基于易错PCR技术的黏质沙雷氏菌脂肪酶基因LipA的定向进化

利用易错PCR技术对黏质沙雷氏菌脂肪酶基因LipA进行定向进化,经过筛选最终获得一个比活力比野生酶提高了425 U/mg的突变体ep1,测序分析ep1有5个氨基酸发生了突变,与野生酶相比ep1的最适pH值由原来的8.5降低为7.5,Tm值提高3℃,Km值由原来的40 mg/mL降低为12.5 mg/mL.对其三维结构进行分析,推测酶学性质的改变可能与处在活性中心右前方双螺旋发卡结构上的158A、和处在下部β卷曲折叠拐角处的S375G的突变有关.     

化香树果序总黄酮提取动力学研究

以化香树果序为原料,60%的乙醇水溶液为溶剂提取黄酮类化合物,在不同温度下对总黄酮的传质动力学进行了研究。采用平板模型,以Fick第二定律为基础,建立了化香树果序总黄酮提取的动力学方程,求得了速率常数、活化能、相对萃余率等一系列动力学参数。研究结果可为化香树果序总黄酮提取工程放大和深入理论研究提供一定的依据。     

玉米矮花叶病毒CP基因dsRNA的原核表达与分离

根据玉米矮花叶病毒CP基因序列设计特异性引物,RT-PCR扩增玉米矮花叶病毒CP基因特异性干涉片段,将干涉片段及pUCCRNAi载体分别用BamH I及Sal I双酶切,然后将干涉片段分别正反向插入pUC- CRNAi载体中,构建CP基因反向重复克隆载体pUCCRNAi+2 F.再利用Pst I-Sal I位点插入到L...     

叶绿体转化三角褐指藻表达外源蛋白

为建立三角褐指藻(Phaeodacty lum tricornutum)叶绿体表达体系,从其叶绿体基因组中克隆了rnS-trnI、trnAml序列作为遗传转化同源重组序列,并以氯霉素抗性基因(CAT)表达盒作为筛选标记,以及绿色荧光蛋白基因(GFP)表达盒作为报告基因.以TA克隆载体pMD19-T为基础,将CAT表达盒...     

骨桥蛋白与肿瘤治疗

骨桥蛋白(osteopontin,OPN)是一种分泌型磷酸化糖蛋白,由多种组织细胞合成与分泌,参与调节细胞的黏附、增殖、趋化、转移、浸润和凋亡过程。OPN在多种肿瘤中高表达,与肿瘤的发生和发展密切相关,组织和血液中的OPN表达量也是肿瘤诊断和预后的指标。近年来,越来越多的研究通过抑制OPN、OPN的受体以及OPN的下游信号通路的方法抑制了肿瘤的发展。本文将从多方面阐述OPN与肿瘤的关系以及与肿瘤治疗的研究进展。     

乌鳢和斑鳢微卫星制备及其对自交与杂交F1代的初步鉴定

通过磁珠富集法分离了乌鳢(Channa argus)和斑鳢(C.maculate)的微卫星DNA序列,根据这些微卫星DNA序列的两翼序列,采用Primer 3.0或Primer 5.O软件设计出乌鳢与斑鳢的微卫星引物各31对.用62对微卫星引物对乌鳢和斑鳢自交与杂交F1代的4个组合进行扩增,10对引物无扩增产物,其余5...     

“探究影响酶活性的条件”实验中的几项注意点

“探究影响酶活性的条件”是高中生物学课程中的一重要探究性实验,就如何使“探究温度对酶活性的影响”和“探究pH对酶活性的影响”的实验设计更科学、可行做了几点总结。     

CCl4致小鼠肝损伤中几种免疫介质含量变化的研究

本文通过研究CCl4致小鼠肝损伤组织匀浆和血浆一些免疫介质含量的变化以探讨这些免疫介质在CCl4诱发肝损伤过程中作用机制。分别选用30只健康成年小鼠,雌雄各半,随机分成对照组和CCl4负荷组,每组15只。通过腹腔注射CCl4诱发肝损伤后,分别在第2、4、6周检测肝组织匀浆cAMP、cGMP和MDA及血浆IL-2、TNF-α水平的变化。结果显示,在整个实验期内,CCl4组肝组织匀浆cAMP水平均低于或明显低于对照组;cGMP在实验第2周后,高于或显著高于对照组;cAMP／cGMP比值呈现下降趋势,并低于或明显低于对照组;MDA含量明显高于对照组。在整个实验期内,CCl4组血浆IL-2水平下降或显著下降;TNF-α水平则均高于或显著高于对照组。结果提示,CCl4负荷诱发免疫介质cAMP、cGMP、TNF-α和IL-2发生剧烈变化,在介导肝损伤过程中可能起重要作用。     

衡阳盆地土壤动物多样性研究

对衡阳盆地紫色页岩土壤 9种生境中的土壤动物进行了调查研究 ,共获得土壤动物35 85只 ,隶属于 4门 8纲 39目 ,其中线虫类、蜱螨类为优势类群 ,占总捕量的 5 0 2 4 % ;常见类群 1 2类 ,占总捕量的 4 4 0 1 %。从土壤动物水平分布上看 ,9种生境相似程度较大 ,其中尤以芦竹林和桃树林、阔叶林和桉树林、芦竹林和桉树林之间相似程度更突出。从土壤动物垂直分布上看 ,9种生境中只有桃树林、柑桔林垂直分布较为明显 ,而各种生境中土壤动物具有明显的表聚性。芦竹林、柑桔林、桉树林、菜地、阔叶林和桃树林 6种生境土壤动物群落的多样性及均匀度呈基本一致的趋势 ,且各生境间差别不大     

双歧杆菌预防大肠癌生长的信号转导机制

目的:从信号转导这一层次探索青春型双歧杆菌预防大肠癌生长的机制.方法:以大肠癌裸鼠移植瘤为动物模型,用膜结合法和免疫组化分别测定了大肠癌组织蛋白酪氨酸激酶(PTK)的含量以及NF-κB的表达.结果:双歧杆菌预防组大肠癌组织PTK的活性以及NF-κB的阳性细胞密度均明显低于肿瘤对照组(P＜0.01).结论:青春型双歧杆菌体内预防大肠癌生长的途径之一为降低其PTK的活性,同进抑制NF-κB的活化.