量分数为(1.068±0.001)g/m L、(1.077±0.001)g/m L ficoll-泛影葡胺分离液等量分离同一份脐血,分别计数这两种分离液的单个核细胞获得率及细胞存活率,得到的单个核细胞再分别经免疫磁珠分选法获得高纯度的CD34~+细胞及除去了CD34~+的单个核细胞(CD34~(-depleted) MNCs),统计分析这两种不同密度分离液获得的CD34~+细胞、CD34~(-depleted)MNCs在甲基纤维素中形成CFU-GM集落数。结果:1(1.068±0.001)g/m L、(1.077±0.001)g/m L两种分离液分离的单个核细胞平均密度分别为(1.52±1.0)×10~6个/m L、(2.84±0.98)×10~6个/m L,(P0.05);经免疫磁珠纯化后的CD34~+细胞占单个核细胞(MNCs)的比率分别是(1.26±0.47)%、(1.07±0.15)%,(P0.05);2(1.068±0.001)g/m L分离的单个核细胞经免疫磁珠纯化后1.5×10~3个CD34~+细胞形成CFU-GM的集落(140.5±14.5)显著多于(1.077±0.001)g/m L的集落数(118.3±13.8)(P0.05);(1.068±0.001)g/m L分离的5×10~4个CD34~(-depleted) MNCs形成的CFU-GM集落数(132.0±5.1)也显著多于(1.077±0.001)g/m L的集落数(101.3±9.4),(P0.05)。结论:与1.077 g/m L Ficoll相比,1.068g/m L Ficoll-泛影葡胺分离液分离的单个核细胞中的CD34~+、CD34~-细胞造血活性更强,更适合用来分离脐血中造血干细胞群。     

女性冠心病患者胆红素血脂综合指数、ApoB水平与冠状动脉病变程度的相关性研究

目的:研究女性冠心病患者胆红素血脂综合指数、ApoB水平与冠脉病变程度的关系。方法:选取2016年1月-2016年12月于我院行冠状动脉造影检查的女性患者共246例,按照两种不同方法分组:(1)按照冠状动脉造影结果分为冠心病组(n=105)和正常对照组(n=141);(2)按照Gensini评分系统定量评估所有冠心病患者的冠状动脉病变程度,分为第1四分位组(n=35)、第2四分位组(n=32)、第3四分位组(n=39)及第4四分位组(n=35)。测定所有患者的血清总胆红素(TBIL)、直接胆红素(DBIL)、间接胆红素(IBIL)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、载脂蛋白A/B(ApoA/B)水平,计算胆红素血脂综合指数[TC/(HDL-C+TBIL)、LDL-C/(HDL-C+TBIL)]。结果:(1)冠心病组TC、TG、LDL-C、ApoB较正常组高,HDL-C、ApoA、TBIL、DBIL、IBIL较正常组低,差异有统计学意义(P0.05);与正常组相比,冠心病组胆红素血脂综合指数[TC/(HDL-C+TBIL)、LDL-C/(HDL-C+TBIL)]升高,差异有统计学意义(P0.05)。(2)在不同Gensini评分四分位组中,TC、LDL-C、ApoB、TBIL、DBIL、IBIL、TC/(HDL-C+TBIL)、LDL-C/(HDL-C+TBIL)的差异均有统计学意义(P0.05)。(3)相关性分析显示:TC/(HDL-C+TBIL)、LDL-C/(HDL-C+TBIL)、ApoB均与冠脉不同Gensini评分呈正相关(r=0.538,P0.05;r=0.670,P0.05;r=0.462,P0.05);TBIL、DBIL、IBIL与冠脉不同Gensini评分呈负相关(r=-0.485,P0.05;r=-0.564,P0.05;r=-0.359,P0.05)。结论:(1)女性冠心病患者血脂胆红素综合指数、ApoB较正常对照组患者显著升高,而TBIL、DBIL、IBIL降低;(2)女性冠心病患者胆红素血脂综合指数、ApoB水平与其冠脉病变程度呈显著正相关。     

