利用RNA干扰机制抑制猪繁殖与呼吸综合征病毒的增殖

本文探讨依靠RNAi技术对猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)增殖的干扰作用。筛选到针对编码PRRS病毒核衣壳蛋白的N基因的两处靶序列作为候选片段,在MARC-145细胞上进行基因干扰实验研究。成功观测到由载体表达的小干扰RNA(siRNA)在MARC-145细胞中对PRRS病毒增殖的抑制现象。通过选取不同时间段对病毒进行TCID50检测,以及对CPE出现时间进行观察和免疫荧光技术,得到RNA干扰对PRRS病毒增殖抑制作用的动态数据。证实在真核细胞水平上,RNA干扰机制可以抑制PRRS病毒的增殖。实验结果表明,依靠载体表达的RNA干扰技术将会对今后针对PRRS病毒的新型疫苗开发提供一个新思路。     

球孢白僵菌九个菌株对赤拟谷盗成虫的毒效

球孢白僵菌Beauveria bassiana (Balsamo) Vuillemin是最重要的昆虫病原真菌,广泛用于防治世界各地的多种害虫.本研究评价了球孢白僵菌9个菌株对赤拟谷盗Tribolium castaneum (Herbst)成虫的致病性.将15头赤拟谷盗成虫浸入到4个浓度(1×106,l×107,l×lo8和l×109个分生孢子/mL)的白僵菌菌株中20 s,14 d内每日记录成虫的死亡率.结果表明:IRAN 440C菌株对赤拟谷盗成虫的LC50最低(5.04 ×l07个分生孢子/mL),IRAN187C菌株的最高(5.05 ×lo8个分生孢子/mL);DEBI 005菌株对赤拟谷盗成虫的LT5o最短(2.88 d),DEBI 014菌株的最长(4.96 d).根据LC50,LT50和死亡率结果得出IRAN 440C是防治这一害虫的理想菌株.     

J亚群禽白血病病毒NX0101株的TCID50与p27抗原之间的相关性研究

为了研究J亚群禽白血病病毒在细胞上接种后的半数细胞培养物感染量(TCID₅₀)与p27抗原的酶联免疫吸附试验（ELISA）的S/P值之间的相关性,并探讨其意义。本试验将J亚群禽白血病病毒NX0101株接种鸡胚成纤维细胞（CEF细胞）,换维持液后连续10d取样,检测10d的TCID₅₀值与p27抗原的S/P值之间的相关性。同时,将该毒株在DF-1细胞系上传代至20代,取其中的第1代、第5代、第10代、第15代和第20代分别进行TCID₅₀滴度的测定和p27抗原检测。结果表明:在CEF细胞上接种的NX0101株J亚群禽白血病病毒连续10d的TCID₅₀值与p27抗原之间存在显著的相关性（r=0.85277;P<0.0001）呈正相关;在DF-1细胞系上传的不同代数之间也呈显著正相关（r=0.93000;P=0.0220）。由此可以推测J亚群禽白血病病毒的TCID₅₀与p27抗原呈显著正相关,因而可以用ELISA法测得的p27抗原的S/P值对病毒的TCID₅₀值进行估测。     

香草酸对青钱柳离体胚萌发过程中生理生化指标的影响及各指标的相关性分析

采用离体胚培养法,研究了在培养基中添加81.33 mg.L-1(半抑制浓度,IC50)香草酸的条件下,青钱柳〔Cyclocarya paliurus(Batal.)Iljinsk.〕离体胚萌发过程中部分生理生化指标的变化,并对各指标间的相关性进行了分析。结果表明:随培养时间的延长,处理组(培养基中添加81.33 mg.L-1香草酸)及对照组离体胚的粗脂肪和蛋白质含量均呈逐渐降低的趋势,淀粉和可溶性糖含量均呈先降低后升高的趋势,异柠檬酸裂合酶(ICL)、酸性磷酸酶(AP)、碱性磷酸酶(ALP)和过氧化物酶(POD)活性以及葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G-6-PDH)和6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶(6-PGDH)联合活性均高于培养初期,且ICL、POD、AP和ALP活性不断提高;但处理组的粗脂肪和蛋白质含量均高于对照组且变化幅度相对较小,淀粉含量在培养前期高于对照、在培养后期低于对照,可溶性糖含量总体上高于对照,ICL、AP和ALP活性及G-6-PDH和6-PGDH联合活性的提高幅度整体上小于对照,培养后期POD活性显著高于对照。相关性分析结果表明:青钱柳离体胚萌发过程中粗脂肪和蛋白质含量与各种酶活性间均呈显著或极显著的负相关。研究结果显示:香草酸对青钱柳离体胚萌发过程中各种酶的活化产生抑制作用,导致主要贮藏物质的转化受阻,从而影响胚的萌发。     

