鞘内注射M受体和GDNF反义寡脱氧核苷酸抑制吗啡戒断大鼠蓝斑c—Fos表达

The antisense approach and immunohistochemistry were used to study the effects of different muscarinic receptor (M) subtypes and glial cell derived neurotrophic factor (GDNF) on the scores of morphine-withdrawal syndrome and the expression of c-Fos in locus coeruleus (LC). Intrathecal injection of M2 receptor antisense oligonucleotides (M2AS-oligo) or GDNF antisense oligonucleotides (GDNFAS-oligo) decreased the scores of morphine withdrawal syndrome. The expression of c-Fos positive neurons in the LC increased in morphine-dependent rats and increased to a greater extent after the injection of naloxone (4mg/kg, ip) in morphine dependent rats. Intrathecal injection of M2AS-oligo or GDNFAS-oligo inhibited the increase of c-Fos expression in LC during morphine withdrawal, but there was no effect in case of M1AS-oligo. The results suggest that M2 receptor of spinal cord mediates the neural activation of LC during morphine withdrawal. And the interaction between neurons and glial cells may be involved in the ascending activation process.     

一种多拷贝毕赤酵母表达载体的构建及人脑源性神经营养因子的表达

利用PCR技术扩增出pPIC9K载体的HIS4 Kan序列片段 ,与pPICZα重组 ,构建结合了两个载体特点的适合体外构建多拷贝基因表达盒的毕赤酵母表达载体pPICZα1,改造后的载体含HIS4 Kan序列 ,能整合到酵母染色体上 ,具有筛选方便、外源基因多拷贝组建迅速、蛋白产物分泌表达和易纯化等优点。将人脑源性神经营养因子(hBDNF)的cDNA(35 7bp)克隆入载体pPICZα1,利用同尾酶BglⅡ、BamHⅠ不可逆连接方式 ,分别构建含有 1、2、3、6个拷贝hBDNF表达盒的重组表达载体 ,电击法转化毕赤酵母GS115菌株 ,用G4 18和Zeocin筛选转化子 ,筛选到的阳性转化子用 0 5 %甲醇诱导 ,获得分泌型表达。表达产物类似于天然神经营养因子单体大小、分子量约 14kD。多拷贝hBDNF表达盒的表达水平亦高于单拷贝hBDNF表达盒 ,ELISA和Westernblot检测表明 :表达的蛋白能与鸡抗人脑源性神经营养因子抗体特异结合 ,证实该表达蛋白具有hBDNF的免疫原性     

绿脓菌素激活MAPKs、NF-KB信号通路诱导呼吸道上皮细胞IL-8表达

采用绿脓杆菌培养上清及绿脓菌素刺激人呼吸道上皮细胞株A549和SPC-A-1,用ELISA方法检测细胞IL-8分泌水平,并使用免疫印迹(Western blot)方法观察绿脓菌素对细胞内重要的炎症信号传导途径NF—κB及丝裂原激活蛋白激酶(MAPKs)的激活作用。实验发现,绿脓杆菌培养上清及绿脓菌素可诱导呼吸道上皮细胞株IL-8分泌增加,且具有剂量依赖效应。绿脓菌素刺激细胞可使细胞内IκB—α发生降解,同时使MAPK家族蛋白分子(ERK1／2、p38、JNK)发生磷酸化。MEK1／2(ERK1／2激酶)抑制剂U0126(10μmol／L)和p38MAPK抑制剂SB203580(10μmol／L)可降低绿脓菌素诱导A549细胞IL-8的合成。以上结果显示绿脓菌素通过MAPK信号传导通路增强呼吸道上皮细胞IL-8的表达;NF-κB通路也参与了绿脓菌素调控细胞IL-8表达的过程。     

水坝运行对山下水库中苍鹭的食物组成、采食区内种群数量及采食区域变化的影响

与水库水位低、繁殖群已经形成的2000-2001年相比, 苍鹭(Ardea cinerea) 的种群数量在水位正常、尚未繁殖的1990-1991年相对较低。该种鸟类在水库的3个地点取食。1990-1991年的8 月或9 月, 其数量达到最高值, 并有较高比例的个体出现在水库深水区的平坦的岸边。2000-2001 年的数量高峰在6 月份, 有大量的觅食个体出现在回水区, 在那里形成了新的生境(水塘、浅水区和沙洲)。苍鹭迁离或飞往繁殖地的活动在早晨或中午之前强于中午或下午。在其食物中共鉴别出17种鱼类, 其中数量最多的是圆鳍雅罗鱼和拟鲤。在苍鹭食物中, 游动性鱼类比例较高(2001年占32%, 2003年占25%), 表明它是在河流和水库之间的生态交错区取食的。所捕食鱼类的全长为4 cm到33 cm, 生物量在2-406 g之间。在2001 年和2003 年苍鹭食物中鱼类的全长未见明显差异。     

