改良菜心离体培养植株再生体系的研究(简报)

菜心(Brassica campestris L.subsp.chinensis Makino var.parachinensis Tsen et Lee)为十字花科芸薹属芸薹种中国白菜亚种中的一个变种,又名“菜薹”。它是我国南方特产蔬菜之一,在蔬菜的周年供应上有重要地位。目前迫切需要培育抗病虫、抗逆和具有其他优良农艺性状的新品种,以提高菜心的     

化肥种类对不同品种菜心吸收累积Cd的影响

用盆栽试验研究了不同形态Ｎ、Ｐ、Ｋ肥对菜心（Ｂｒａｓｓｉｃａｃｈｉｎｅｎｓｉｓ）吸收Ｃｄ的影响以及华南地区多个菜心品种对Ｃｄ的吸收累积的差异．结果表明,化肥形态主要影响土壤ｐＨ、水溶性和交换性Ｃｄ含量．５个品种菜心茎叶Ｃｄ浓度高低顺序为：迟菜心２号≥四九菜心１９号＞迟菜心２９号≥特青菜心８０天＞特青菜心６０天．水培试验表明,特青６０天单位根表面积吸Ｃｄ速率和向地上部的迁移率比迟菜心２号低．     

提高菜心离体植株再生频率的研究

ＡｇＮＯ３与ＡＢＡ 相配合,在离体培养条件下从３个菜心（Ｂｒａｓｓｉｃａ ｐａｒａｃｈｉｎｅｎｓｉｓＢａｉｌ．）品种（“４９－１９”、“６０Ｄ”和“７０Ｄ”）获得了高频率的植株再生。结果表明：在试验的３种外植体中,子叶－子叶柄再生能力最强。实生苗龄及接种方式影响植株再生频率。ＭＳ附加不同浓度的ＢＡＰ和ＮＡＡ,ＢＡＰ ２ ｍ ｇ／Ｌ与ＮＡＡ １ ｍ ｇ／Ｌ配合效果最好,植株再生频率可达２６．８％ 。培养基中单独添加ＡｇＮＯ３ 或ＡＢＡ 均能促进植株再生,且ＡｇＮＯ３ 作用优于ＡＢＡ。ＡｇＮＯ３（４ ｍ ｇ／Ｌ）和ＡＢＡ（０．５ ｍ ｇ／Ｌ）相配合获得了更高的植株再生频率：“４９－１９”达８９％ ,“６０Ｄ”达８４．３％ ,“７０Ｄ”达８６％ 。组织学研究表明,在本实验条件下菜心离体培养植株再生方式为外植体直接出芽。不定芽起源于子叶柄切口端维管组织的薄壁细胞;由此种细胞分裂形成分生细胞团,继而分化成芽。试管苗移入盆中获得成熟植株     

CPPU延缓菜心叶片衰老的作用

以“四九菜心”为材料,用3mg/L的CPPU处理采后菜心,在常温（25℃）下贮存7d,通过测定其叶片叶绿素、可溶性蛋白质、丙二醛（MDA）的含量和SOD、POD酶活性等指标,结果显示经CPPU处理的菜心其叶绿素、可溶性蛋白质、MDA含量与对照菜心差异显著（P＜0.01）,表明CPPU具有延缓采后菜心叶片衰老的作用。     

白菜雄性不育相关基因BcMF4基因功能的RNAi验证

BcMF4(Brassica campestris Male Fertility 4)是前一阶段从普通白菜 (Brassica campestris ssp. chinensis var. communis, syn. B. rapa ssp. chinensis var. communis)核雄性不育两用系的可育株中分离到的雄性不育相关基因。本研究根据BcMF4基因的cDNA序列设计两对特异引物, 从普通白菜花蕾cDNA中扩增出两个片断后连接至双元载体pBI12l中, 得到了RNAi (RNA interference) 植物表达栽体pBI-B4R, 并导入了农杆菌LBA4404菌株中; 通过组织培养途径转化菜心(B. campestris ssp. chinensis var. parachinensis), 72.2%的菜心转基因植株中45.8%的花粉为缩小而空瘪的畸形, 而且这些植株的花粉离体萌发率降低至23.7%; Northern杂交显示, 转基因植株的花粉畸形, 是由于BcMF4基因片段的插入使BcMF4基因的表达受到了抑制。结果表明, 采用RNAi技术下调了BcMF4基因的表达, 导致了菜心转基因植株部分花粉的不育, 证明BcMF4基因在普通白菜和菜心等白菜植物的花粉发育中起着重要作用。     