重金属Hg2+、Cd2+对西藏拟溞的急性毒性研究

在静置不换水条件下,研究了重金属Hg2+、Cd2+对西藏拟溞的急性毒性作用。结果表明,Hg2+和Cd2+对西藏拟溞的24hLC50分别是468.3441μg/L、12.3140 mg/L,48hLC50分别是124.3158μg/L、6.8183 mg/L,Hg2+、Cd2+对西藏拟溞急性毒性的安全浓度分别是2.6277μg/L、0.6271 mg/L。Hg2+对西藏拟溞的毒性大于Cd2+的毒性。     

江浙蝮蛇蛇毒蛋白诱导K562细胞调亡的研究

目的：研究江浙蝮蛇蛇毒蛋白诱导K562细胞调亡。方法：通过电镜观察蛇毒蛋白作用后K562细胞的形态变化;MTT检测蛇毒蛋白对细胞增值的影响,同时应用流式细胞仪检测细胞凋亡数及其对细胞周期的影响;采用琼脂糖凝胶电泳观测凋亡片断。结果：蛇毒蛋白作用K562细胞后,能显著抑制细胞增值;LC50为4．96μg／mL,电镜可观察到凋亡形态学改变;电泳呈现典型的阶梯状条带,流式细胞仪检测到凋亡峰。结论：江浙蝮蛇蛇毒蛋白可诱导K562细胞调亡。     

人源CDC50基因的分子克隆及在E.coli中的表达

糖皮质激素受体 (GR)为一种特异性配体诱导的转录因子在机体发育、生理及行为等过程中发挥重要作用 .这一过程往往受到转录协同调节因子的控制 ,包括协同抑制因子或协同激活因子的作用 .克隆了人源双跨膜受体分子 ,并命名为hCDC5 0 .该分子编码区有 10 5 6bp ,与鼠源基因mCDC5 0在核苷酸水平有 90 %一致性 .将hCDC5 0蛋白的 16 4～ 317编码序列与GST融合构建原核表达质粒进行重组蛋白的表达与纯化并制备多抗 .用二维双向扩散检测抗体为阳性 ,抗原的滴度为12 5 μg/ml.体外翻译研究显示该基因编码蛋白约为 4 0kD ,与Western检测在动物细胞中的表达一致 .用hCDC5 0真核表达质粒与GR萤光报告系统共转染COS 7细胞显示 ,hCDC5 0对GR信号转导有明显的抑制作用 ,其对GR信号通路的抑制作用达 3～ 4倍以上 .hCDC5 0可能为一个新的协同抑制因子 ,在抑制GR的转录激活过程中起作用     

人源CDC50基因的分子克隆及在E.coli中的表达

糖皮质激素受体 (GR)为一种特异性配体诱导的转录因子在机体发育、生理及行为等过程中发挥重要作用 .这一过程往往受到转录协同调节因子的控制 ,包括协同抑制因子或协同激活因子的作用 .克隆了人源双跨膜受体分子 ,并命名为hCDC5 0 .该分子编码区有 10 5 6bp ,与鼠源基因mCDC5 0在核苷酸水平有 90 %一致性 .将hCDC5 0蛋白的 16 4～ 317编码序列与GST融合构建原核表达质粒进行重组蛋白的表达与纯化并制备多抗 .用二维双向扩散检测抗体为阳性 ,抗原的滴度为12 5 μg/ml.体外翻译研究显示该基因编码蛋白约为 4 0kD ,与Western检测在动物细胞中的表达一致 .用hCDC5 0真核表达质粒与GR萤光报告系统共转染COS 7细胞显示 ,hCDC5 0对GR信号转导有明显的抑制作用 ,其对GR信号通路的抑制作用达 3～ 4倍以上 .hCDC5 0可能为一个新的协同抑制因子 ,在抑制GR的转录激活过程中起作用     

植物比较解剖学在中国50年的进展和展望

系统与进化植物学是当今植物科学中的主流学科之一,植物比较解剖学是该学科的重要组成部分。根据近50年国内主要期刊统计,我国植物学者重点在种子植物的维管组织结构、叶及其表皮结构、花的结构和发育、种子及种皮特征、分泌组织以及一些原始种子植物等方面开展了比较解剖研究,为一些植物科、属的系统分类提供了解剖学依据。但在研究的植物种类、内容和方法尚存在不足,发表的论文相对较少。根据我国植物种质资源丰富,研究基础较好等特点,认为我国植物比较解剖学发展前景宽广,并对进一步发展提出一些建议。