逆病毒载体介导双耐药基因在脐血CD34^＋细胞中的表达和抗性研究

To explore whether human umbilical cord blood CD34+ cells transduced with human aldehyde dehydrogenase class-1 (ALDH1) and multidrug resistance gene (MDR1) increase resistance to 4-Hyaroxycyclophosphophamide (4-HC) and P-Glycoprotein Effluxed Drugs, a bicistronic Retroviral vector G1Na-ALDH1-IRES-MDR1 was constructed. The vector was transduced into the packaging cell lines GP + E86 and PA317 by LipofectAMINE. Using the medium containing VCR and 4-HC for cloning selection and pingponging supernatant infection between ecotropic producer clone and amphotropic producer clone, we obtained high titer amphotropic PA317 producer clone with the highest titer up to 5.6 x 10(5) CFU/ml. Cord blood CD34+ cells were transfectced repeatedly with supernatant of retrovirus containing human ALDH1 and MDR1cDNA under stimulation of hemopoietie growth factors. PCR, RT-PCR, Southern blot, Northern blot, FACS and MTT method analyses show that dual drug resistance genes have been integrated into the genomic DNA of cord blood CD34+ cells and expressed efficiently. The transgenes recipient cells confered 4- to 7.2-folds stronger resistance to cyclophospsphamede and P-Glycoprotein Effluxes drug in comparison with the nontransduced cells. This study provided a foundation for the application of combination chemotherapy in tumor clinical trial.     

冻存时间对脐血造血细胞体外增殖潜能的影响

目的研究冻存时间对脐血造血细胞增殖潜能的影响.方法在所分离的脐血有核细胞中加入联合低温保护剂Dextran-40+10%DMSO,经梯度降温后置液氮深低温保存.采用无血清造血细胞扩增液对冻存不同时间的脐血造血细胞进行体外扩增,动态监测扩增潜能.结果将冻存1个月、4个月脐血造血细胞体外扩增5周,其总有核细胞分别被扩增了(1499.0±115.6)倍和(1513.0±110.4)倍,FCs均于体外扩增的第3周达到高峰,分别扩增了(53.8±6.3)倍和(54.8±6.7)倍,D34+造血细胞于体外扩增的第2周均达到高峰,分别扩增了(63.8±6.1)倍和(62.4±5.7)倍;统计分析冻存1个月与4个月后造血细胞扩增结果,不存在显著性差异,>0.05.结论在适宜深低温条件下冻存脐血造血细胞,在一定时间内,冻存时间的长短不会导致其增殖潜能下降.     

高胆红素血症新生儿肠道菌群特点与苯巴比妥治疗效果的相关性

摘要 目的：探讨与分析高胆红素血症新生儿肠道菌群特点与苯巴比妥治疗效果的相关性。方法：选择2020年6月到2022年6月在本院诊治的565例高胆红素血症新生儿作为研究对象,所有患儿都给予苯巴比妥治疗,检测新生儿肠道菌群与血清α-谷胱甘肽-s-转移酶（α-GST）、肌酸激酶同工酶（CK-MB）、胆红素含量,判定患儿的治疗效果并进行相关性分析。结果：565例患儿治疗7 d后,有效490例（有效组）,有效率为86.7 %。有效组的血清胆红素、经皮胆红素含量都明显低于无效组（P<0.05）。有效组的血清α-GST、CK-MB含量都明显低于无效组（P<0.05）。有效组的肠球菌属、埃希氏菌属、链球菌属相对丰度均低于无效组,拟杆菌属相对丰度明显高于无效组（P<0.05）。在565例患儿中,Spearsman分析显示苯巴比妥治疗效果有效与肠球菌属、埃希氏菌属、链球菌属、拟杆菌属相对丰度都呈现相关性（P<0.05）。结论：苯巴比妥治疗新生儿高胆红素血症的效果有待提高,通过胆红素、α-GST、CK-MB、肠道菌群检测能有效判定患儿的治疗效果,同时肠道菌群与治疗效果存在相关性。     

疣孢漆斑菌(Myrothecium Verrucaria)J-1胆红素氧化酶的纯化及性质初步研究

从中国土样中筛选到一株能产生胆红素氧化酶的微生物(Myrothecium Verrucaria)J-1,培养后,分离纯化,最后经QAE—Sephadex A50柱层析,得到胆红素氧化酶比活为207.65 U/A 280nm,总产率为22.3％。纯酶紫外吸收峰为278 nm,凝胶电泳为单一色带。分子量估计为52000。它能迅速、特异地氧化胆红素为胆绿素,并进一步氧化成目前还不清楚的紫色化合物。最佳作用pH为7.0,最佳作用温度为40℃。     

产胆红素氧化酶菌种筛选

选出一株产胆红素氧化酶的菌种露湿漆斑菌—Myrotheciumr oriclum,简称MTR89—403。此菌产酶最适培养基:40—80％的马铃薯浸出液100ml、葡萄糖1g,pH6.0。培养条件:500ml三角瓶装100ml培养基,在27℃、200rpm旋转摇床培养84h,得到的最高酶活为1300u/L,比活为12.3u/mg蛋白。     

胆红素的直接提取法

采用直接法提取胆红素并除去醇溶性杂质,同时回收提取过程中使用的氯仿、乙醇,成本低,效果好。全操作过程只需2小时,胆红素纯度可达92％。