城市污泥对作物种子发芽及幼苗生长影响的初步研究

不同类型污泥及其堆肥对通菜、菜心种子发芽和幼苗生长影响的研究表明 ,深圳生污泥、佛山生污泥和广州生污泥及其堆肥对通菜种子的发芽率有明显的影响 ,前者仅为73% ,其余的在 85%左右 ,均低于对照处理 ( 93% ) .而它们对菜心种子的发芽率 ,除了深圳生污泥有抑制作用外 ( 75% ) ,其余均表现为促进作用 ( 90 % ) ,均高于对照处理 ( 85% ) .它们对于两种作物幼苗的生长则均表现为不同程度的抑制作用甚至是损害作用 .污泥及其堆肥中抑制作物种子发芽和幼苗生长的物质主要是有机酸和醛类等有机物 .生污泥经过消化作用或适当的堆沤作用可降解这些有机物 ,从而减弱或消除这种抑制作用 .因此 ,生污泥经过消化作用或适当的堆沤作用后用于农业生产更为安全 .但对刚施用污泥或污泥堆肥的耕地最好不要直接播种 .     

硅对菜心炭疽病发生、菜薹形成及硅吸收沉积的影响

采用不同浓度硅(Si)对菜心进行处理, 研究了Si对菜心炭疽病发生、菜薹形成及Si吸收沉积的影响.结果表明：Si对菜心炭疽病的发生有明显的调控作用,并存在基因型差异;感病品种2.5 mmol·L^-1和抗病品种0.5 mmol·L^-1Si处理对炭疽病菌的抗性最强,病情指数最低,菜薹产量最高.Si对菜心品质也有明显影响,不同浓度Si处理可促进感病品种的叶绿素、粗纤维、Vc的合成,并诱导可溶性糖的生成,且叶绿素、粗纤维含量随Si处理浓度的提高而增加;抗病品种的叶绿素含量随Si处理浓度的增加明显增加,而Vc含量下降,Si对抗病品种的粗纤维、可溶性糖含量影响不显著;Si对两个品种菜薹的粗蛋白和可溶性蛋白质含量影响均不显著.施Si明显提高了菜心叶片Si的积累,且叶片的Si含量随着Si处理浓度的增加而显著提高;叶片组织沉积的Si粒大小不一,Si在叶片表皮组织呈不均匀分布.表明Si在菜心叶片中的积累可提高植株的抗病能力,但其积累量与植株的抗病能力不呈直线相关关系.     

菜心炭疽病菌拮抗细菌的筛选及鉴定

从土壤中分离筛选获得2株对菜心炭疽病菌——希金斯炭疽菌(Colletotrichum higginsianum)具有强烈抑制作用的芽孢杆菌菌株19E2、13A1。通过形态特征观察、生理生化特性测定, 结合16S rDNA序列同源性分析以及部分基因特异性序列分析, 将2株菌鉴定为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)。抑菌试验的结果表明: 当19E2和13A1的培养液在PDA培养基中的浓度为10%时, 抑菌率分别达到75.62%和85.35%, 当培养液浓度升高到20%时, 可完全抑制菜心炭疽病菌生长。抗菌谱测定结果显示: 2株菌对辣椒炭疽菌(C. capsici)、胶孢炭疽菌(C. gloeosporioides)、灰霉 (Botrytis cinerea)、苞叶芋柱帚霉(Cylindrocladium spathiphylli)和尖镰孢(Fusarium oxysorum)等重要病原菌具有明显的作用效果。     

芸苔（菜心）茎叶中的几丁质结合蛋白的分离纯化和某些特性分析

用脱氨再生几丁质亲和层析和羧甲基-纤维素CM52离子交换柱层析从芸苔（菜心）的茎叶中纯化了4种几丁质结合蛋白：CBPa,CBPb、CBPc和CBPd,SDS-PAGE显示CBPa和CBPb的分子量分别为29．04kDa和30．68kDa。凝胶过滤方法测定CBPa和CBPb的分子量分别为29．04kDa和31．2kDa,表明两者都是单体酶。4种CBP蛋白均有几丁质酶活性,其中CBPa和CBPb还有溶菌酶活性。EDTA对CBPa和CBPb溶菌酶的活性均无影响,各种类型的几丁质对CBPa和CBPb都有较强的吸附作用,PAS染色法分析表明CBPa和CBPb均为糖蛋白。     

直接从人工老化的菜心干种子中提取基因组DNA用于RAPD分析

利用 4 0℃、1 0 0 %RH对菜心种子进行人工加速老化处理获得了不同活力的种子批 ,利用平衡酚_氯仿法直接从人工老化的菜心干种子中提取基因组DNA ,并对提取的基因组DNA进行了RAPD扩增。结果表明 ,所提取的基因组DNA量多 ,而且比较整齐一致。引物S2 0 8扩增所获得的基因组DNA指纹图谱上的DNA带清晰、明亮 ,从而表明利用本方法从人工老化菜心干种子中直接提取的基因组DNA完全可以用于RAPD分析。