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OsbHLH1基因过表达载体构建及转化水稻研究 总被引:2,自引:0,他引:2
OsbHLH1基因编码bHLH类转录因子,与水稻耐寒性相关.以pCAMBIA3300为母体,利用玉米泛素(Ubiquitin)启动子构建了能使OsbHLH1基因过表达且含有Bar基因的植物表达载体p3300-Ubi-Ω- OsbHLH1.利用基因枪法将其转化到粳稻品种东稻3号中,获得再生苗47株.选取其中9株进行PCR、Southern检测,结果表明目的基因已经整合到水稻基因组中;草铵膦叶片涂布试验结果表明,Bar基因在水稻植株中正常表达;低温处理后,除45号植株外,其余8株光合速率的变化率显著低于非转基因对照,初步证明OsbHLH1基因在水稻中过表达显著提高了水稻的耐低温能力. 相似文献
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基因枪介导基因表达盒(仅包括启动子、编码区和终止子)转化是基因枪转化植物的新趋势,它能消除质粒载体主干序列对转基因植物的不利影响。本文研究了基因枪转化的bar基因表达盒在转基因水稻T1~T3世代中的遗传行为。结果发现:作为筛选标记的bar基因表达盒在水稻基因组中多拷贝整合,遗传分离行为复杂,还出现了Basta抗感分离比在35:1~144:1之间的"假纯合体",但50%转基因株系中(5/10)bar基因可作为一个显性基因按孟德尔方式稳定遗传至自交T2代。虽然bar基因为多拷贝整合,30%的转基因株系(3/10)在自交低世代(T1)能获得纯合体。Southern杂交分析发现,多拷贝的bar基因表达盒倾向于连接成转基因串联子整合在水稻基因组内。我们发现在Basta抗性正常分离的株系后代中bar基因表达盒Southern杂交模式能稳定遗传,但异常分离的株系后代中bar基因表达盒的一些拷贝发生了丢失。我们推测,bar基因表达盒在水稻中遗传分离行为的复杂原因可能是bar基因表达盒多拷贝整合、基因丢失和基因表达互作。 相似文献
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用基因枪法将人工雄性不育基因导入小麦的研究初报 总被引:52,自引:1,他引:51
利用PDS1000/氦气基因枪将人工构建的雄性不育基因(TA29-Barnase基因)导入小麦栽培品种豫责18号的幼胚细胞。然后在含有10~20mg/L除草剂Basta的培养基础上筛选与分化。从170个幼胚中获得6株绿苗,对照的70个幼胚中未得到绿苗。对其中3株已生根且长势好的绿苗进行Southem杂交分析,结果表明,这3株绿苗皆为转基因植株,转化效率达1.8%。 相似文献
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基因枪与水稻遗传改良 总被引:1,自引:0,他引:1
水稻是人类主要粮食作物之一,其产量高低与品质直接关系到人们的健康,因而一直是作物遗传改良的主要研究对象。80年代出现的植物遗传转化技术为水稻的遗传改良提供了新方法,这些方法包括聚乙二醇(PEG)介导转化法、电激转化法、农杆菌介导转化法和基因枪转化法等... 相似文献
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基因枪在水稻遗传转化中的应用及其转化技术的优化 总被引:3,自引:0,他引:3
1983年Zambryski等人用根瘤农杆菌介导法进行烟草基因转移,获得了世界上首例转基因植株.随后,应用DNA直接导入技术如电击法(electroporation)和PEG介导法(PEG—mediated)成功地获得了转基因水稻植株.近年来,随着基因枪技术的建立和发展,水稻遗传转化成功的报道逐年增多.目前基因枪技术在植物遗传转化中的应用超过了根瘤农杆菌介导和其它转化方法的应用.这是因为基因枪转化技术不受植物种类的限制,不需要以原生质体作为转化的受体,可以将外源基因直接导入细胞、组织或器官,因而克服了根瘤农杆菌 相似文献
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小麦是世界上分布广、种植面积大的粮食作物,选育高产、优质、抗病等优良性状的小麦新品种具有重要的意义。近年来,随着植物遗传转化技术的不断完善,小麦的遗传转化也取得较大突破,先后采用基因枪法、花粉介导法、PEG法和激光穿刺法等,将NPTⅡ、Bar、GUS... 相似文献
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蝗虫染色体分带技术的研究 总被引:17,自引:3,他引:14
本文对采自长沙岳麓山的中华稻蝗〔Oxya chinensis (Thunberg)〕和采自杭州的小稻蝗〔Oxya hyla intricata (Stal) 〕进行了染色体C带、R带、N带和A带的处理研究。结果表明,C带显示结构异染色质,其位置在不同分裂相中较为稳定;R带即G带的反带,带纹较C带丰富,在粗线期最为明显,本文观察到不同的温育条件可影响R带产生的效果;N带和Ag带可相互参照比较,从而为NOR的准确定位提供依据;A带即荧光带,本文对其显带程序作了一定的改进。
Abstract:In this paperOxya chinensis (Thunberg) collected from the Yuelu Mountains in Changsha, Hunan Province andOxya hyla intricata (Stal) collected from Hangzhou, Zhejiang province were analysed by chromosomal C-banding、R-banding、N-banding、Ag-banding and A-banding. The results showed that the constitutive heterochromatin was stained in C-banding, and it relatively stable; R-banding was the reverse of G-banding, its bands were relatively obvious at the pachytene and abundent, it may be because of the selective extracts that cause the bands evident, the different effects were surveyed under the various incubation conditions; Both N-banding and Ag-banding can stain the nucleolar organizer and the two were compared in this paper; The A-banding was a little improved in the light of the banding process. 相似文献
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