影响食肉目动物能量学的生态因子

在食肉目的62种动物中,体重的变异可以解释基础代谢率86.8%的变化。当栖息基底、食性、生境和纬度等4个因素与体重合起来一起分析,则可以解释基础代谢率98.7%的变化,即这些生态和行为因子可以解释代谢率残差变异的81.1%。身体成分也是影响基础代谢率的另一个因素,可以解释一些大型树栖种类的较低的代谢率。除体重因素外,导致真兽类基础代谢率变异的主要原因是:当生态因素适合时,高水平的能量消耗可以促进动物的高繁殖输出,而动物的某些习性和生存环境则会要求低能量消耗,从而使繁殖率降低。当以科为单元进行分析时,对结果没有影响。生理参数与分类单元之间大多数的相关性反映了生态和行为因素与分类系统之间的一种粗略的相关关系。除非系统学可以反映动物的生态学和行为学,否则系统学不能决定动物适应性特征的状态     

日本血吸虫真核翻译起始因子5基因的cDNA克隆和免疫保护功能分析

利用抑制削减杂交法筛选日本血吸虫雌雄虫差异基因,从中获得真核翻译起始因子5基因(eIF5)的 表达序列标。对该序列进行生物信息学分析:对其5’端进行电子延伸,获得含完整开放阅读框的cDNA序列 (AY686501)。将其亚克隆到表达载体pET-28c,进行重组表达。免疫保护效果实验表明,重组表达蛋白具有显著 抑制血吸虫卵在寄主肝脏中的沉积效果。     

贺兰山岩羊冬春季取食生境的比较

2003年11～12月和2004年4～6月,在贺兰山设定了25条固定样线,采用直接观察法对岩羊冬春季的取食生境选择进行了研究。结果表明,岩羊冬季对12种取食生境生态因子有选择性,偏爱选择位于山地疏林草原带,优势乔木为灰榆,乔木密度〈4株、高度4～6m,灌木密度〉5株、高度〉1．3m,食物质量〉50g,人为干扰距离〈500m,距裸岩距离〈2m的地方取食。而春季对11种取食生境生态因子有选择性,偏爱选择山地疏林草原带,优势乔木为灰榆,乔木密度〈4株、高度〈6m,灌木密度5～10株、高度1．3～1．7m,食物质量〉100g,海拔高度〈2000m,距水源距离〈500m,隐蔽级50％～75％的地点。冬春季岩羊对植被类型、地形特征、优势乔木、乔木密度、乔木高度、灌木密度、灌木距离、食物丰富度、坡向、坡度、距水源距离、人为干扰距离和隐蔽级的选择存在显著差异。主成分分析表明,冬季第1主成分的贡献率达24．493％,其中绝对值较大的权系数出现在植被类型、优势乔木、乔木高度、乔木距离、灌木密度、灌木高度、海拔高度、距水源距离和人为干扰距离等生态因子：春季第1主成分的贡献率达28．777％,其中绝对值较大的权系数出现在植被类型、乔木距离、灌木高度、灌木距离、食物丰富度、海拔高度和人为干扰距离等生态因子。随着北方地区冬春季食物数量和质量的剧烈变化,贺兰山岩羊对取食生境的利用对策也将发生一定程度的改变,与其他分布区的岩羊相比,贺兰山独特的地理位置和特殊生境使其在取食生境选择上存在很大差异。     

真核mRNA转录终止机制

真核RNA聚合酶Ⅱ催化的mRNA转录是基因表达中一个重要阶段,但是对它的终止过程却知之甚少。大量实验表明,真核mRNA转录终止涉及到RNA聚合酶Ⅱ最大亚基（Rpb1）C末端结构域和多种转录终止相关因子以及两者之间的相互作用。这些结果初步勾画了真核mRNA转录终止的一般过程。     

海南岛黎母山四眼斑水龟对春季生境的选择性

2004年3—4月,在海南岛黎母山采用系统抽样法对四眼斑水龟春季生境选择进行了初步研究。在海拔170～1170m设196个研究样点,共1392个笼捕日。其中在海拔170～470m的26个布笼点共捕获四眼斑水龟36只,而在海拔470～1170m未捕获到四眼斑水龟。采用Kruskal Wallis检验,对海拔500m以下四眼斑水龟利用样地(n=26)和海拔500m以上的对照样地(n=26)的生态因子差异显著性进行检验。结果表明,两类样地的海拔、植被类型、植被盖度、落叶厚度、土壤类型、坡度、水面宽、水深、水面流速、基底类型、露石率、食物丰度、干扰距离13个生态因子差异均显著,仅石洞数目差异不显著。说明海拔500m以上和以下的环境差异较大。主成分分析结果表明,影响四眼斑水龟生境选择的主要生态因子依次为海拔、干扰距离、植被盖度、土壤类型、水深和落叶厚度。而植被类型、食物丰度、露石率、基底、石洞数目、坡度、水面宽和水面流速8个生态因子的影响不明显。保护好近河岸植被和提高当地群众对龟类的保护意识对四眼斑水龟的保护十分重要。     

肿瘤抑制因子Hamartin和Tuberin信号调控机制

结节硬化复合症由tscl、tsc2基因突变引起,这2个基因分别编码hamartin和tuberin,它们均为肿瘤抑制因子,在细胞生长和增殖过程中起关键性的调节作用。生长因子刺激的PI3K／Akt信号通路通过磷酸化tuberin,调控下游效应因子功能,最终影响细胞的生长和增殖。现对hamartin和tuberin信号调控机制的最新进展进行综述,并展望其发展趋势。