类过氧化物DNA酶在生物传感器领域的研究进展

随着对DNA酶研究的进展,DNA酶的很多优点已经超越了传统的蛋白质酶,具有过氧化物酶催化活性的DNA酶在电化学生物检测上拥有很大的潜力。我们简要阐述了DNA酶的特性和应用,描述了其基本性质,对DNA酶在生物分析领域的应用进行了展望。     

VEGF、CD34、VEGF—C和VEGFR-3在胃癌中的表达及临床意义

目的：探讨胃癌组织中VEGF、CD34、VEGF-C和VEGFR-3的表达情况及临床意义。方法：采用免疫组化方法测定81例胃癌组织VEGF、CD34、VEGF—C和VEGFR-3表达情况,并结合患者的临床病理资料进行分析。结果：81例胃癌组织中MVD平均值为（42.95±14．79）个／视野,范围为13．00-68．33个／视野,VEGF、VEGF—C、VEGFR-3阳性表达率分别为74．1％、64．2％、67．9％。VEGF的表达与肿瘤的TNM分期、浸润深度、淋巴结转移有关,CD34的表达与肿瘤的分化程度、TNM分期、浸润深度、淋巴结转移有关,VEGF—C的表达与肿瘤的分化程度、浸润深度、淋巴结转移有关,VEGFR-3的表达与肿瘤的浸润深度、淋巴结转移有关。结论：VEGF、CD34、VEGF—C和VEGFR-3的表达与胃癌的浸润转移密切相关。     

一株西瓜枯萎病生防菌Bacillus methylotrophicus的筛选、鉴定及抑菌物质分析

【背景】西瓜专化型尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum f. sp. niveum, Fon)是西瓜枯萎病的致病菌,严重威胁连作西瓜的生产。【目的】筛选拮抗西瓜枯萎病菌的菌株并推测其无菌上清液(cell-free supernatant, CFS)的抑菌成分,为其在农业生产中的应用提供理论依据。【方法】利用平板对峙法筛选拮抗Fon的菌株,通过盆栽试验验证其抑制西瓜枯萎病的能力,并通过扫描电镜、共聚焦显微镜观察和抗氧化酶活性测定等方法研究Fon暴露在拮抗菌株次级代谢物下孢子形态的变化、膜的完整性和造成的氧化损伤,通过二代Illumina HiSeq联合三代PacBio Sequel测序平台进行全基因组测序、LC-MS非靶代谢组学、超高液相色谱系统和高分辨率质谱(UHPLC-ESI-MS/MS),明确拮抗菌株次级代谢物中的抑菌功能物质。【结果】从健康西瓜根际土筛选到拮抗Fon的一株优良菌株J4,盆栽试验表明其对西瓜枯萎病的防治效果为72.6%。经全基因组学鉴定为Bacillus methylotrophicus J4,该菌株可产蛋白酶、淀粉酶、葡聚糖酶和纤维素酶并有分泌铁载体的...     

皖南尖吻蝮蛇毒I型金属蛋白酶Acutolysin A的表达、重折叠及其生物学活性

将皖南尖吻蝮蛇毒I型金属蛋白酶acutolysinA基因克隆进原核表达载体pBAD/gIIIA后得到重组表达质粒 pDS。在 0 .0 2 %的L ( ) 阿拉伯糖的诱导下 ,质粒pDS在E .coliTOP1 0中表达了重组acutolysinA。与其天然形式相比 ,重组蛋白质在N端和C端各增加了 2 2个和 8个氨基酸残基 (均源于载体序列 ) ,并以包含体的形式存在于胞质中 ,表达量约占菌体总蛋白质的 5 %～ 1 0 %。在经 8mol/L尿素或 6mol/L盐酸胍变性及体外复性后 ,重组蛋白质获得了良好的免疫学及生物学活性。Western印迹及ELISA实验表明 ,天然金属蛋白酶acutolysinA与重组蛋白质具有良好的免疫反应相关性。动物实验表明 ,复性的重组蛋白质能明显引起皮下出血 ,其最低出血剂量约为 2 0 μg左右。1mmol/LEDTA、1mmol/LEGTA及 3mmol/L咪唑均能不同程度的抑制天然及重组金属蛋白酶的出血活性。PMSF没有明显的抑制效果。并对出血毒金属蛋白酶的出血机制进行了探讨     

基于灰色关联分析方法评价13种野生兜兰的迁地保护适应性

由于过度收集和对原生境地的破坏,我国野生兜兰已濒临灭绝,对其进行迁地保护十分必要。通过对引种的13种40份野生兜兰资源进行迁地栽培,并观测兜兰种质在迁移地的各种生长性状指标等,本研究利用灰色关联分析方法评价13种兜兰的迁地适应性,分析影响其迁地保护的关键因素。结果表明:(1)带叶兜兰、同色兜兰、长瓣兜兰、文山兜兰适应性较强,与理想种的关联度均在0.8以上;巨瓣兜兰、白花兜兰、小叶兜兰、紫纹兜兰、紫毛兜兰、硬叶兜兰适应性一般,与理想种的关联度在0.7~0.8之间;麻栗坡兜兰、杏黄兜兰、红旗兜兰适应性较差,与理想种的关联度均在0.6以下;(2)不同兜兰种类、同一种类不同产地兜兰种质的迁地生长适应性不同,来源地和栽培温度可能是影响其迁地保护的关键因子。     

