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Δ1-吡咯啉-5-羧酸合成酶(P5CS)是植物渗透胁迫下谷氨酸途径合成脯氨酸的关键酶。该研究以石蒜(Lycoris radiata)为材料,采用同源克隆、RACE方法结合RT-PCR技术克隆获得LrP5CS基因全长cDNA序列。序列分析表明,LrP5CS基因全长2 521bp,其中开放阅读框(ORF)为2 139bp,编码713个氨基酸,预测编码蛋白质的分子量为77.19kD,等电点为6.34;LrP5CS是1个稳定的疏水蛋白,不含信号肽,不具有跨膜结构,具有AAK超基因家族和ALDH-SF超基因家族的保守结构域。氨基酸序列比对和系统进化树分析发现,LrP5CS与植物其他P5CS蛋白具有较高的一致性,且与海枣PdP5CS及油棕EgP5CS聚为一类,亲缘关系最近。实时荧光定量PCR分析结果表明,LrP5CS在根、鳞茎和叶片中均有表达,其中在鳞茎中的表达量最高。LrP5CS在20%聚乙二醇(PEG)处理下的表达模式分析发现,LrP5CS受PEG胁迫处理的诱导表达,其基因相对表达量在处理后6h达到最高;随着处理时间的延长,LrP5CS基因相对表达量水平逐渐下调至对照水平。将LrP5CS连接到表达载体pET-28a上,转化获得LrP5CS编码基因的大肠杆菌BL21(DE3)工程菌,通过IPTG诱导表达,SDS-PAGE分析表达产物发现成功表达目的蛋白。该研究结果为进一步分析LrP5CS基因功能及石蒜抗逆分子育种奠定了基础。 相似文献
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石蒜SRAP-PCR扩增体系的建立与优化 总被引:8,自引:5,他引:3
以陕西产野生石蒜〔Lycorisradiata (L’Hr.)Herb.〕为材料,通过单因子实验分别研究了模板DNA、Mg2 、dNTPs、引物浓度及Taq DNA聚合酶用量对石蒜SRAP分子标记扩增体系的影响,并对扩增体系进行了优化。优化后的反应体系总体积为10μL,含20ng模板DNA、3.0mmol·L-1Mg2 、0.20mmol·L-1dNTPs、0.4μmol·L-1引物和0.50UTaq DNA聚合酶。运用优化体系对9个石蒜居群的基因组DNA进行扩增,获得的DNA条带清晰,多态性比较丰富。说明SRAP-PCR可用于石蒜属植物的亲缘关系、系统演化、物种鉴别和遗传多样性等领域的研究。 相似文献
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通过盆栽试验,研究了外源氯化钙(CaCl2)、水杨酸(SA)和NO供体硝普钠(SNP)处理对干旱胁迫下石蒜抗旱性的影响。结果表明,较低浓度的CaCl2对石蒜抗旱性的影响不显著,而随着CaCl2预处理浓度的提高,石蒜的抗旱效果显著增强。较低浓度SA和sNP可显著提高石蒜的抗旱性,而高浓度则会发生毒害作用。利用模糊隶属函数法综合评价渗透调节物质、膜系统和抗氧化酶活性多项指标可以得出,喷施10mmol·L—CaCl2、2mmol-L。SA和0.5mmol·L-1 SNP对石蒜抗旱性的提高具有显著效果。 相似文献
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在室内测定了石蒜总生物碱对家蝇的生物活性,表明石蒜总生物碱对家蝇具有一定的触杀作用和生长发育抑制作用.石蒜总生物碱不同浓度(15、12、9、6、3 mg/mL)、不同作用时间(24 h、36 h、48 h、60 h、72 h)以及它们的交互作用分别对家蝇幼虫和成虫的触杀作用有显著影响.当石蒜总生物碱的浓度为15 mg/mL时,家蝇幼虫(3龄早期)和成虫(羽化3d)平均校正死亡率最高,分别为40.96%和38.25%,随着浓度的降低,触杀作用逐渐降低,随着作用时间的延长,触杀作用逐渐增强,72 h的平均校正死亡率分别达39.35%和37.55%,但总生物碱对家蝇幼虫和成虫的触杀作用间无显著差异.处理24、36、48、60、72 h后,石蒜总生物碱对家蝇幼虫的LC50值分别为57.42、36.48、21.92、13.13和10.95 mg/mL,对成虫的LC50值分别为86.66、37.86、23.91、14.15和11.51 mg/mL.老熟幼虫的平均重量除了在3 mg/mL时与对照差异不显著,其他各浓度下都显著低于对照,而在各浓度下的化蛹率、蛹的平均重量和羽化率均显著低于对照. 相似文献
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石蒜属植物生物碱成分研究进展 总被引:4,自引:0,他引:4
石蒜属为东亚特有属。该属植物富含生物碱,且此类次生代谢产物具有细胞毒、抗疟疾、抗病毒以及对乙酰胆碱酯酶的抑制作用等活性。本文概述了该属中生物碱类成分的化学结构、药理活性及其生源途径。 相似文献
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石蒜碱抗炎作用研究进展 总被引:3,自引:0,他引:3
石蒜碱是从传统药用植物石蒜鳞茎中分离出的生物碱成分.已有研究表明石蒜碱具有良好的抗炎作月除对多种炎症模型都有明确的防治作用外,石蒜碱还可抑制LPS诱导的炎症相关诱导酶类的合成以及多种炎症质的释放.在石蒜碱抗炎的分子机制方面,石蒜碱可显著抑制脂多糖(LPS)诱导的P38和STATs通路的激活,而ERK1/2,JNK1/2和NF-κB通路无影响. 相似文献
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2种石蒜生长发育期鳞茎内源激素的动态变化 总被引:4,自引:0,他引:4
应用酶联免疫吸附测定法(ELISA)研究了石蒜与中国石蒜不同生长发育期鳞茎内源激素质量摩尔浓度的动态变化,分析了内源激素与2种石蒜生长发育的关系。结果表明,花芽分化前期2种石蒜鳞茎IAA浓度较低,而iPAs、ABA与GAs浓度较高;临近抽葶IAA浓度均有所增加,而iPAs与Zrs、ABA与GAs浓度均降到极值。花期ABA、GAs与ZRs浓度均有所回升,说明高浓度的ABA与GAs对2种石蒜的开花可能起正向调控的作用,但对叶生长的协同规律不明显。内源激素比例分析表明,ZRs/IAA、GAs/IAA、ABA/GAs三者比例高有利于2种石蒜的花原基分化,三者比例低则有助于2种石蒜的叶生长。 相似文献
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黄花石蒜的组织培养和植株再生 总被引:5,自引:0,他引:5
1植物名称黄花石蒜(LycorisaureaHerb.),又名忽地笑。2材料类别鳞茎。3培养条件(1)不定芽诱导培养基:MS+6-BA10mg·L-1(单位下同)+NAA0.5;(2)不定芽增殖培养基:MS+6-BA5+NAA0.5;(3)生根培养基:MS+IBA2。上述培养基均加入3%蔗糖和0.8%琼脂,培养基灭菌前pH5.8。培养温度为19 ̄21℃,光照时间为12h·d-1,光强为24 ̄30μmol·m-2·s-1。4生长与分化情况4.1不定芽的诱导将鳞茎用自来水洗净,剥去外层黑色鳞片,切去石蒜的根部和鳞茎的上半部分。将切留的鳞茎放进烧杯置于超净工作台中,先用70%酒精灭菌40 ̄50s,无菌水冲洗2遍,再用0.15%升汞… 相似文献