ccpA基因对蜡样芽胞杆菌氨肽酶生产的影响

【目的】构建蜡样芽胞杆菌(Bacillus cereus)ccp A缺失菌株,并初步探索ccp A基因对其碳代谢及氨肽酶生产的影响。【方法】利用温敏型质粒p KSV7构建蜡样芽胞杆菌CZ ccp A基因缺失突变株CZΔccp A,通过回补菌株对敲除株表型进行验证;不同碳源发酵对比菌株碳代谢的变化,进行氨肽酶发酵优化。【结果】成功构建ccp A缺失菌株CZΔccp A与回补菌株CZ1,三株菌在LB培养基中生长无差异;在柠檬酸钠以及甘露低聚糖为碳源时,菌株的代谢产生明显变化;以D-木糖为单一碳源时,氨肽酶的产量提高48.25%。【结论】CZ ccp A基因对柠檬酸钠、甘露低聚糖、D-木糖为单一碳源时的代谢可能具有调控作用,ccp A基因缺失可以提高蜡样芽胞杆菌CZ的氨肽酶产量。     

右美托咪定复合不同麻醉深度在老年全髋关节置换术患者中的麻醉效果探讨及术后谵妄的危险因素分析

摘要 目的：探讨右美托咪定复合不同麻醉深度在老年全髋关节置换术（THA）患者中的麻醉效果,并分析其发生术后谵妄的危险因素。方法：选取我院2020年7月~2022年1月期间收治的130例老年THA患者。根据术中麻醉意识深度分为A、B、C组,其中A组41例,脑电双频指数（BIS）值为40~49;B组43例,BIS值为50~59;C组46例,BIS值为60~69。观察三组患者的麻醉效果,包括苏醒质量、术后谵妄发生情况、麻醉不良反应。根据术后是否发生谵妄将患者分为无谵妄组和谵妄组,采用单因素和多因素Logistic回归分析老年THA患者发生术后谵妄的危险因素。结果：A组、B组的恢复自主呼吸时间、呼叫开始至睁眼时间短于C组,且B组短于A组（P<0.05）。B组的麻醉不良反应发生率较A组和C组低（P<0.05）。麻醉不良反应发生率A组和C组对比无统计学差异（P>0.05）。B组的谵妄发生率较A组和C组低（P<0.05）。A组、C组的谵妄发生率组间对比无统计学差异（P>0.05）。单因素分析结果显示：术后谵妄的发生与年龄、体质量指数、美国麻醉医师协会分级（ASA）分级、冠心病、术中出血量、血钠浓度、术后低氧血症、术前合并低蛋白血症、术前焦虑、麻醉时间、术后贫血有关（P<0.05）。多因素Logistic回归分析结果显示：年龄偏高、术后贫血、体质量指数偏低、血钠浓度偏低、术中出血量偏多、术后低氧血症、麻醉时间偏长、术前合并低蛋白血症是老年THA患者术后谵妄发生的危险因素（P<0.05）。结论：BIS值为50~59的情况下复合右美托咪定治疗老年THA患者,可获得较好的麻醉效果,可降低术后谵妄、不良反应发生率。此外,年龄、术后贫血、体质量指数、血钠浓度、术中出血量、术后低氧血症、麻醉时间、术前合并低蛋白血症均是老年THA患者术后谵妄发生的影响因素。     

应用免疫荧光技术检测肺微小根毛霉的感染

近几年因源性导致患者机体免疫功能低下或受损有所增加,从而使深部丝状真菌感染有逐年上升的趋势,由于检测上的种种原因,大部份是尸检后发现,难以鉴定对属种,对临床治疗带来直接影响,为进一步探讨丝状真菌的快速诊断。我们从肺活组织中分离出的微小根毛霉,注射接种到不同剂量的＾６０Ｃｏ－ｒ辐照鼠体内后,间隔一定时间,用间接免疫荧光法检测,发现３ＧＹ辐照后１４－２８日检出率是４１．８７％（皮下注射）,６６．６６％     

无核黄皮生物学特性研究

无核黄皮是我国南方特有的新兴优良果树,本文报道其生长特性及开花结果习性,并就其对环境条件的要求,病虫害种类,发生和防治进行探讨。     

雌核发育和两性融合发育鱼卵调控精核受精发育的生化特性研究

两性融合生殖的鱼卵受精后,精核能疏松、解凝,形成雄性原核：雌核发育银鲫卵子受精后,精核发育受到抑制,无法形成原核。采用显微注射去膜精核以及细胞学和电镜观察的方法,本文对两类鱼卵受精后精核早期发育的生化性质进行了初步探讨,并着重研究了雌核发育银鲫卵子控制精核发育的生化特征。实验结果显示,两性融合生殖鱼类卵质中,一定量的Ｃａ２＋的存在,二硫键的还原作用对于精核的发育显然是必要的;而在雌核发育银鲫卵中,Ｃａ２＋的功能和二硫键的还原作用与精核发育受到抑制之间并无直接联系。银鲫卵质中似乎显示出异常的磷酸酶脂解活性,导致磷酸化过程无法进行,使精核解凝受到阻碍。另外,两性融合生殖的鱼卵重质层中具有大量诱导精核原核化的有关因子,而银鲫卵质中则缺少该因子（或活性极低）。银鲫卵质中还可能缺乏某些与雄性原核的核膜重组装有关的大分子物质。